梅毒螺旋体特异性抗体检测作业指导书.doc
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1、梅毒螺旋体特异性抗体检测作业指导书1. 实验原理梅毒的病原是苍白螺旋体(TP),感染后患者血清学反应较复杂,可产生2种抗体,一种是非梅毒螺旋体抗体;另一种是TP特异性抗体。前者在疾病活动期可检出,但治疗后很快下降,一般用RPR等检测。后者在治疗后相当长时间内都可检测到。Syphagen-TPHA是一种检测TP抗体的特异、灵敏的间接血球凝集试验。适用于梅毒确诊检查。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备:空腹采血2.2 标本种类:血清或EDTA抗凝血浆 2.3 标本要求:检测标本可以是血清,对于大范围筛选实验,也可用含EDTA的血浆。如果出现可疑结果,用血清标本来确证。用含抗凝剂(EDTA)的
2、试管收集血液,离心收集血浆,在24小时内检测。3. 标本储存:血清于2-8可存放48小时,在-20可存放4周;血浆则用含抗凝剂(EDTA)的试管收集血液,离心收集血浆,在24小时内检测。 4. 标本运输:室温运输。5. 标本拒收标准:溶血、脂血或污染标本。6. 试剂6.1 试剂名称:Syphagen-TPHA试剂6.2 试剂生产厂家:西班牙BIOKIT公司6.3 包装规格:200人份 6.4 试剂盒组成:6.4.1 实验细胞:Antigen Reagent 15ml6.4.2 对照细胞:Control Reagent 15ml6.4.3 稀释液:Dilution Solution 50ml6.
3、4.4 阳性对照:Positive Control 2.5ml6.4.5 阴性对照:Negative Control 2.5ml用前将试剂回复至室温,致敏及对照红细胞在用前彻底悬浮。6.5 试剂储存条件及有效期存放于2-8,不同批号的试剂不得混用。7. 操作步骤7.1 定性检测7.1.1 每人份需4个孔,其中2个用于样品稀释。在第1个孔中加25ul(1滴)稀释液,在第2孔中100ul(4滴)稀释液,在第3、4孔中加25ul(1滴)稀释液。7.1.2 在第1孔中加25ul标本。7.1.3 按以下步骤稀释标本:在第1孔加入25ul标本后,混匀后取25ul加入第2孔,混匀后取25ul加入第3孔,混匀
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