血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定作业指导书.doc
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1、血血清清 谷谷氨氨酰酰转转移移酶酶 G GG GT T 速速率率法法 测测定定作作业业指指导导书书 1 1. . 实实验验原原理理 GGT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以- 谷氨酰 -3-羧基-对硝基苯胺为底物,将底物上的谷氨酰 基转移至受体双甘肽,生成对硝基苯胺和-谷氨酰双 甘肽。在 405nm 进行吸光度检测,吸光度升高的速率与 标本中 GGT 活力成正比。 -谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺+ 双甘肽 GGT 对 硝基苯胺 + -谷氨酰双甘肽 2 2. . 标标本本: 2.1 病人准备:无特殊。 2.2 类型:血清或 EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放: 室温可保存 8
2、小时; 28可保存 3 天;-20保存至少可稳定 1 周。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 利德曼 -GGT 测定试剂盒(试剂1 664ml 试剂 2 616ml) 6.1.1 试剂组成 试剂 1(R1): Tris 缓冲液 pH8.25 100mmol/L 甘氨酰甘氨酸 150mmol/L 试剂 2(R2): -谷氨酰 -3-羧基-对硝基苯胺 2.9mmol/L 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若 无污染,可稳定
3、至失效期。 6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊 度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不 能继续使用。 6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防 腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂。 6.2 校准品:使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品: 具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见AU1
4、000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤:参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限, 3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品 GGT 校准值 校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告 可靠的检测结果。 不使用校准品进行GGT 活
5、力检测,可以直接使用 A/min 均值乘以计算因子得到结果,但是这样所得结 果的可靠性不如使用校准品。计算GGT 活力的计算因 子见下表: A A/ /m mi in n因因子子 = = G GG GT T 活活力力 U U/ /L L 底物起始的反应( 37) 样品起始的反 应(37) 405nm 1421 1158 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 3、4:女性 7-32U/L;男性 11- 49U/L。 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1 : :-谷氨酰转移酶( GG
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