乳品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1的测定培训讲学.doc
《乳品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1的测定培训讲学.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《乳品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1的测定培训讲学.doc(12页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。乳品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1的测定-固相萃取-高效液相色谱法检测乳品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1迪马科技摘要:建立测定乳品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1含量的固相萃取-高效液相色谱方法。样品经乙腈提取,ProElutAFT固相萃取柱净化,以正己烷和三氟乙酸衍生后,通过DiamonsilC18(2)色谱柱分离,流动相为水、乙腈和异丙醇,梯度洗脱,流速1mL/min,荧光检测器检测,激发波长365nm,发射波长435nm,外标法定量。结果表明5种黄曲霉毒素在0.015g
2、/L范围内线性关系良好。样品加标回收率在80%100%之间,相对标准偏差1.58%4.21%,方法检出限为牛奶:0.020.06g/kg,奶粉:0.040.12g/kg。DeterminationofaflatoxinsB1、B2、G1、G2、M1indairyproductsbysolidphaseextraction-highperformanceliquidchromatographic(SPE-HPLC)Abstract:ToestablishthemethodfordeterminationofaflatoxinsB1、B2、G1、G2、M1indairyproductsbysoli
3、dphaseextractionwithhighperformanceliquidchromatographic(SPE-HPLC).Thesampleswereextractedwithacetonitrile,thenpurifiedwithProElutAFTcolumn,derivedwithhexaneandtrifluoroaceticacid,andseparatedonDiamonsilC18(2)column,mobilephaseiswater、acetonitrileand2-propanolwithaflowrateof1mL/min,detectedbyfluores
4、cencedetector,EX:360nm、Em:435nm,quantifiedbyexternalstandardmethod.Theresultindicatedthatthecalibrationcurvesshowedgoodlineaaritiesforaflatoxinsintherangeof0.01-5g/L.Thespikedrecoverieswereintherangeof80%-100%withrelativestandarddeviationsof1.58%-4.21%,thelimitsofdeterminationwere0.02-0.06g/kginmilk
5、and0.04-0.12g/kginmilkpowder.黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉和寄生曲霉产生的次生代谢产物,是现在发现的毒性和致癌性最强的天然污染物,其毒性是氰化钾的10倍,砒霜的68倍。黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1是最为常见且最重要的五种衍生物,可存在于土壤、坚果、谷物、食用油、及乳制品中。由于新生儿童免疫系统不完善,抵抗力较弱,所以婴幼儿食品尤其是奶粉、牛奶中黄曲霉毒素的检测尤为重要。目前,黄曲霉毒素的检测方法有薄层色谱法(TLC)1、酶联免疫吸附法(ELISA)2-3、高效液相色谱-荧光法(HPLC
6、-FLD)4-7;高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)8-10。TLC法对人和环境的污染系数大,操作繁琐,灵敏度不高,很难普及。ELISA方法虽然操作简单,但定量不精确,易出现假阳性结果。HPLC-MS法仪器昂贵,检测成本较高,而HPLC-FLD操作简单,选择性好,灵敏度高,定量准确,同时仪器价格适中,适宜推广。另外,乳制品成分复杂、蛋白含量高、含有多种维生素及微量元素,所以样品净化在检测过程中占有重要的地位,目前的净化方法主要采用免疫亲和柱(IAC)净化11-13和其它固相萃取柱净化,如石墨化碳黑柱14;CN柱15;HLB柱16等。IAC虽然选择性好但是价格昂贵、储存条件苛刻、保存期短
7、,其它固相萃取柱净化过程中涉及步骤较多,且净化效果一般。故本文选择ProElutAFT固相萃取柱结合高效液相色谱荧光检测器测定乳品中黄曲霉毒素,方法灵敏度高,步骤简单,净化效果好,成本较低,适合推广。1实验部分1.1仪器与试剂岛津LC-20A高效液相色谱仪,RF-20A荧光检测器,柱温箱,涡旋混合器(予华仪器),高速离心机(予华仪器),旋转蒸发仪(予华仪器),12孔固相萃取装置(迪马公司),DiamonsilC18(2),250mm4.6mm,5m色谱柱(迪马公司),ProElutAFT固相萃取柱(迪马公司)。乙腈、甲醇、异丙醇均为色谱纯(迪马公司),黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1标准
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 乳品 中黄 曲霉 毒素 B1 B2 G1 G2 M1 测定 培训 讲学
限制150内