总糖和还原糖的测定.ppt
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1、实验三实验三 总糖和还原糖的测定总糖和还原糖的测定 3,5二硝基水杨酸二硝基水杨酸(DNS)法法一、目一、目 的的n 掌握还原糖和总糖的测定原理掌握还原糖和总糖的测定原理n 掌握分光光度计的使用掌握分光光度计的使用二、原二、原 理理n还原糖还原糖:指含有自由醛基或酮基的糖类:指含有自由醛基或酮基的糖类 单糖单糖:不能被水解成更小分子的糖不能被水解成更小分子的糖,单糖都是还原糖单糖都是还原糖 葡萄糖葡萄糖,果糖果糖 寡糖寡糖:最重要的是双糖:最重要的是双糖:Maltose(麦芽糖麦芽糖),Sucrose(蔗糖)蔗糖)Lactose(乳糖乳糖)但但Sucrose不是还原糖不是还原糖 多糖多糖:能水
2、解成多个单糖分子能水解成多个单糖分子,如淀粉如淀粉,糖原和纤糖原和纤 维素维素 酸水解法酸水解法使没有还原性的双糖与多糖,彻使没有还原性的双糖与多糖,彻底水解成具有还原性的单糖,再进行测定,这底水解成具有还原性的单糖,再进行测定,这样就可以求样品中总糖的含量。样就可以求样品中总糖的含量。测定方法比色法测定方法比色法黄色黄色棕红色棕红色 首先制作葡萄糖标准曲线,以标准葡萄首先制作葡萄糖标准曲线,以标准葡萄糖样品进行测定,以葡萄糖含量(糖样品进行测定,以葡萄糖含量(mg)为为横坐标,横坐标,OD540读数为纵坐标,绘制标准曲读数为纵坐标,绘制标准曲线。线。待测样品的待测样品的OD540平均值在标准
3、曲线上平均值在标准曲线上查出相应的糖含量。查出相应的糖含量。n朗伯比尔(朗伯比尔(Lambert-Beer)定律)定律 朗伯比尔定律是比色分析的基本原理,这个定律是有色溶液对单色光的吸收程度与溶液及液层厚度间的定量关系。此定律是由朗伯定律和比尔定律归纳而得。A或或D=I I0 0/I/I A或D光吸收或光密度 I0 入射光强度 I 透射光强度三、试剂和器材三、试剂和器材 试剂:试剂:DNS试剂葡萄糖标准溶液;6M HCl;碘碘化钾溶液;6M NaOH;0.1%酚酞指示剂。器材器材 容量瓶,试管,移液管,量筒,胶头滴管,漏斗 50水浴,水浴,沸水浴,分光沸水浴,分光光度计等。光度计等。材料材料
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- 还原 测定
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