血清-谷氨酰转移酶(-GGT)速率法测定.doc

血血清清 - -谷谷氨氨酰酰转转移移酶酶 ( ( - -G GG GT T) )速速率率法法 测测定定1 1. . 实实验验原原理理GGT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以-谷氨酰-3-羧基 -对硝基苯胺为底物，将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽，生成对硝基苯胺和-谷氨酰双甘肽。在405nm 进行吸光度检测，吸光度升高的速率与标本中GGT 活力成正比。-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺+ 双甘肽 GGT 对硝基苯胺 + -谷氨酰双甘肽2 2. . 标标本本：2.1 病人准备：无特殊。2.2 类型：血清或 EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 室温可保存 8 小时； 28可保存 3 天；-20保存至少可稳定1 周。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 奥林巴斯 -GGT 测定试剂盒（试剂1 试剂 2）6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品： 具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品 GGT 校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行GGT 活力检测，可以直接使用A/min 均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算GGT 活力的计算因子见下表：A A/ /m mi in n××因因子子 = = G GG GT T 活活力力 U U/ /L L 底物起始的反应（ 37） 样品起始的反应（37）405nm 1421 11581 12 2. . 参参考考值值范范围围 3、 4：女性 7-32U/L；男性 11-49U/L。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1 ：-谷氨酰转移酶（ GGT）又称 -谷氨酰转肽酶。存在于肝脏和胆汁中，是肝胆疾病最敏感的指示物。因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值，因此-谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶等其它酶，-谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断非常有价值。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 2-500U/L。14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)批间精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)样品 139.90.992.48样品 141.50.621.49样品 273.60.851.16样品 272.30.610.85样品 32061.320.64样品 32040.740.3614.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 78 个样品进行 GGT 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+1.00U/L；r=0.999。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为2U/L。14.5 病人结果可报告范围： 2-500U/L。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法对 GGT 活力检测的最大500U/L，当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作 1+5 稀释，重新测定，结果乘以6。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法对 GGT 活力检测的最大500U/L，当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+5 稀释，重新测定，结果乘6。17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L ，胆红素浓度 684mol/L，血红蛋白浓度 4.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献1.Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.80-6.2.Persijn JP, van der Silk W. A new method for the determination of gamma-glutamyltransferase in serum. J Clin Chem Clin Biochem 1976; 14:421-7. 3.Szasz G. Gamma-Glutamyltranspeptidase. In: Bergmeyer HU. Methoden der enzymatischen Analyse. Weinheim: Verlag Chemie, 1974.p. 757.4. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of several enzymes in plasma at different measuring temperatures. Klin Lab 1992;38:555-61.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。