高考生物二轮专题复习-第一部分-专题突破篇-第八单元-专题2-生物技术在其他方面的应用课件.ppt
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1、专题二生物技术在其他方面的应用专题二生物技术在其他方面的应用考纲要求考纲要求1.酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶在食品制造和洗涤等方面的应用()。2.制备和制备和应用固定化酶应用固定化酶()。3.PCR技术的基本操作和应用。技术的基本操作和应用。4.蛋白质的蛋白质的提取和分离。提取和分离。5.从生物材料中提取某些特定的成分。从生物材料中提取某些特定的成分。6.实验:实验:DNA的粗提取与鉴定。的粗提取与鉴定。水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法橘皮精油橘皮精油萃取法萃取法凝胶色谱法凝胶色谱法酒精酒精二苯胺二苯胺蓝色蓝色热变性热变性复性复性考点考点一一DNA和蛋白质技术和蛋白质技术1.(2015广东卷,广东
2、卷,3)关于关于DNA的实验,叙述正确的是的实验,叙述正确的是()A.用兔的成熟红细胞可提取用兔的成熟红细胞可提取DNAB.PCR的每个循环一般依次经过变性的每个循环一般依次经过变性延伸延伸复性三步复性三步C.DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D.用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色呈红色解析解析DNA的粗提取和提纯,所用原料一般是鸡血或者菜花,的粗提取和提纯,所用原料一般是鸡血或者菜花,不能使用哺乳动物成熟的红细胞,因为其中不含细胞核和细胞器,不能使用哺乳动物成熟
3、的红细胞,因为其中不含细胞核和细胞器,极难提取到极难提取到DNA,故,故A不正确;不正确;PCR又称多聚酶链式反应,每个又称多聚酶链式反应,每个循环包括高温变性低温复性中温延伸三个步骤,而且顺序不循环包括高温变性低温复性中温延伸三个步骤,而且顺序不能颠倒,所以能颠倒,所以B错误;在沸水浴的条件下,错误;在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈与二苯胺反应呈现蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定现蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂,所以的试剂,所以C正确;正确;甲基绿染液只能染甲基绿染液只能染DNA成绿色,细胞核中含有大量成绿色,细胞核中含有大量DNA分子,分子,故用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色
4、,细胞核呈绿色,用甲基绿故用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,用甲基绿无法对细胞质进行染色,无法对细胞质进行染色,D错误。错误。答案答案C2.(2014江苏单科,江苏单科,16)下列关于下列关于“DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验叙述,实验叙述,错误的是错误的是()A.酵母和菜花均可作为提取酵母和菜花均可作为提取DNA的材料的材料B.DNA既溶于既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水溶液也溶于蒸馏水C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝溶液加入二苯胺试剂沸
5、水浴加热,冷却后变蓝解析解析理论上只要含理论上只要含DNA的生物材料都行,只是从操作难易程的生物材料都行,只是从操作难易程度上分,最好选择容易操作的,所以酵母和菜花可作为提取度上分,最好选择容易操作的,所以酵母和菜花可作为提取DNA的材料,的材料,A正确;正确;DNA在在2 mol/L NaCl溶液和蒸馏水中都能溶液和蒸馏水中都能溶解,只不过溶解度不同,溶解,只不过溶解度不同,B正确;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅正确;向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,鸡血细胞会破裂,拌,鸡血细胞会破裂,DNA在蒸馏水中溶解度较大,不会析出,在蒸馏水中溶解度较大,不会析出,C错误;错误;DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热
6、,冷却后变蓝,溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,D正确。正确。答案答案C近年课标卷对本考点几乎未作专项考查,但在其他考题中会渗透近年课标卷对本考点几乎未作专项考查,但在其他考题中会渗透考查一些简单内容如蛋白质分离技术,考查一些简单内容如蛋白质分离技术,PCR技术等,备考时应做技术等,备考时应做简单复习,尤其应简单复习,尤其应“知其然知其然”。1.DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定0.14 mol/L酒精酒精二苯胺二苯胺蓝蓝2.PCR反应过程反应过程9050碱基互补配对碱基互补配对TaqDNA聚合酶聚合酶3.血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离(1)样品处理与粗分离样品处理与粗分离去
7、除杂蛋白去除杂蛋白蒸馏水涨破蒸馏水涨破血红蛋白血红蛋白血红蛋白血红蛋白透析透析小分子杂质小分子杂质(2)纯化与纯度鉴定纯化与纯度鉴定凝胶色谱法凝胶色谱法移动速度不同移动速度不同大大SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(1)洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂()(2)猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少提纯时杂蛋白较少()(3)血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测()(4)当引物与当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,母链通过碱基互补配对
8、结合后,DNA聚合酶就聚合酶就能从引物的能从引物的3端开始延伸端开始延伸DNA链,链,DNA的合成方向总是由子链的的合成方向总是由子链的5端到端到3端端()(5)由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样大小、形状的不同,带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离品中各种分子的分离()答案答案(1)(2)(3)(4)(5)1.如今人类已跨入了蛋白质时代,要想研究蛋白质及其应用,首如今人类已跨入了蛋白质时代,要想研究蛋白质及其应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答
9、下列问题。先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题。血红蛋白的提取与分离血红蛋白的提取与分离(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:蛋白质的提取和分离一般分为四步:_、_、_和纯度鉴定。和纯度鉴定。(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是_。(3)血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、_、分离血红蛋白溶液和分离血红蛋白溶液和_。其中分离血红蛋白溶液时需要。其中分离血红蛋白溶液时需要用到用到_(仪器仪
10、器)分离出下层红色透明液体。分离出下层红色透明液体。(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装。这是因为发现有气泡必须重新装。这是因为_。(5)欲探究色谱柱的高度是否是影响蛋白质分离的因素,应把欲探究色谱柱的高度是否是影响蛋白质分离的因素,应把_作为自变量,把作为自变量,把_作为无关变作为无关变量,把量,把_作为因变量。作为因变量。解析解析由由(5)的实验目的容易确定色谱柱的高度变化为自变量,的实验目的容易确定色谱柱的高度变化为自变量,其他因素包括缓冲液的用量和其他因素包括缓冲液的用量和pH、样品的用量、温
11、度等为无关、样品的用量、温度等为无关变量,大小不同的蛋白质分子的间距为因变量。变量,大小不同的蛋白质分子的间距为因变量。答案答案(1)样品处理粗分离纯化样品处理粗分离纯化(2)防止血液凝固防止血液凝固(3)血红蛋白的释放透析分液漏斗血红蛋白的释放透析分液漏斗(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果(5)色谱柱的高度变化缓冲液的用量和色谱柱的高度变化缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度、样品的用量、温度等因素大小不同的蛋白质分子的间距等因素大小不同的蛋白质分子的间距2.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血血红蛋白是人
12、和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中液中O2或或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。答问题。(1)将实验流程补充完整依次是将实验流程补充完整依次是_、_。凝胶色谱。凝胶色谱法的基本原理是根据法的基本原理是根据_分离蛋白质的有效方法。分离蛋白质的有效方法。(2)洗涤红细胞的目的是去除洗涤红细胞的目的是去除_,洗涤干净的标志是,洗涤干净的标志是_。(3)分离血红蛋白时,由上到下第分离血红蛋白时,由上到下第_层是血红蛋白水溶液。层是血红蛋白水溶液。(4)下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入示意图,正确下面是凝胶色谱法分离血红
13、蛋白时样品的加入示意图,正确的加样顺序是的加样顺序是_。(5)如果红色区带如果红色区带_,说明色谱柱制作成功。,说明色谱柱制作成功。答案答案(1)血红蛋白的释放凝胶色谱柱的装填相对分子质量血红蛋白的释放凝胶色谱柱的装填相对分子质量的大小的大小 (2)杂蛋白杂蛋白(或血浆蛋白或血浆蛋白)离心后的上清液中没有黄色离心后的上清液中没有黄色(3)三三(4)(5)均匀一致地移动均匀一致地移动关注血红蛋白提取中关注血红蛋白提取中2个易错点个易错点(1)红细胞洗涤过程中,洗涤三次后,上清液仍有黄色,可增加红细胞洗涤过程中,洗涤三次后,上清液仍有黄色,可增加洗涤次数,否则无法除去血浆蛋白;离心时转速要低,时间
14、要洗涤次数,否则无法除去血浆蛋白;离心时转速要低,时间要短,否则白细胞等会一同沉淀,达不到分离效果。短,否则白细胞等会一同沉淀,达不到分离效果。(2)血红蛋白释放过程中,蒸馏水的作用是涨破红细胞,甲苯的血红蛋白释放过程中,蒸馏水的作用是涨破红细胞,甲苯的作用主要是溶解细胞膜。作用主要是溶解细胞膜。1.如图为菜花如图为菜花DNA的粗提取与鉴定的实验流程图。据图回答下列的粗提取与鉴定的实验流程图。据图回答下列问题:问题:DNA粗提取及粗提取及PCR技术技术(1)选择菜花作为提取选择菜花作为提取DNA的实验材料的原因是的实验材料的原因是_。(2)研磨前,向研钵中加入石英砂的目的是研磨前,向研钵中加入
15、石英砂的目的是_,加入的物,加入的物质质a是是_。(3)研磨液过滤后,应向滤液中加入研磨液过滤后,应向滤液中加入2 mol/L的的NaCl溶液,目的是溶液,目的是_;也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是;也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是_。(4)鉴定鉴定DNA所用的化学试剂为所用的化学试剂为_,鉴定实验中,鉴定实验中,A、B两两支试管属于对照组的是支试管属于对照组的是_,对照组试管中加入的物质有,对照组试管中加入的物质有_。答案答案(1)菜花中的菜花中的DNA含量相对较高含量相对较高(2)使研磨充分洗涤剂使研磨充分洗涤剂和食盐和食盐(3)溶解溶解DNA,析出不溶的杂质分解蛋白质,析出不溶的杂质分解
16、蛋白质(4)二苯二苯胺胺ANaCl溶液和二苯胺试剂溶液和二苯胺试剂2.多聚酶链式反应多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增是一种体外扩增DNA片段的技术,可用片段的技术,可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序序列测定等方面。回答以下问题。列测定等方面。回答以下问题。(1)细胞内细胞内DNA复制过程中,引物的作用是复制过程中,引物的作用是_,而且而且DNA复制的前提是复制的前提是_。(2)PCR利用了利用了_原理,可通过控制温度来控制原理,可通过控制温度来控制DNA分分子双链的解旋与结合。子双链的解旋与结合。(3)PCR技术用
17、到的酶是技术用到的酶是_,与细胞内,与细胞内DNA复制复制时发挥相同作用的酶相比,区别在于时发挥相同作用的酶相比,区别在于_。(4)下面表格是下面表格是DNA体内复制与体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过反应的部分比较结果。通过比较分析,请推导出比较分析,请推导出PCR反应合成反应合成DNA子链时能量来源于子链时能量来源于_。 原料原料ATPDNA体内复制体内复制四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸需要需要PCR反应反应脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸、脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸、脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸不需要不需要答案答案(1)使使DNA聚合酶能够从引物的聚
18、合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核苷酸端开始连接脱氧核苷酸解开双链解开双链(或打开氢键或打开氢键)(2)DNA的热变性的热变性(3)TaqDNA聚合酶聚合酶耐高温耐高温(4)所用原料水解产生相应脱氧核苷酸时所释放的能量所用原料水解产生相应脱氧核苷酸时所释放的能量3.(2015辽宁大连质检辽宁大连质检)PCR技术是一项在生物体外复制特定的技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程,请据图分析片段的核酸合成技术,如图表示合成过程,请据图分析回答:回答:(1)A过程高温使过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述,正确的变性解旋,对该过程的原理叙述,正确的是是()A.
19、该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键B.该过程用限制酶破坏磷酸二酯键该过程用限制酶破坏磷酸二酯键C.该过程不需要解旋酶的作用该过程不需要解旋酶的作用D.该过程与人体细胞的过程完全相同该过程与人体细胞的过程完全相同(2)C过程要用到的酶是过程要用到的酶是_,这种酶在高温下仍保持活性,这种酶在高温下仍保持活性,因此在因此在PCR扩增时可以加入扩增时可以加入_次,次,_(需要、不需要需要、不需要)再添加。再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有_。(3)如果把模板如果把模板DNA的两条链用的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸
20、不做标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制标记,控制“95 55 72 ”温度循环温度循环3次,则在形成的次,则在形成的子代子代DNA中含有中含有15N标记的标记的DNA占占_。解析解析在熟知细胞内在熟知细胞内DNA复制过程和复制过程和PCR过程异同点的前提下,过程异同点的前提下,会运用会运用DNA复制的有关原理是解答本题的关键。复制的有关原理是解答本题的关键。(1)高温所起的高温所起的作用类似于解旋酶,使双链作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链,因此变为单链,因此A过程不需要解过程不需要解旋酶的参与。旋酶的参与。(2)C过程为过程为PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升技术的延伸阶段,当系统温
21、度上升至至72 左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸在左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的聚合酶的作用下合成新的作用下合成新的DNA链。链。Taq DNA聚合酶是耐热的,高温下不变聚合酶是耐热的,高温下不变性,所以一次性加入即可。性,所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留复制的特点。技术遵循半保留复制的特点。经过经过3次循环,共产生次循环,共产生23个个DNA分子,其中有分子,其中有2个个DNA分子含有分子含有15N标记。标记。答案答案(1)C(2)Taq DNA聚合酶一不需要聚合酶一不需要DNA模板、分模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸,同时通过别与两
22、条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸,同时通过控制温度使控制温度使DNA复制在体外反复进行复制在体外反复进行(3)25%1.与细胞内与细胞内DNA复制相比,复制相比,PCR技术特点技术特点场所场所不是细胞内而是体外反应缓冲液不是细胞内而是体外反应缓冲液解旋解旋不需解旋酶,而是在高温不需解旋酶,而是在高温(95 )下解旋下解旋过程过程不是边解旋边复制,而是完全解开并经历变性不是边解旋边复制,而是完全解开并经历变性复性复性延伸过程延伸过程结果结果不是形成不是形成2个完整个完整DNA分子,而是短时间内形成大量分子,而是短时间内形成大量DNA片段片段(位于两引物之间的部分位于两引物之间的部分)2.
23、关注关注DNA粗提取实验中四种试剂的粗提取实验中四种试剂的5种作用种作用(2)酒精酒精(95%)除去杂质,提纯除去杂质,提纯DNA(3)二苯胺二苯胺DNA鉴定剂鉴定剂(沸水浴、呈蓝色沸水浴、呈蓝色)(4)柠檬酸钠柠檬酸钠抗凝剂,防止血液凝固抗凝剂,防止血液凝固考点考点二二植物芳香油的提取植物芳香油的提取1.(2015课标卷课标卷,39)回答与胡萝卜素有关的问题:回答与胡萝卜素有关的问题:(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是_(填填“胡萝胡萝卜素卜素”“胡萝卜素胡萝卜素”或或“胡萝卜素胡萝卜素”),该胡萝卜素在人体内可,该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子以转
24、变成两分子_,后者缺乏会引起人在弱光下视物不,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为清的病症,该疾病称为_,胡萝卜素是,胡萝卜素是_(填填“挥发挥发性性”或或“非挥发性非挥发性”)物质。物质。(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时,工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时,_(填填“需要需要”或或“不需要不需要”)将新鲜的岩藻干燥。将新鲜的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的_作为作为胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是_。答案答案(1)胡萝卜素维生素胡萝卜素
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