血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书.doc
《血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书.doc(10页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、血清尿素氮血清尿素氮 BUNBUN 谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 脲酶-谷氨酸脱氢酶( Urease-GLDH)连续监测法。 尿素被脲酶水解产氨。在NADH 的存在下,氨和 - 酮戊二酸反应生成谷氨酸,NADH 同时被氧化成 NAD。NADH 的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是 连续监测法。 脲酶 尿素 + 2H2O 2 NH4 + 2 HCO3 谷氨酸脱氢酶 NH4+-酮戊二酸 +NADH L-谷氨酸 +NAD+H2O 2 2 标标本本: 2.1 病人准备:血清无特殊要求。要留取24 小时尿 样。 2.2 类型:血清、血浆(不可使
2、用肝素铵) 、新鲜尿 液。无溶血和凝块的血清,如果必须使用血浆,建议使 用无铵离子的抗凝血剂,如EDTA 和肝素钠。用新鲜尿 液作样品时,用蒸馏水作1:100 稀释。 3 3. . 标标本本存存放放: 血清或血浆稳定性: 425保存可稳 定 7 天;-20保存可稳定 1 年。尿液稳定性: 2025保存可稳定 2 天;48保存可稳定 7 天; -20保存可稳定 1 个月。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂:申能尿素测定试剂盒(142 3107170 1 试 剂 1: 6
3、64ml试剂 2: 616ml) 6.1.1 试剂组成 试剂 1: Tris 缓冲液 pH7.8 120mmol/L -酮戊二酸 7mmol/L ADP 0.6mmol/L 谷氨酸脱氢酶 1000U/L 脲酶 6000U/L 试剂 2: NADH 0.25mmol/L 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于 225,若无污染,可稳定至失效期。 试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊 度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不 能继续使用。 6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用。不要入口,吞 下有害。保护剂为叠氮钠
4、,避免接触皮肤及粘膜,与下 水管中的铅反应形成爆炸性化合物,即使只含有少量的 叠氮钠,如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必 要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品:使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件 8.2 仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU1
5、000 生化分析仪操作规程 .SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限, 3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品尿素氮校准值 校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告 可靠的检测结果,以mmol/L 报告。将尿素量乘以系数 2.8 可以换算成尿素氮量;将尿素氮量乘以系数 0.357 可以换算
6、成尿素量。手工测定计算方法为: Au 尿素氮浓度( mmol/L) 校准液浓度 As 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 血清/血浆 1 成人( mmol/L) 全球 2.87.2 女性50 岁 3.57.5 男性50 岁 3.09.2 儿童 13 岁 1.86.0 413 岁 2.56.0 1419 岁 2.97.5 尿素/肌酐比率 1 2540(mmol/L)/(mmol/L) 尿液 2 0.430.72mol/d (注:各实验室应有自己的参考范围。 )参考值因 性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的 实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 血清 尿素氮 BUN 谷氨酸 脱氢酶 测定法 作业 指导书
限制150内