黄曲霉毒素检测.ppt
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1、黄曲霉素检测黄曲霉毒素(aflatoxin,简称为AF)是到目前为止发现的毒性最大的真菌毒素。它可通过多种途径污染食品和饲料,直接或间接进入人类食物链,威胁人类健康和生命安全,对人体及动物内脏器官尤其是肝脏损害严重,该毒素是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物,普遍存在于霉变的粮食及粮食制品中。黄曲霉毒素十分耐热,加热至230才能被完全破坏,因此一般烹饪加工也不易消除。黄曲霉毒素介绍黄曲霉毒素分布范围广黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果(特别是花生和核桃中)中。日常检验发现在大豆、谷物、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素(其中以花生和玉米污染最严重)。毒
2、性极强黄曲霉毒素进入人体后主要经消化道吸收,大部分分布在肝脏、肾脏。因此主要引发肝癌、胃癌等,还可以诱发骨癌、肾癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌等。黄曲霉毒素如不连续摄入,一般不在体内积蓄。一次摄入后约1周将大部分排出。只有严重霉变的粮食才可能会含有大量毒素,导致急性毒性。耐热性强在一般的烹调加工温度下,黄曲霉毒素被破坏的很少;即使是200高温加热,也不能完全正确破坏。一般黄曲霉毒素的裂解温度为280,黄曲霉毒素B1的裂解温度为268。黄曲霉毒素的种类迄今为止发现的黄曲霉毒素主要有4种:即B1、B2、C1、G2,其中B1被认为是主要的有毒物质,有2种这些毒素的代谢产物M1和M2。其中黄曲霉毒素B1主
3、要存在于农产品,动物饲料,中药等产品中;黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后在体内经羟基化代谢的产物,一部分从尿和乳汁排出,一部分存在于动物的可食部分,如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中,其中以乳最为常见。黄曲霉毒素M1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素B1的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品,所以其危害性更大。中国食品中黄曲霉毒素的限量标准免疫分析法仪器分析法化学分析法生物鉴定法检测方法检测方法黄曲霉毒素的检测方法目前,测定食品中的黄曲霉毒素的方法有:薄层层析法薄层层析法、液相色谱法液相色谱法、放射免疫分析法、酶联免疫法酶联免疫法、亲和层析法亲和层析法、微柱筛选法微柱筛选法、金标
4、试纸法金标试纸法等。这些方法或多或少都具有如下不足之处:v(1)、在操作过程中,需要使用剧毒的黄曲霉毒素M1作为标定标准物,对操作人员造成巨大的沾v污危险,而且黄曲霉毒素M1标准物质购买十分困难。v(2)、操作过程烦琐、复杂、时间长,劳动强度大。v(3)、仪器设备昂贵、笨重、操作复杂,难以实现现场快速分析。v(4)、灵敏度较差,重复性很难得到满意结果。薄层色谱法(TLC)v其原理是:样品经提取、浓缩、薄层分离后,在365nm波长的紫外光照射下,黄曲霉毒素B1、B2产生紫色荧光,G1、G2产生绿色荧光,然后根据其在薄层板上显示的荧光的最低检出量来定量。v优点是:所用的试剂、设备简单,费用低廉,容
5、易掌握,适用大量样品的分离、筛选,一般的实验室均可开展,属于定性和半定量的功能。高效液相色谱法(HPLC)以C18柱为固定相,以水+异丙醇+乙腈(80+12+8)为流动相,用荧光检测器进行检测,其激发波长365nm,发射波长450nm,以保留时间定性,峰面积定量,这些基本参数大致相同,但在流动相的选用上却差异较大。样品用甲醇和水混合液进行萃取,随后进行衍生化处理,处理后溶解于流动相,进行液相色谱测定。酶联免疫吸附法(ELISA)v是抗原(抗体)吸附剂和用酶标记的抗体(抗原)与标本中的待测物(抗原和抗体)起特异的免疫学反应,用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度。大致采用两种方式检测黄曲霉毒素,一
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