[脑卒中与一氧化氮合成酶基因相关性及预防措施的研究]如何预防一氧化氮中毒.docx
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1、脑卒中与一氧化氮合成酶基因相关性及预防措施的研究如何预防一氧化氮中毒 关于脑卒中基因水平的探讨近年已经受到广泛的关注,人eNOS第7外显子C894T突变使编码的第298位谷氨酸(Glu)被天冬氨酸(Asp)所取代,使eNOS发生构象变更,从而引起eNOS活性降低,NO生成削减,从而削减了对脑血流的调整和神经细胞的爱护作用,促进了脑卒中的发生。 我们采纳候选基因病例比照的方法,以中国汉族脑卒中的患者,与年龄、性别相匹配的无脑卒中的高血压患者和健康人为探讨对象,探讨eNOS基因与脑卒中的相关性,旨在找寻预防脑卒中的措施,从分子水平提示脑卒中的发病机理,及早发觉脑卒中的致病基因,为脑卒中的遗传学发病
2、基础探讨及早期预警供应线索,避开脑卒中发病造成的死亡和重度致残。 资料与方法 探讨对象与分组:临床共视察脑卒中病人300例,与脑卒中患者年龄性别匹配的健康人300例。汉族,无血缘关系。其中男190例(占63.33),女110例(占36.67),男女比例为1.60:1;病例组平均年龄为61.34,比照组的平均年龄61.03,差异无统计学意义(P=0.698)。而腰臀比、体质指数及有无高血压、糖尿病、冠心病及吸烟史等方面,具有统计学意义。 病例解除标准:解除痴呆、癫痫、肾功能不全(血清肌酐132mnoLl及2mgdl,和或蛋白尿血尿)及肝功能不全(ALT正常上限的2倍,或有肝性脑病、肝硬化、食道静
3、脉曲张或门静脉分流史),甲状腺功能亢进或低下,慢性堵塞性肺病。有恶性肿瘤史(包括白血病或淋巴瘤),有自身免疫性疾病。病人不同意参与本探讨者。 探讨方法:病例组:询问高血压病史、吸烟、饮酒史。进行CT或MIR检查。抽血检查血尿常规、肝、肾功能、血脂检查。比照组:同上。 两组抽取静脉血56ml进行分子生物学试验,步骤如下:从白细胞中提取DNA(采纳酚-氯仿法)。进行DNA鉴定、定量。用PCR扩增eNOS基因。PCR扩增产物进行酶切(RFLP)。对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳。显示电泳条带。选择不同基因型的PCR产物各3个标本DNA片段纯化汲取。对PCR产物进行克隆。并进行DNA测序。 观测指标:eN
4、OS基因型及等位基因在脑卒中组和比照组中的分布。eNOS基因型与脑卒中关系。eNOS基因型、WHR、BMI、高血压病史、吸烟、饮酒、体育熬炼等是否具有协同效应。 统计学方法:采纳X2检验和t检验比较脑卒中组与健康人组。X2检验对基因Hardy-Weinberg平衡检验。计算OR值。采纳Logistic多元回来分析基因多态性及其他危急因素对脑卒中的作用。同时应用X2检验比较环境因素(吸烟)与基因之间是否存在交互作用。全部统计学处理应用SPSS8.0软件进行处理。 结果 基因型分布:病例组:等位基因G的频率87.75,等位基因T的频率12.25;比照组:等位基因G的频率90.89,等位基因T的频率
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