血清甘油三酯酶试剂法测定法.doc

血血清清 甘甘油油三三酯酯 酶酶试试剂剂法法 测测定定法法1 1. . 实实验验原原理理脂蛋白酯酶（ LPL） 、甘油激酶（ GK） 、甘油 -3-磷酸氧化酶（ GPO） 、过氧化物酶 (POD)、Trinder 反应偶联比色终点法。反应式如下：LPL甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸GK甘油 + ATP 甘油 -3-磷酸 + ADPGPO甘油 -3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2POD2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O2 2. . 标标本本：2.1 病人准备： 12 小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA 抗凝血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 血清稳定性： 2025保存可稳定 2 天；48保存可稳定 1 周； -20保存至少可稳定1 年。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 威特曼甘油三脂试剂盒 试剂 1 试剂 2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95 g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品甘油三脂校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 （单位： mmol/L）合适范围： 2.3mmol/L高度危险临界值： 2.34.5mmol/L高度危险范围： > 4.5mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 甘油三酯是甘油与3 个脂肪酸形成的酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒，运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛，以检出致动脉粥样硬化的危险；监视降脂治疗的效果。近期的研究说明，甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白（LDL）的升高，特别对发生冠心病（CHD）具有高度危险。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病有关。流行病学研究观察到，若同时出现血清甘油三酯>2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）2.3mmol/L）的临床应用需结合CHD 的其他危险因子。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 0.0111.3mmol/L。14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)天间精密度n=20x(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)样品 10.910.0141.53样品 11.130.0181.60样品 21.200.0221.82样品 22.000.0211.04样品 32.400.0351.47样品 32.290.0241.0614.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 77 个样品进行 TG 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x+0.014mmol/L；r=0.993。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。14.5 病人结果可报告范围： 0.0111.3mmol/L。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法对甘油三酯的检测范围为0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+4 稀释，重新测定，结果乘以5。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理： 当甘油三脂测定值 >4.5mmol/L时， 在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法对甘油三酯的检测范围为0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+4 稀释，重新测定，结果乘以5。17.2 干扰物质：当样品中胆红素浓度684mol/L 时没有观察到干扰。当抗坏血酸浓度341mol/L、血红蛋白浓度 2.50g/L 时有干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献1. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.809-61.2. Cole TG, Klotzsch SG, McNamara J. Measurement of triglyceride concentration. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997.p.115-26.3.Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary heart disease in clinical practice. Eur Heart J 1998;19:1434-503.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。