土壤中金霉素的降解大学论文.doc
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1、毕业论文 题 目: 土壤中金霉素的降解 目录1 前言52 实验部分52.1 仪器与试剂52.1.1 实验仪器52.1.2 实验试剂62.2 标准物质及溶液配制62.3 土壤样品的制备和提取62.3.1 土壤样品的制备:62.3.2金霉素的提取62.4 HPLC-UV测定色谱柱:YP-ODS柱(C18柱):72.5 金霉素的降解试验72.5.1 降解浓度的设立72.5.2 土壤处理72.5.3 称取土样72.5.4 降解试验73 实验结果与讨论73.1 HPLC-UV色谱分析条件的确立与优化73.2土壤样品提取条件的确定优化93.3 降解试验结果94 结论115 资金支持11土壤中金霉素的降解
2、指导教师 (河北北方学院理学院化学系,河北 张家口 075000)摘 要:建立了金霉素的高效液相色谱-紫外(HPLC/UV)测定法,采用室内模拟培养试验研究了金霉素样品在土壤中的动态变化以及降解情况.均质样品用PH4.00.5Mcllvaine-Na2EDTA 缓冲溶液提取,经超声、离心,水性膜过滤后,采用HPLC/UV 检测.金霉素在0.050.8g /mL 浓度范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.99.在0. 05、0. 10、0. 15 mg /kg 的加标水平下,回收率为86.44%96.18%.结果表明,金霉素(添加浓度4mg/L,8mg/L,16mg/L)能在土壤中迅速进入降解
3、,半衰期为1d,含量变化呈“ L ”型.关键词:高效液相色谱;金霉素;土壤;降解The degradation of chloroteracycline in soilYan Chengcheng(Department of Chemistry,College of Science, Hebei North University,Zhangjiakou Hebei,075000, China)Abstract: This paper developed the HPLC/UV to determine the residues of chloroteracycline in soil samp
4、le, and studied the dynamic changes and the degradation of chloroteracycline by the indoor simulation training test. Homogeneous samples were extracted by Mcllvaine-Na2EDTA buffer solution ( PH4.0 0. 5) , was ultrasonic extracted and centrifuged, then the extractive solution was through the membrane
5、 filtration, and detected using HPLC/UV. The linear concentration of chloroteracycline ranged from 0.05 g/mL to 0.8 g/mL, and the correlation coefficient was above 0.99. The recoveries were 86.44% 96.18%. The results showed that the chloroteracycline(dosage 4 mg/L, 8 mg/L, 16 mg/L) can quickly be de
6、gradated in soil and the changes of content showed L type.Keywords: high performance liquid chromatography (HPLC); chloroteracycline; Soil; degradation1 前言金霉素( chloroteracycline,CTC) 属于四环素类抗生素药物,是由链霉菌产生的一类广谱抗生素,分子结构如图1所示,主要用于防治动物肠道感染和促进动物生长,在猪和肉鸡上应用最为广泛1 .图1金霉素分子结构研究表明,动物饲喂四环素后,有 25% 75% 甚至 70% 90%
7、被排放到粪便废弃物中且不易被降解,并且在施用粪肥的土壤中长期持留2 ,将给土壤带来严重的生态风险3 .中国大多数规模化畜禽养殖场缺少环境治理和综合利用设施,畜禽粪便会不经妥善处理直接排入环境 .随畜禽粪便进入土壤的金霉素在土壤中的留存与分解状况不但可以预示这类抗生素的环境风险,而且可能影响作物的生长状况.目前研究主要集中在金霉素在某种畜禽粪便中的降解情况 或在粪肥及土壤中的吸附解吸情况4 ,金霉素可被畜禽粪便强力吸附,在新鲜的粪肥中含量很高 ,中国 7 省、市、自治区的典型规模化养殖场猪粪中金霉素平均含量为 3. 57 mgkg-1,最高达121. 78 mgkg-1 ,经过堆腐处理后,其含量
8、有所下降 ,自然光照下金霉素在鸡粪中的降解半衰期为 3. 24 d,降解率可达 97%5,6 .外源添加纯品金霉素在土壤中降解过程主要发生在前 10 d,且对土壤酶活性有抑制作用 ,用动物排泄物施肥的土壤,040 cm 土层金霉素最大浓度高达 26. 4 mgkg-17 .但有关于畜禽粪便中所含的金霉素进入土壤后的动态变化情况还鲜见报道.因此,本研究通过室内模拟培养试验方式,研究金霉素进入土壤后的动态变化规律及变化差异,并探讨其含量变化的机制,为环境的保护提供科学依据. 2 实验部分2.1 仪器与试剂2.1.1 实验仪器 LC-2OAT 液相色谱仪,配SPD-20A 紫外可见检测器和CBM-1
9、02 色谱工作站(岛津有限公司);JJW-300 精密净化交流稳压电源(东方集团易事特公司);YP-ODS 色谱柱(150L4.6)(岛津有限公司);DP-01 真空泵(Tianjin,Do-chrom technology Co. Ltd.);800 型离心沉淀器(上海手术器材厂);MS1 振荡器(IKA)(德国,IKA W公司);全套过滤玻璃设备;电子天平(感量0.1mg)(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司);500mL 棕色试剂瓶,100mL容量瓶;移液管(1mL、5mL、10mL、25mL、50mL);100mL 量筒;5mL 全玻璃注射器;50mL 烧杯若干;10mL 聚丙烯试管若干
10、;0.45m 水性滤膜;一次性纸杯;滴管;吸耳球;PH 试纸;保鲜膜.2.1.2 实验试剂金霉素(CTC)标准品,纯度92.5%(德国进口);甲醇,液相色谱专用纯度,(天津市永大化学试剂有限公司);乙腈,色谱纯,(天津市永大化学试剂有限公司);柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠、草酸,均为分析纯,(天津市北方天医化学试剂厂);纯净水,代替二次水,(天津市娃哈哈饮料有限公司).2.2 溶液配制 金霉素标准储备溶液:准确称取金霉素标准物质0.0108g 溶于甲醇(色谱纯),定容100mL,获得浓度为1.000mg/mL(1000mg/L)的标准储备液,4冷藏.临用前再按要求配成系列标准
11、溶液.金霉素标准工作溶液:准确移取一定体积的标准储备液,加水稀释,配制浓度为1、2、4、5、8、10mg/L溶液.Mcllvaine-Na2EDTA 缓冲溶液( 提取液) ,分别称取12.9 g 柠檬酸、10.9 g 磷酸氢二钠、37.2 g 乙二胺四乙酸二钠,加900 mL 水溶解后,用1 mol /L 氢氧化钠溶液调pH 至4.0 0.5,加水稀释至1000 mL.2.3 土壤样品的制备和金霉素的提取2.3.1 土壤样品的制备:土壤样品取自河北北方学院西校区实验田,土壤为耕作土层,采集土壤样品大于10Kg,自然风干、粉碎、缩分,获得实验土样2 Kg,土壤进一步自然风干,粉碎,过筛(100目
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