(11.4)--11.4基因诊断-1.pdf
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1、基因诊断 Gene detection 基因诊断 运用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化,从而对疾病作出的诊断,称为分子诊断,又叫基因诊断。基因诊断的材料包括:DNA,RNA与蛋白质。基因诊断的基本原理 基因诊断的基本特点 基因诊断的技术与应用 核酸分子杂交 RFLP技术 PCR相关技术 加热加热 加碱加碱 变性变性 缓慢缓慢 降温降温 复性复性 或退火或退火 加入探针加入探针 基因诊断原理 基因诊断的特点 1.以特定基因为目标,检测基因的突变和表达信息,特异性强;2.采用分子杂交技术和PCR技术具有信号放大作用,微量样品即可进行诊断,灵敏度高;3.可用于尚无出现临床表现
2、前、胎儿的出生前诊断,应用广泛;4.检测样品获得便利,不受个体发育阶段性和基因表达组织特异性的限制。一、核苷酸探针杂交相关技术(nucleic acid probe)基因诊断的技术与应用 1.Southern Blot 2.ASO 3.Genechip 探针(Prober):是指一段被标记了的、特定的核苷酸序列(DNA/RNA),用于杂交筛查鉴定被测DNA或RNA分子。探针的特性 1.应带有标记 2.探针应为单链 3.具有高度特异性 4.探针的序列应选择基因编码序列 探针 标记物 标记探针 靶核酸 杂交体 1.Southern Blot 1.基因组DNA 2.用限制酶消化 3.凝胶电泳分离 变
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- 11.4 基因 诊断
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