血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法.doc

血清葡萄糖血清葡萄糖 GLUGLU 己糖激酶己糖激酶 HKHK 法测定法法测定法1 1. . 实实验验原原理理己糖激酶紫外比色测定法。HK葡萄糖 + ATP -G-6-P+ ADPMg2+G6PDHG-6-P + NAD+ -6-磷酸葡萄糖 +NADH + H+2 2. . 标标本本：2.1 病人准备： 12 小时禁食。2.2 类型：血清或血浆（ EDTA，肝素或氟化钠），标本最好不要溶血。迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。3 3. . 标标本本存存放放： 血清、血浆应在血液采集1 小时内，尽早分离。加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：1525保存可稳定 1 天,48保存可稳定 7 天。 血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在 25下可稳定 8 个小时，在 4下可稳定 72 小时。尿样应保存在 28下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在 28下稳定至少 5 天， 5 天内不检验的标本应在收集后立即储存在 -20的条件下。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染、超时送检的的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 威特曼血糖测定试剂盒 试剂 1 试剂 2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如排向下水道请用大量的水冲洗。6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品血糖校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以 mmol/L 报告。手工测定计算方法为：Au葡萄糖浓度（ mmol/L） ×校准液浓度As1 12 2. . 参参考考值值范范围围： （mmol/L）新生儿脐带血 3.58.81 小时 2.05.52 小时 2.24.9514 小时 1.94.31028 小时 2.64.54452 小时 2.74.4儿童（空腹）16 岁 4.17.0719 岁 3.95.9成人（空腹） 3.96.4参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。脑脊髓液（ CSF）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至 50%血清葡萄糖），病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性脑膜炎（肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使CSF 葡萄糖值在正常值以下。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 0.128mmol/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批间精密度n=20x(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)样品 15.050.0470.94样品 13.650.0772.11样品 26.500.0590.91样品 26.720.1422.11样品 316.100.1270.79样品 316.540.2961.7914.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 76 个样品进行 GLU 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00mmol/L；r=0.998。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.1mmol/L。14.5 病人结果可报告范围： 0.128mmol/L1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法线性上限为28mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:10 稀释，重新测定，结果乘以11。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理：女女性性及及婴婴儿儿的血糖测定值22.2mmol/L；男男性性 的血糖测定值22.2mmol/L；新新生生儿儿 的血糖测定值16.6mmol/L 时， 在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为28mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作 1:10 稀释，重新测定，结果乘以 11。17.2 干扰物质：使用试剂起始法，当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度 684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.131-7.2. Sacks DB. Carbohydrates. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. p. 750-808.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。