血清总蛋白测定(双缩脲试剂法).doc
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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流血清总蛋白测定(双缩脲试剂法).精品文档.生物化学实验报告姓 名: 学 号: 专业年级: 组 别: 生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称血清总蛋白测定(双缩脲试剂法)实验日期2014-11-21实验地点第五实验室合作者指导老师评分教师签名批改日期一、实验目的1、掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作;2、熟悉血清总蛋白的临床意义;3、了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。二、实验原理(一):双缩脲反应在碱性溶液中,双缩脲(H2NOCNHCONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。两分子尿素加热脱
2、氨缩合成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2),因分子内含有两个邻接的肽键,在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应 ,生成紫红色络合物;蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键(-CO-NH-),同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应,生成的紫红色络合物,且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10120g/L范围内有良好的线性关系。 三、 材料与方法:实验材料样品:大牛血清试剂:双缩脲试剂、蛋白质标准液(70g/L)、生理盐水(0.9%)器材:试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球设备:1100分光光度计、水浴锅实验步骤取3支试管,做好标记(B空白对照,S标准液,U为待测大牛血清),按下表操作:加
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