免疫学技术原理.ppt
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1、关于免疫学技术原理现在学习的是第1页,共38页(一)抗原抗体反应的原理(一)抗原抗体反应的原理 抗原抗体反应抗原抗体反应: :指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的抗原抗体之间的结合力结合力 亲水胶体亲水胶体转化为转化为疏水胶体疏水胶体 物质基础物质基础: :现在学习的是第2页,共38页体内体内:表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素或:表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素或引起免疫病
2、理的损伤引起免疫病理的损伤体外体外:凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应:凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应现在学习的是第3页,共38页(二)(二)抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点特异性特异性 可逆性可逆性比例性比例性 阶段性阶段性现在学习的是第4页,共38页特异性:特异性:抗原与抗体抗原与抗体结合反应的专一性结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图抗原抗体反应特异性示意图分子基础分子基础: :抗原表位与抗体分子抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性高变区之间空间构型的互补性(1 1)特异性)特异性现在学习的是第5页,共38页两种不同的抗原分子两种不同的抗原分子具有部分相同或类似具
3、有部分相同或类似结构的抗原表位,可结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清与彼此相应的抗血清发生反应发生反应交叉反应交叉反应(cross reactions)抗原抗体交叉反应示意图抗原抗体交叉反应示意图Ag B现在学习的是第6页,共38页(2)(2)可逆性可逆性可逆性:可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素:影响因素: 抗体对相应抗原的抗体对相应抗原的亲合力亲合力亲合力越高,结合越牢固亲合力越高,结合越牢固,越不易解离,越不易解离 环境因素对复合物的影响环境因素对复合物的影响
4、pHpH、离子强度、离子强度 现在学习的是第7页,共38页前带前带(prezone)(prezone):抗体过量:抗体过量后带后带(postzone)(postzone):抗原过量:抗原过量等价带等价带(equivalence zone)(equivalence zone): 抗原抗体比例合适抗原抗体比例合适 抗原抗体反应比例性示意图抗原抗体反应比例性示意图比例性:比例性:抗原与抗体发生可抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关见反应需遵循一定的量比关系系(3)(3)比例性比例性现在学习的是第8页,共38页第一阶段:第一阶段:特异性结合阶段,反应快,不可见特异性结合阶段,反应快,不可见 第二阶
5、段:第二阶段:反应可见阶段,反应慢反应可见阶段,反应慢,出现凝集、出现凝集、 沉淀和细胞溶解沉淀和细胞溶解等现象等现象 (4)(4)阶段性阶段性现在学习的是第9页,共38页A.A.抗原、抗体反应物的自身因素抗原、抗体反应物的自身因素环境因素环境因素(三)(三) 影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素抗原抗原: :理化性状、表位种类和数目理化性状、表位种类和数目抗体抗体: :来源、特异性、亲和性、效价来源、特异性、亲和性、效价现在学习的是第10页,共38页B.B.环境因素环境因素电解质电解质: 生理盐水或缓冲液生理盐水或缓冲液酸碱度酸碱度: pH6pH9温温 度度: 1540,37最适最适
6、现在学习的是第11页,共38页反应类型反应类型实验技术实验技术结果判断结果判断凝集反应凝集反应直接凝集试验直接凝集试验观察凝集现象观察凝集现象间接凝集试验间接凝集试验同上同上抗球蛋白试验抗球蛋白试验同上同上沉淀反应沉淀反应液相沉淀试验液相沉淀试验观察沉淀,检测浊度观察沉淀,检测浊度免疫电泳技术免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与补体参与的反应的反应补体溶血试验补体溶血试验观察测定溶血现象观察测定溶血现象补体结合试验补体结合试验同上同上( (四)免疫学检测技术的类型四)免疫学检测技术的类型现在学习的是第12页,共38页反应类型反应类型实验技术实验技术结果判断结果判断中
7、和反应中和反应病毒中和试验病毒中和试验检测病毒感染性检测病毒感染性毒素中和试验毒素中和试验检测外毒素毒性检测外毒素毒性标记免疫反应标记免疫反应荧光免疫技术荧光免疫技术检测荧光现象检测荧光现象放射免疫技术放射免疫技术检测放射性强度检测放射性强度酶免疫技术酶免疫技术检测酶底物显色检测酶底物显色发光免疫技术发光免疫技术检测发光强度检测发光强度金免疫技术金免疫技术检测金颗粒沉淀检测金颗粒沉淀现在学习的是第13页,共38页按实际用途分为按实际用途分为: :e e免疫组织化学技术免疫组织化学技术(immunohistochemistry techniqu,IHCT)(immunohistochemistr
8、y techniqu,IHCT)免疫测定免疫测定(immunoassay)(immunoassay)标记免疫技术标记免疫技术:用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体,进行抗原抗体反应后,通过检测标记物对抗原或标记抗原或抗体,进行抗原抗体反应后,通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析抗体进行定性、定位或定量分析现在学习的是第14页,共38页按测定反应体系的物理状态分为按测定反应体系的物理状态分为: : 均相免疫测定均相免疫测定(homogenous immunoassay(homogenous immunoassay)非均相
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- 关 键 词:
- 免疫学 技术 原理
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