荧光衍生试剂在高效液相色谱和电泳中的应用.ppt
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1、荧光衍生试剂在高效液相色谱和电泳中的应用,导 师:张玉奎 学 生:张 琳,中科院大连化学物理研究所1810组,引言 常用荧光衍生化试剂应用简介 展望,汇报内容,衍生的目的 衍生发应方式 荧光衍生试剂的构成,引 言,衍生化反应方式,在线 (on line) 离线 (off line),从衍生反应的场所来分,柱前衍生化 (pre-column derivatization) 柱上衍生化 (on-column derivatization) 柱后衍生化 (post-column derivatization),从是否与仪器联机的角度来分,从是否形成共价键来分,标记 非标记,荧光衍生试剂的基本构成,取
2、代基,荧光团(试剂分子母体),反应基团,胆磺酰肼 DNS-H,I 胺类化合物的衍生试剂,芳香邻二醛类 OPA 异硫氰酸酯类 FITC 酰氯类 FMOC 活性卤类 NBD-Cl N-羟基琥珀酰亚胺活性酯类 AQC,邻苯二甲醛 OPA,4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑 NBD-Cl,荧光素异硫氰酸酯FITC,FMOC芴代甲氧基酰氯,6-氨喹啉基琥珀酰亚胺碳酸酯AQC,常用胺的衍生试剂 分子式,邻苯二甲醛 OPA 衍生分离氨基酸的色谱图,J Chromatorgr. 1990,499:557,集成化微流控芯片氨基酸分析仪,高等学校化学学报 2004, 25: 189190,FMOC 衍生分离
3、氨基酸的色谱图,J Chromatorgr. 1990,499:557,FMOC与CEOC衍生分离氨基酸的比较,Anal. Biochem 2003,313 1727,图3 CEOC 衍生胺类化合物色谱分离图(23种),图2 FMOC 衍生胺类化合物色谱分离图(23种),FMOC与CEOC衍生分离脂肪胺的比较,II 醇、酚的衍生试剂,羰基氯类: FMOC CEOC 磺酰氯类: DNs-Cl 卤代三嗪类: EDTN,1-乙氧基-4-(二氯-三嗪)萘(EDTN),CEOC 衍生醇类荧光检测色谱分离,分析化学 2003, 31, 6265,1.苯酚 2.对氯苯酚 3. 2,5-二甲基苯酚 4. 2,
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