《氨基转换作用》PPT课件.ppt
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1、实验六实验六 氨基转换作用氨基转换作用目的要求:目的要求:了解转氨酶在代谢过程中的重要作用了解转氨酶在代谢过程中的重要作用 学习应用纸层析法鉴定氨基转换反应学习应用纸层析法鉴定氨基转换反应实验原理实验原理 体内体内-氨基酸的氨基酸的-氨基在氨基转换酶的作氨基在氨基转换酶的作用下,移换至用下,移换至-酮酸的过程,称酮酸的过程,称氨基转换作氨基转换作用用。转氨酶(aminotransferase)v 转换酶中的一类。催化氨基酸和a-酮酸 或醛酸之间的氨基转换反应,生成与原来的a-酮酸或醛酸相应的a-氨基酸或-氨基酸,原来氨基酸转变成相应的酮酸。转氨酶催化的反应都是可逆的。v转氨酶参与氨基酸的分解和
2、合成,是人体代谢过程中必不可少的“催化剂”;v以谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)最为重要。vGPT 主要存在于肝脏、心脏和骨骼肌中,在肝脏中活力最大。GPT升高是肝脏功能出现问题的一个重要指标。本实验是将谷氨酸与丙酮酸在肌肉糜中本实验是将谷氨酸与丙酮酸在肌肉糜中谷氨酸丙酮酸氨基转换酶(简称谷氨酸丙酮酸氨基转换酶(简称谷丙转谷丙转氨酶氨酶)的作用下进行氨基转化反应,然后用)的作用下进行氨基转化反应,然后用纸层析法检查反应体系中丙氨酸的生成。纸层析法检查反应体系中丙氨酸的生成。谷丙转氨酶L谷氨酸丙酮酸-酮戊二酸L丙氨酸 1 在在反反应应体体系系中中添添加加溴溴乙乙酸酸以以抑抑制制谷谷氨氨
3、酸酸和和丙丙酮酮酸的其他代谢过程。酸的其他代谢过程。v谷氨酸、丙酮酸(丙酮酸羧化酶系)糖异生途径v谷氨酸、草酰乙酸在谷草转氨酶(GOT)催化转氨基生成天冬氨酸。v丙酮酸:丙酮酸脱氢酶系催化生成乙酰辅酶A,进入TCA循环。试剂和器材试剂和器材试剂试剂1%谷氨酸溶液(用1%KOH调到中性);1%丙酮酸钠溶液(用1%KOH调到中性);0.1%KHCO3溶液;0.025 溴醋酸溶液(用1%KOH调到中性);2%Hac溶液;0.1%标准谷氨酸;0.1%标准丙氨酸。展开剂:酚饱和水溶液:2份酚加1份水混合放入分液漏斗,振荡。静置24小时 显色剂:0.1%茚三酮正丁醇溶液。材料材料 肌肉糜肌肉糜:取兔子肌肉
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