隐球菌临床推广幻灯片.ppt
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1、隐球菌临床推广隐球菌临床推广第1页,共39页,编辑于2022年,星期三 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科室及临床意义适用科室及临床意义三 相关标准相关标准四第2页,共39页,编辑于2022年,星期三q隐球菌为圆形菌体,外周有荚膜,内有反光孢子,但无菌丝。q隐球菌属已知有37个不同的种,但具致病性的多为新型隐球菌,其特点是菌体由一层很厚的多糖荚膜所包被。q 新型隐球菌主要包括新生变种、格特变种等简 介第3页,共39页,编辑于2022年,星期三流行病学p38个 ICUs of 27个意大利医院p384 例真菌感染(318例侵袭性念珠菌感染;63例霉菌感染;3例
2、隐球菌感染)TortoranoAMetal.Mycoses.2011,55:7379.第4页,共39页,编辑于2022年,星期三qHIV感染者q器官移植患者q接受大剂量皮质类固醇或单克隆抗体(如阿仑单抗、英夫利昔单抗)和/或其他免疫抑制剂治疗的患者q其他无基础疾病的患者JohnR.Perfect,etc.ClinicalInfectiousDiseases2010;50:291322 美国感染病学会的美国感染病学会的“隐球菌病治疗临床实践指南(隐球菌病治疗临床实践指南(2010 年年更新)更新)”中指出,隐球菌病的易感人群主要包括:中指出,隐球菌病的易感人群主要包括:宿主因素第5页,共39页,
3、编辑于2022年,星期三流行病学q随着AIDS患者的增多,各种机会性感染的发病率也随之上升,新型隐球菌成为继白色念珠菌之后最常见的机会性感染真菌,其在HIV中的感染率已达8.5%。q隐球菌性脑膜炎发生率和死亡率在发达国家达到10-30%,在发展中国家可达到50-100%。q早期隐球菌感染临床表现缺乏特异性,脑脊液变化不典型,但是当发展为隐球菌性脑膜炎时,死亡率可达到20%。早期、快速、准确地诊断很有必要第6页,共39页,编辑于2022年,星期三现有检测手段v墨汁染色(菌体)v真菌培养(活菌)vELISA(荚膜多糖抗原)v乳胶凝集法(荚膜多糖抗原)v胶体金法(荚膜多糖抗原)第7页,共39页,编辑
4、于2022年,星期三1.印度墨汁染色:印度墨汁染色:敏感性差,阳性检出率很低2.脑脊液或血液培养(金标准):脑脊液或血液培养(金标准):阳性检出率低,培养(2-10天)及鉴定时间长,易误诊3.抗原检测试验:抗原检测试验:脑脊液和血清样本抗原检测的敏感性可达到97%和87%*,能实现早期快速诊断*TylerWarkentien,MD.IntJSTDAIDS.2010October;21(10):679684.现有检测手段第8页,共39页,编辑于2022年,星期三隐球菌荚膜多糖抗原q 由3种不同的单糖聚合而成q 是引起病理变化的主要毒性因子q 在菌体生长和繁殖过程中,GXM不断分泌到胞外q 通过发
5、挥免疫抑制作用和免疫调理作用影响宿主免疫系统OscarZaragoza,etc.AdvApplMicrobiol.2009,68:133216隐球菌荚膜多糖抗原隐球菌荚膜多糖抗原GXM(Glucuronoxylomannan,GXM):荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物,可以作为隐球菌感染的诊断依据第9页,共39页,编辑于2022年,星期三 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 临床意义及适用科室临床意义及适用科室三 相关标准相关标准四第10页,共39页,编辑于2022年,星期三隐球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)原理第11页,共39页,编辑于2022年,星期三隐球菌抗原检
6、测试剂盒(胶体金免疫层析法)v试剂盒组成试剂盒组成隐球菌抗原检测试纸条50条样本稀释液滴定液阳性对照v稳定性稳定性/储存方法储存方法2年有效期室温储存第12页,共39页,编辑于2022年,星期三特 点v无需样本预处理无需样本预处理v10分钟得到结果分钟得到结果v定性或半定量测定定性或半定量测定v结果客观结果客观v血清,脑脊液,血浆血清,脑脊液,血浆第13页,共39页,编辑于2022年,星期三样本收集及制备v按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。v样本最多可以在样本最多可以在 2-8放置放置 72 小时。小时。v不反复冻融的情况下,样本可以在不反复冻融的
7、情况下,样本可以在-20以下保存以下保存更长时间。更长时间。v样本在运输过程中应保持在样本在运输过程中应保持在 2-8或者或者-20以下。以下。第14页,共39页,编辑于2022年,星期三定性检测操作步骤v简单简单5步,步,10分钟得到结果分钟得到结果第15页,共39页,编辑于2022年,星期三注意:若对照条带未出现,则说明该检测无效,应重新检测。定性检测结果 第16页,共39页,编辑于2022年,星期三半定量检测操作步骤v1、以 1:5 作为初始稀释浓度,依次 1:2 稀释至 1:2560。分别放置于10 个微离心管中并编号1-10。v2、向 1 号试管中加入 4 滴样本稀释液。v3、分别向
8、标号 2-10 的试管中加入 2 滴滴定液。v4、将 40 L 样本加入 1 号试管并混匀。v5、从 1 号试管中吸取 80 L 样本混合液转移至 2 号试管并混匀,依次进行稀释直至 10 号试管。v6、10 号试管中吸取 80 L 样本混合液并丢弃以保证试管内最终体积为 80 L。v7、将试纸条的白端分别没入试管中。v8、等待 10 分钟,读取并记录实验结果。第17页,共39页,编辑于2022年,星期三半定量检测操作步骤第18页,共39页,编辑于2022年,星期三半定量检测操作步骤-2第19页,共39页,编辑于2022年,星期三半定量检测(滴度)结果对于半定量滴定检测,患者的滴度应报告为产生
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