土壤中蛔虫卵检测 (2)讲稿.ppt
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1、1第一页,讲稿共二十六页哦 20062010年的全国土源性线虫病监测数据显示,土源性线虫病监测点土壤中人活蛔虫卵检出率分别为25.8%,17.3%,19.0%,19.7%和14.7%,统计分析表明土壤人蛔虫卵检出率与人群蛔虫感染率呈正相关,因此土壤中蛔虫卵的污染情况是评价环境卫生状况的一项重要指标。2第二页,讲稿共二十六页哦原理采样方法注意事项鉴别(受精与未受精、死活)3第三页,讲稿共二十六页哦先用碱性溶液与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵与土壤颗粒,再加入比重较大的液体使得比重较轻的蛔虫卵漂浮在溶液表面,收集后镜检计数。4第四页,讲稿共二十六页哦1、分别从土表及5厘米深处采取土样,因为虫卵存活时
2、间与土层深度有关;2、在用人粪施肥的农场和菜地可分别在陇上和犁沟中取土样,同时还应取20厘米深处的土样,以确定虫卵附着在根块植物上的可能;3、为了测定不同局部气候条件下虫卵存活率,要从有日光照射和荫蔽区采取土样;4、厕所、庭院、厨房取表层土;5、每份土样约50100g。5第五页,讲稿共二十六页哦1、土样处理:剔除菜叶、树皮等大杂物,压碎土样中的大颗粒;然后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。2、分离:取50ml大离心管,放入过筛后的土样10g,加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻度线。用橡皮塞紧塞管口,在振荡器上振荡15分钟,可反复34次,待充分混合后,以2000rp
3、m,离心4min。3、漂浮:弃去上部的氢氧化钠,加入饱和硝酸钠溶液充分搅拌混匀,2000rpm离心4min,再加饱和硝酸钠溶液满至管口,覆上18mm18mm盖玻片。4、计数:静置15min后,将盖玻片迅速翻转取下,置于载玻片上镜检,同时再覆上第二张盖玻片,如此反复,共计数34张盖玻片。6第六页,讲稿共二十六页哦7第七页,讲稿共二十六页哦1、漂浮液的比重:漂浮液的比重是影响蛔虫卵检出率的重要因素,用比重大的溶液作为漂浮液效果较为理想,与饱和硫酸锌、硫酸镁、氯化钠等盐溶液相比,饱和硝酸钠的比重最高,用作漂浮液蛔虫卵的检出率最高。2、土壤性质:土壤性质决定了虫卵与土壤颗粒粘合的程度,蛔虫卵检出率沙土
4、最高,壤土次之,粘土最低。3、离心的时间与次数:延长离心时间、提高离心速度或增加离心次数均可以提高蛔虫卵与土壤颗粒的分离效果进而提高检出率。8第八页,讲稿共二十六页哦受精蛔虫卵呈短椭圆形或圆形,卵壳厚,双线层,外包一层乳头状突起的蛋白膜,呈棕黄色。未受精蛔虫卵与受精卵相比显得狭长,多为长椭圆形,卵内充满大小不等油滴状卵黄颗粒。9第九页,讲稿共二十六页哦1.含一个卵细胞活受精蛔虫卵,外包有乳头状突起的蛋白膜。2.脱蛋白膜活受精蛔虫卵10第十页,讲稿共二十六页哦3.含2个卵细胞活受精蛔虫卵4.含4个卵细胞活受精蛔虫卵11第十一页,讲稿共二十六页哦5.含8个卵细胞活受精蛔虫卵6.含16个卵细胞活受精
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