细胞培养基本方法(复苏、换液、传代、冻存)课件.ppt
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1、1.紫外灯照射细胞室紫外灯照射细胞室30分钟分钟,风机运行风机运行10分分钟后方可进入实验室钟后方可进入实验室.2.穿专用的口罩穿专用的口罩,帽子帽子,拖鞋拖鞋,工作衣等工作衣等.3.带手套带手套,并用酒精擦拭之并用酒精擦拭之.4.准备好实验必需用品准备好实验必需用品.5.超净工作台内操作前用酒精棉球擦拭台面超净工作台内操作前用酒精棉球擦拭台面.6.超净工作台内操作完成后,超净工作台内操作完成后,要用酒精棉球擦拭台面要用酒精棉球擦拭台面,除了酒精灯除了酒精灯,镊子镊子,试管架试管架等物品外等物品外,其他都要拿出工作台外其他都要拿出工作台外.紫外灯照射紫外灯照射30分钟分钟.方法方法吸出细胞悬液
2、少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和吸出细胞悬液少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。计数板之间。静置三分钟静置三分钟镜下观察,计数板四大格细胞总数。公式为:细胞数镜下观察,计数板四大格细胞总数。公式为:细胞数/ml=四大格细胞总数四大格细胞总数/4 104个个注意注意镜下见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算镜下见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算;若细胞团数量占若细胞团数量占10%以上,重新制备细胞悬液。以上,重新制备细胞悬液。计数时,计左侧和上方的压线细胞,右侧和下方的压线细计数时,计左侧和上方的压线细胞,右侧和下方的压线细胞不应该计在本方格之内。胞不应该计在本方格之内。
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