宠物临床诊疗生化讲义课件.ppt
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1、宠物临床诊疗生化宠物临床诊疗生化目目 录录一、生化仪的介绍(以一、生化仪的介绍(以IDEXX IDEXX 为例)为例)二、样本采集与制备二、样本采集与制备三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床选择四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义一、生化仪的介绍(以一、生化仪的介绍(以IDEXX IDEXX 为例)为例) 生化仪生化仪 干式干式 时间:时间:8 8分钟分钟 项目任意(单次最多项目任意(单次最多1212项)项) 多种动物不同年龄模式多种动物不同年龄模式 试剂片试剂片将绿色盒子存放在冰箱冷藏室,将绿色盒子存放在冰箱冷藏室,紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。二、
2、样本采集与制备二、样本采集与制备 全血、血清、血浆的区别?全血、血清、血浆的区别? 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本? 样品如何保存?样品如何保存? 采多少样本?采多少样本? 血浆样本的检查?血浆样本的检查?血浆血浆= =血清血清+ +纤维蛋白原纤维蛋白原血浆血浆= =全血全血- - 血细胞血细胞二、样本采集与制备二、样本采集与制备 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?全血样本收集全血样本收集血清样本收集血清样本收集血浆样本收集血浆样本收集建议头皮针:静脉采血,小动物多用紫
3、色建议头皮针:静脉采血,小动物多用紫色采血管:红帽、绿帽、紫帽分别指示无采血管:红帽、绿帽、紫帽分别指示无抗凝剂、肝素锂、抗凝剂、肝素锂、EDTAEDTA,根据需求自行,根据需求自行选择,采集的血液需立即放入其内。选择,采集的血液需立即放入其内。无菌采血管:一般用无菌采血管:一般用2mL2mL注射器,针头过细易造成溶血注射器,针头过细易造成溶血计数娴熟的专业人员进行操作计数娴熟的专业人员进行操作禁食、禁食、安静的动物:应激可导致血糖显著安静的动物:应激可导致血糖显著升高,镁离子(升高,镁离子(MgMg)、天门冬氨酸氨基转)、天门冬氨酸氨基转移酶(移酶(ASTAST)、乳酸脱氢酶()、乳酸脱氢酶
4、(LDHLDH)、肌)、肌酐酸激酶(酐酸激酶(CKCK)磷酸酶()磷酸酶(PHOSPHOS)可能升)可能升高。高。采血视频采血视频点击播放点击播放 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?血清样本收集血清样本收集 全血样本加入无抗凝剂或促凝管中,凝固取上清液全血样本加入无抗凝剂或促凝管中,凝固取上清液血浆样本收集血浆样本收集 全血样本加入全血样本加入肝素锂肝素锂抗凝管中离心,取上清液抗凝管中离心,取上清液二、样本采集与制备二、样本采集与制备 为何建议使用血浆样本进行检测?为何建议使用血浆样本进行检测? 比血清来的更快,血清凝固期间会造成乳
5、酸、氨等指标的升高,葡比血清来的更快,血清凝固期间会造成乳酸、氨等指标的升高,葡糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。 抗凝管为何选择肝素锂而非其他?抗凝管为何选择肝素锂而非其他? EDTA EDTA、枸橼酸钠枸橼酸钠会影响会影响CaCa、K K等指标的偏差等指标的偏差二、样本采集与制备二、样本采集与制备 样品如何保存?样品如何保存?全血保存全血保存含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在1 1小时内完成检小时内完成检验时,样本必须离心后,并将血浆转移出保存。验时,样本必须离心后,
6、并将血浆转移出保存。建议您于采血后立即处理及分析样本,可得到最佳结果。建议您于采血后立即处理及分析样本,可得到最佳结果。血清、血浆保存血清、血浆保存血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至新的采血管,关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在,新的采血管,关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在,会影响血清蛋白。若您无法在会影响血清蛋白。若您无法在4 4小时内完成检验,冷藏保存。若小时内完成检验,冷藏保存。若您无法在您无法在4848小时内完成检验,冷冻保存。小时内完成检验,冷冻保存。二、样本采集与制备二、样本采集与制备
7、采多少样本?采多少样本?依据:依据:做多少项目做多少项目公式:公式:试剂片试剂片 8 8,样本总量,样本总量(uL)=50uL(uL)=50uL基本量基本量+10uLx+10uLx试剂片数试剂片数 试剂片试剂片 8 8,样本总量,样本总量(uL)=100uL(uL)=100uL基本量基本量+10u1x+10u1x试剂片数试剂片数样本需求量参考表样本需求量参考表试剂片数试剂片数样本量样本量(u1)(u1)试剂片数试剂片数样本量样本量(u1)(u1)1 1606010102002002 2707011112102103 3808012122202204 4909013132302305 51001
8、0014142402406 611011015152502507 712012016162602608 813013017172702709 919019018182802800.5 CC0.5 CC的全血可以得到的全血可以得到225u1225u1血浆,足矣!血浆,足矣! 血浆样本的检查?血浆样本的检查? 为何检查?为何检查? 指示什么?指示什么?二、样本采集与制备二、样本采集与制备不同情况下可能会影响结果,如不同情况下可能会影响结果,如: :溶血。您可藉由这溶血。您可藉由这些肉眼观察离心后的样本,以修正您的检测组合。些肉眼观察离心后的样本,以修正您的检测组合。黄疽黄疽视觉视觉: :样本呈透明
9、淡黄色到不透明的棕色。样本呈透明淡黄色到不透明的棕色。象征象征: :阻塞或肝脏疾病,血管内的溶血。阻塞或肝脏疾病,血管内的溶血。额外测试项目额外测试项目: :肝脏相关酶,总胆红素,肝脏相关酶,总胆红素,PCV(PCV(红细胞压积红细胞压积) )。溶血溶血视觉视觉: :样本呈透明的淡到深红色。样本呈透明的淡到深红色。象征象征: :红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。额外测试项目额外测试项目: :总胆红素,总胆红素,PCV(PCV(红细胞压积红细胞压积) )厚的白血细胞层厚的白血细胞层视觉视觉: :白细胞层白细胞层( (介于血浆或血清和浓缩红细胞之间介于血浆或血
10、清和浓缩红细胞之间) )特别宽。特别宽。象征象征: :白细胞和白细胞和/ /或血小板过多。或血小板过多。额外测试项目额外测试项目: :总白细胞计数和分类,血小板计数。总白细胞计数和分类,血小板计数。二、样本采集与制备二、样本采集与制备 血浆样本的检查?血浆样本的检查? 指示什么?指示什么?血脂血脂视觉视觉: :样本呈苍白色,牛奶状,甚至有浮游的脂样本呈苍白色,牛奶状,甚至有浮游的脂肪球状颗粒。肪球状颗粒。象征象征: :最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。额外测试项目额外测试项目: :血脂和肝脏相关酶。血脂和肝脏相关酶。三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床
11、选择内分泌:内分泌:碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(AKP)肌酸激酶(肌酸激酶(CK-NAC)葡萄糖葡萄糖(GLU-0X)胆固醇(胆固醇(CHOL)钙(钙(Ca)磷(磷(P)钠(钠(Na)钾(钾(K)镁(镁(Mg) 白蛋白(白蛋白(ALB)总蛋白(总蛋白(TP)总胆红素(总胆红素(TB)总胆汁酸(总胆汁酸(TBA)直接胆红素(直接胆红素(DBB)谷草转氨酶(谷草转氨酶(AST)谷丙转氨酶(谷丙转氨酶(ALT)r-谷氨酰转移(谷氨酰转移(r-GT)胆碱酯酶(胆碱酯酶(CHE)碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(AKP) 尿素氮(尿素氮(BUN)肌酐(肌酐(Cr)尿酸(尿酸(UA) 乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶(LDH)血
12、钾(血钾(K)血钙(血钙(Ca)肌酸激酶(肌酸激酶(CK-NAC) 血糖血脂:血糖血脂:葡萄糖葡萄糖(GLU-0X)甘油三脂甘油三脂(TG)酮体酮体胆固醇(胆固醇(CHOL)果酸胺(果酸胺(FMN)高密度脂高密度脂 蛋白胆固醇(蛋白胆固醇(HDC-C)低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白胆固醇(LDC-C) 电解质:电解质:钠(钠(Na)氯(氯(Cl)碳酸氢盐碳酸氢盐镁(镁(Mg)无机磷(无机磷(P)钙(钙(Ca) 淀粉酶(淀粉酶(AMY)脂肪酶脂肪酶(LIPA)三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床选择四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义同时,在有些病例中,不要忘记正常的体液平衡机
13、制干扰的影响。参考值参考值(点击查阅)(点击查阅)增高临床意义:增高临床意义:脱水脱水- -呕吐、腹泻、休克呕吐、腹泻、休克-相对增多相对增多慢性和免疫介导的疾病慢性和免疫介导的疾病-细菌性传染病和细菌性传染病和自体免疫疾病,特别是猫传染性腹膜炎自体免疫疾病,特别是猫传染性腹膜炎-球球蛋白,特别是蛋白,特别是-球蛋白的升高球蛋白的升高。多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤 总蛋白(总蛋白(TP)四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义- -蛋白蛋白检测目的:检测目的:总蛋白与其他检查肝肾功总蛋白与其他检查肝肾功能、脱水程度、有无蛋白质流失性肠能、脱水程度、有
14、无蛋白质流失性肠道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时,道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时,可提供有用的讯息。此项目单独检测可提供有用的讯息。此项目单独检测时无法提出具体诊断意义,因为它缺时无法提出具体诊断意义,因为它缺乏特异性。乏特异性。 降低临床意义:降低临床意义:水相对增多(少见)水相对增多(少见)多为医源性多为医源性过多的蛋白丢失过多的蛋白丢失-低白蛋白血症低白蛋白血症最常见(最小,易丢失)最常见(最小,易丢失) 肾蛋白丢失肾蛋白丢失 见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉性样变等。这可通性样变等。这可通 过检查尿中是否存在蛋白来证实过检查尿中是否存在蛋白来证实。
15、 肠蛋白丢失肠蛋白丢失(蛋白丢失性肠病蛋白丢失性肠病) 在小动物中,要考虑在小动物中,要考虑的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎。的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎。 出血出血 当全血丢失时,血浆蛋白的丢失会引起低蛋白当全血丢失时,血浆蛋白的丢失会引起低蛋白血症,同时存在贫血。这是评估再生性贫血,出血性贫血症,同时存在贫血。这是评估再生性贫血,出血性贫血,还是溶血性贫血最容易的方法血,还是溶血性贫血最容易的方法(如果是后者,血浆蛋如果是后者,血浆蛋白不会下降白不会下降)。 烧伤烧伤 大面积皮肤烧伤渗出血清,可引起低蛋白血症。大面积皮肤烧伤渗出血清,可引起低蛋白血症。蛋白合成的
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