SN∕T 5100-2019 国境口岸卡萨诺尔森林病病毒实时荧光RT-PCR检测方法.pdf
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1、书 书 书犐 犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 国境口岸卡萨诺尔森林病病毒实时荧光犚犜 犘犆犚检测方法犇犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀犿犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉犓狔 犪 狊 犪 狀 狌 狉犉 狅 狉 犲 狊 狋犱 犻 狊 犲 犪 狊 犲狏 犻 狉 狌 狊犫 狔狉 犲 犪 犾 狋 犻 犿犲犳 犾 狌 狅 狉 犲 狊 犮 犲 狀 犮 犲犚犜 犘犆犚犪 狋犳 狉 狅 狀 狋 犻 犲 狉狆 狅 狉 狋 狊 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前 言本标准根据 给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、杭州富集生
2、物科技有限公司、新疆国际旅行卫生保健中心。本标准主要起草人:马雪征、张丽萍、杨烨、胡孔新、孙肖红。犛犖犜 国境口岸卡萨诺尔森林病病毒实时荧光犚犜 犘犆犚检测方法 范围 本标准规定了国境口岸卡萨诺尔森林病病毒检测的生物安全要求、标本的采集、运输和保存、标本的处理,卡萨诺尔森林病病毒实时荧光 检测方法。本标准适用于国境口岸入出境人员携带卡萨诺尔森林病病毒的核酸检测。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 实验室生物安全通用要求 临床诊断中聚合酶链反应()技术的应用
3、病原微生物实验室生物安全通用准则可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定 (原中华人民共和国卫生部令第 号)人间传染的病原微生物菌(毒)种保藏机构管理办法(原中华人民共和国卫生部)人间传染的病原微生物名录(原中华人民共和国卫生部) 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 卡萨诺尔森林病病毒 (犓狔 犪 狊 犪 狀 狌 狉犉狅 狉 犲 狊 狋犱 犻 狊 犲 犪 狊 犲狏 犻 狉 狌 狊,犓犉犇犞)该病毒属于黄病毒科的哺乳动物蜱传病毒组,于 年被发现,源自印度纳塔克邦卡萨诺尔森林病死的猴子身上。自那时起,每年有 人类病例被报道。该病的症状包括高热与额叶头痛,伴有出血症状,如鼻腔出
4、血、咽喉出血和牙龈出血,以及胃肠出血等。蜱为主要传播媒介,可引起发热、出血、肌痛和脑炎,死亡率为,主要分布在印度西部地区,我国研究人员从 年采集的一名发热患者血清标本中分离到 后经分子生物学等方法鉴定为的变异株,提示在我国云南横断山脉地区曾有的发生。 实时荧光 犚犜 犘犆犚狉 犲 犪 犾 狋 犻 犿犲犳 犾 狌 狅 狉 犲 狊 犮 犲 狀 犮 犲犚犜 犘犆犚实时荧光 方法是在常规 的基础上,加入一条特异性的实时荧光探针。该探针为一段寡核苷酸,两端分别标记一个报告基团和一个淬灭实时荧光基团。探针完整时,报告基团发射的实时荧光信号被淬灭基团吸收;扩增时,利用 酶的 外切酶活性将探针酶切降解,使报告
5、实时荧光基团和淬灭基团分离,从而实时荧光监测系统可以接受到实时荧光信号。每个反应管内的实时荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数,用 值表示。 犛犖犜 犆 狋值 值是每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。 缩略语 下列缩略语适用于本文件。:焦碳酸乙二酯( ): 羧基一荧光素( ):黑洞淬灭基团( ) 检测对象 出入境口岸发现的可疑病例。 实验室生物安全和犘犆犚防污染要求 按照 、 人间传染的病原微生物名录和可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定的要求,相关材料的生物安全要求如下: 卡萨诺尔森林病病毒危害程度分类为第一类; 实验室应遵循 和 ,未经培养的感染性
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