氨检测作业指导书.doc

氨检测作业指导书氨检测作业指导书1 1.试剂及其配制试剂及其配制1.1 无氨蒸馏水每 1.0L 蒸馏水中加入 15.0ml 氢氧化钠溶液(0.5mol/L)和 2.0g 过硫酸钾，放在蒸馏水器中，先敞口煮沸约 10 分钟，接好冷凝器，收集馏出液于聚乙烯瓶中，真至蒸馏器中剩下 150ml 左右，所收集的蒸馏水既为无氨蒸馏水，盖紧瓶塞，待用。1.2 氢氧化钠溶液称取 400g 氢氧化钠(优级纯)，溶于 2000ml 无氨蒸馏水中，蒸煮浓缩为 1000ml 冷却后，贮于聚乙烯瓶中，盖紧瓶塞。1.3 盐酸（1+1）将 500ml 盐酸与同体积的蒸馏水混匀。1.4 次溴酸钠氧化剂（1）溴酸钾溴化钾贮备溶液称取 2.8g 溴酸钾和 20.0g 溴化钾溶于 1000ml 无氨蒸馏水中低温保存，此溶液有效期半年。（2）次溴酸钠氧化剂使用溶液吸取贮备溶液 1.0ml 于棕色试剂瓶中，加入 49ml 蒸馏水，加入 3.0ml 盐酸（1+1） ，迅速盖上瓶塞，混匀，置于暗处 5 分钟，加入 50ml 氢氧化钠溶液，混匀，此溶液在 35以下可稳定 8h，临用前配制。1.5 磺胺溶液（2g/L）称取 2.0g 磺胺溶液 1000ml 盐酸（1+1）中，贮于棕色试剂瓶中，有效期 2 个月1.6 盐酸萘乙二胺溶液（1g/L）称取 0.5g 盐酸萘乙二胺，用少量蒸馏水溶解后，稀释至 500ml，贮于棕色试剂瓶中，低温保存，有效期 1 个月(如出现棕色应重配)。1.7 标准贮备液称取 0.5349g 氯化铵 （或 0.4716g 硫酸铵） （预先在100下烘 1h）溶于少量水中，全量移入 1000ml 容量瓶中，稀释至标线，混匀。加 1ml 三氯甲烷混匀，贮于1000ml 棕色试剂瓶中，低温保存，有效期半年。浓度为140mg/L(或 100mg/L)。1.8 标准使用液移取 1.0ml 标准贮备液于 100ml 容量瓶中，加水至标线，混匀，临用前配制，浓度为 1.4mg/L（或 1.0mg/L） 。2 2.绘制工作曲线绘制工作曲线2.1 在国家海洋局第二海洋研究所制配的铵盐标准溶液浓度分别为0.00，2.00，4.00，6.00umol/L(0.000，0.028，0.056，0.084mg/L)中各加入 5ml 次溴酸钠使用溶液，混匀，氧化30 分钟。室温较低时，可适当延长氧化时间。2.2 各加入 5ml 磺胺（2g/L）混匀，放置 5 分钟。2.3 各加入 1ml 盐酸萘乙二胺溶液（1g/L）,混匀，放置 15 分钟，显色 2 小时内测定（显色过程中应避免阳光直射） ，颜色可稳定 4 小时。2.4 选 543nm 波长，2cm 比色皿，以无氨水作参比，测定吸光值 Ai，其零浓度为 A0。2.5 以吸光度 Ai-A0 为纵坐标，相应的浓度为横坐标，绘制工作曲线，写出标准曲线方程。3 3.水样测定水样测定3.1 量取 50ml 已经过滤的水样于具塞比色管中（双样）3.2 按上述 25 步骤测定水样的吸光度 Aw。3.3 量取 5ml 刚配制的次溴酸钠溶液于 100ml 具塞锥形瓶中，立即加入 5ml 磺胺溶液，混匀。放置 5 分钟后加50ml 水，然后加入 1ml 盐酸萘乙二胺溶液，15 分钟后测定分析空白的吸光值 Ab1；按同样方法作平行双样测得吸光值 Ab2，两次平均值既为 Ab。4 4.数据计算数据计算按下列公式计算：(NO3-N)=(An-a)/b其中 An=Az-XA(NO2-N)×52/61；P(NO3-N)水样中氨的浓度 mg/L；An水样中氨的吸光值；X氨和亚硝酸盐测定时，所用测定池的长度比；Az总亚硝酸盐的吸光值；Az（NO2-N）水样中原有亚硝酸盐的吸光值。5 5.稀释倍数稀释倍数当水样吸光值超出工作曲线系列最高点吸光值时，要用蒸馏水对水样进行稀释，使稀释后水样吸光值位于工作曲线中部为宜，则稀释后水样浓度计算式如下：(NO3-N)=(An-a)/b其中 An=Az-（X/n）×A(NO2-N)×52/61N 为稀释倍数