发酵液溶磷含量测定.doc
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1、Four short words sum up what has lifted most successful individuals above the crowd: a little bit more.-author-date发酵液溶磷含量测定C000编号共 4 页制订人制订日期审核人审核日期批准人批准日期颁发部门质量管理部实施日期发酵液溶磷含量测定SOP 一、 目的: 制订发酵液溶磷含量测定标准操作规程,确保发酵液中溶磷含量检测的准确。二、 适用范围:适用于公司发酵液溶磷含量的检验。三、 责任者:质量检验部QC操作人员四、内容:1、原理:正磷酸盐在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸铵,再用
2、抗坏血酸使之还原成低价的钼蓝,此蓝色溶液符合比尔定律。2、 仪器:电子分析天平 分光光度计 恒温水浴埚 容量瓶 刻度吸管3、磷标准溶液配置取一定量KH2PO4(A.R)置于称量瓶内,在105干燥至恒重,精密称取0.439克,加水溶解,加入1mL硫酸,于100mL容量瓶中定容至刻度,摇匀,即得1mg/mL磷标准溶液。有效期10天。准确吸取上述磷标准溶液1mL于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,即得 10ug/mL磷标准溶液。此标准溶液现配现用。4、定磷试剂配制:将下述溶液3mol/L硫酸、水、2.5%钼酸铵、10%抗坏血酸按体积比1211的比例混匀即得。现配现用。5、绘制磷标准曲线取7支
3、试管,分别按下表加入各试剂,充分摇匀,45水浴20分钟,冷却至室温,按照分光光度计校准使用SOP在660nm波长下测量其OD值。以溶液磷含量为纵坐标,OD值为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程。管号012345610ug/mL磷标准溶液(mL)00.51.01.52.02.53.0溶液磷含量(ug)051015202530水(mL)3.02.52.01.51.00.50定磷试剂(mL)3.03.03.03.03.03.03.0线性回归系数0.9996、样品磷含量检测取发酵液离心后上清液0.1mL,至试管中,加2.9 mL水,再加入定磷试剂3mL,振摇,于45水浴20分钟,冷却至室温,以空白做对
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