酵母RNA提取实验报告.doc
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1、酵母RNA提取实验报告?2、掌握紫外线( UV)吸收法测定核酸浓度的原理。?3、熟悉紫外分光光度计的使用方法。?二、实验原理核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。研究核酸需要纯度很高的核酸,所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。本次实验提取酵母的核糖核酸( RNA)。RNA离体后稳定性很差,含量低,所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性,防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌,尤其重要的是防止 RNA 酶的作用。本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。核酸( RNA)都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物,而核苷酸是
2、由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的, 故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。?提取 RNA的方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者是利用碱使细菌细胞壁溶解, 是 RNA释放出来,后者是在加热的条件下, 利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性, 使 RNA释放出来。使用浓盐法提取 RNA的时候应该注意掌握温度,直接至 90100浸提, 避免在 2070的时间过长, 因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围, 会使 RNA降解而降低提取率。这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取 RNA的一般方法。但是这两种方法各有利弊, 如浓盐法提取的
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