淡紫拟青霉FJAT-9041菌剂研发及其对香蕉枯萎病防治效2921.docx
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1、分类号: 单位代码码:密 级: 学号:100937008福建农林大大学硕士学学位论文淡紫拟青霉霉淡紫拟青青霉淡紫拟拟青霉FJJAT-99041菌菌剂研发及其对香蕉蕉枯萎病防防治效果的的研究和菌菌剂的研发发学 科 门 类:农学一级学科名名称:植物物保护二级学科名名称:植物物检疫研 究 方 向:有害生物物检验检疫疫研 究究 生生:肖马云云指 导 教 师:林乃铨教教授 刘波波研究员完 成 时 间:二O 一一二年四月M.S. Thessis oof Fuujiann Agrricullturee andd ForrestrryUniiverssityThe sstudyyon ccontrrol ee
2、ffecct off Paeeciloomycees liilaciinusFFJAT-90411FJATT-90441agaainstt Fussariuum wiilt iin baananaa andd agentt resseachh andd devveloppmenttDisciiplinne: AAgriccultuureFirstt Rannk Diiscipplinee: Pllant ProttectiionSeconnd Raank DDisciiplinne: PPlantt QuaaranttineReseaarch Fielld:PeestInnspecctionn
3、a aAnd qQuaraantinne Candiidatee: Xiiao MMa YuunSuperrvisoor: PProf. Dr. Linn Naiiquann Prof. Dr. Liuu BoSubmiittedd Timme: AAprill, 20012独创性声明明本人声明,所所呈交的学学位(毕业业)论文,是是本人在指指导教师的的指导下独独立完成的的研究成果果,并且是是自己撰写写的。尽我我所知,除除了文中作作了标注和和致谢中已已作了答谢谢的地方外外,论文中中不包含其其他人发表表或撰写过过的研究成成果。与我我一同对本本研究做出出贡献的同同志,都在在论文中作作了明确的的说明并
4、表表示了谢意意,如被查查有侵犯他他人知识产产权的行为为,由本人人承担应有有的责任。学位(毕业业)论文作作者亲笔签签名:日期:论文使用授授权的说明明本人完全了了解福建农农林大学有有关保留、使使用学位(毕毕业)论文文的规定,即即学校有权权送交论文文的复印件件,允许论论文被查阅阅和借阅; 学校可可以公布论论文的全部部或部分内内容,可以以采用影印印、缩印或或其他复制制手段保存存论文。保保密,在年后解解密可适用用本授权书书。不不保密,本本论文属于于不保密。学位(毕业业)论文作作者亲笔签签名:日期:指导教师亲亲笔签名:目 录第一章绪论论11 香蕉枯枯萎病的发发生与危害害12.香蕉枯枯萎病的生生物防治研研究
5、进展112.1国外外研究进展展12.2国内内研究进展展23.淡紫拟拟青霉研究究进展23.1淡紫紫拟青霉的的分类地位位及生物学学特征23.2淡紫紫拟青霉的的生物防治治研究33.3淡紫紫拟青霉的的定殖研究究34淡紫拟青青霉生物肥肥药概况445 淡紫拟拟青霉菌剂剂研制-固定化细细胞技术446 本研究究的目的和和拟解决的的问题5第二章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411对香蕉枯枯萎病尖孢孢镰刀菌的的抑制作用用6引言言61 材料与与方法61.1 试试验材料661.2 试试验方法661.2.11不同孢子子浓度淡紫紫拟青霉FFJAT-90411发酵液对对香蕉枯萎萎病病原菌菌的抑菌效效果61.2.22不同接菌菌
6、浓度淡紫紫拟青霉FFJAT-90411发酵液对对香蕉枯萎萎病病原菌菌的抑菌效效果71.22.3 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵液液不同pHH抑菌稳定定性71.2.44 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041发发酵液不同同温度抑菌菌稳定性771.2.55 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041发发酵液不同同紫外线照照射时间抑抑菌稳定性性71.2.66 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041发发酵液不同同NaCLL浓度抑菌稳稳定性71.2.77数据分析析72结果与分分析72.1不同同孢子浓度度淡紫拟青青霉FJAAT-90041发酵酵液对香蕉蕉枯萎病病病原菌的抑抑制效果772.2不同同接菌浓度度淡紫拟
7、青青霉FJAAT-90041发酵酵液对香蕉蕉枯萎病病病原菌的抑抑制效果992.33 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041发发酵液不同同pH抑菌稳稳定性1112.4 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵液液不同温度度抑菌稳定定性132.5 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵液液不同紫外外线照射时时间抑菌稳稳定性1552.6 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵液液不同NaaCL浓度度抑菌稳定定性173.讨论119第三章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411的发酵工工艺20引言201材料和方方法201.1试验验材料2001.2试验验方法2001.2.11菌株的活活化和种子子液的制备备201
8、.2.22 50LL发酵罐发发酵2011.2.33 样品采采集及处理理211.2.44淡紫拟青青霉FJAAT-90041菌液液孢子数计计数211.2.55菌丝干重重和菌丝湿湿重的测量量2111.2.66 pH的的测量2111.2.77粘度值的的测量2111.2.88 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041各各个时间段段发酵液挥挥发性物质质的GC-MS分析析211.2.88.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441各个时时间段发酵酵液挥发性性物质的主主要成分分分析211.2.88.2 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441各时间间段发酵液液挥发性物物质在样品品中分布的的聚类分析析211.2.99数据分
9、析析212结果与分分析212.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵过过程菌体数数的变化2212.3 淡淡紫拟青霉霉FJAT-90411发酵过程程菌丝湿重重和干重的的变化2222.4淡紫紫拟青霉FFJAT-90411发酵过程程粘度值的的变化2332.5 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441发酵过过程pH值的变变化232.6 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441各时间间段发酵液液挥发性物物质GC-MS分析析242.6.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041各各时间段发发酵液挥发发性物质成成分分析224dodeccametthyl penttasilloxanne26十二甲基五五硅氧烷22
10、62.6.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041各各时间段发发酵液挥发发性物质在在样品中分分布的聚类类分析277Fig2-6Cluusterr anaalysiis off difffereent sseconndaryy mettabollitess283讨论288第四章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411对香蕉枯枯萎病的防防治效果330引言301 材料与与方法3001.1 试试验材料3301.2 试验方法法301.2.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉盆栽栽苗香蕉枯枯萎病防效效的测定3301.2.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041在在香蕉土壤壤的定殖3311.2.22.
11、1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441在香蕉蕉根际土壤壤的定殖3311.2.22.2 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441在香蕉蕉根围土壤壤的定殖3311.2.22.3 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441在香蕉蕉根、茎、叶叶内的定殖殖321.2.33不同浓度度淡紫拟青青霉FJAAT-90041生物物肥药对香香蕉生长特特性的影响响321.2.44 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉植株株酶活性的的影响3221.2.4.1香蕉植植株超氧化化物歧化酶酶(SODD)的测定定321.2.44.2香蕉蕉植株多酚酚氧化酶(PPO)的测定321.2.44.3香蕉蕉植株过氧氧化物酶(POD)的测定3
12、32结果与分分析332.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441对香蕉蕉盆栽苗香香蕉枯萎病病防效的测测定332.1.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉苗期期生长特性性的影响3332.1.11.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441生物肥肥药施用550天后对对香蕉盆栽栽苗株高的的影响3552.1.11.2 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441生物肥肥药施用550天后对对香蕉盆栽栽苗茎粗的的影响3552.1.11.3 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441生物肥肥药接种550天后对对香蕉盆栽栽苗叶片数数的影响3362.1.22.4接种种淡紫拟青青霉FJAAT-90041菌液液50天后
13、对对香蕉盆栽栽苗株高的的影响3662.1.11.5接种种淡紫拟青青霉FJAAT-90041菌液液50天后对对香蕉盆栽栽苗茎粗的的影响3662.1.11.6接种种淡紫拟青青霉FJAAT-90041菌液液50天后对对香蕉盆栽栽苗叶片数数的影响3372.1.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对盆栽苗香香蕉枯萎病病的防治效效果研究3882.2 不不同浓度的的淡紫拟青青霉FJAAT-90041生物物肥药对香香蕉生长特特性的影响响402.2.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041生生物肥药对对香蕉盆栽栽苗株高的的影响40022.2.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041生生物肥药对对香蕉盆栽栽
14、苗茎粗的的影响4112.2.33各个处理理淡紫拟青青霉FJAAT-90041生物物肥药施用用60天后对对香蕉盆栽栽苗叶片数数的影响4412.3 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441在香蕉蕉土壤的定定殖4222.3.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041在在香蕉土壤壤根际土壤壤的定殖4422.3.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041在在香蕉根围围土壤的定定殖422.3.33 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041在在香蕉根、茎茎、叶的定定殖432.4 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441对香蕉蕉植株酶活活性的影响响442.4.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉植株株超氧化物物歧化
15、酶(SOD)的影响442.4.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉植株株多酚氧化化酶(PPPO)的影影响452.4.33 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉植株株过氧化物物酶(POOD)的影影响4633 讨论48第五章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411对香蕉根根际土壤微微生物群落落结构的影影响49引言491材料与方方法491.1 试试验材料4491.2试验验方法4991.2.11 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041对对香蕉土壤壤酶活性的的影响4991.2.11.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441对香蕉蕉土壤几丁丁质酶活性性的影响5501.2.11.2 淡淡紫拟青霉霉F
16、JATT-90441对香蕉蕉土壤脲活活性的影响响501.2.1.2 淡紫紫拟青霉FFJAT-90411对香蕉土土壤过氧化化氢酶活性性的影响5501.2.11.4数据据统计分析析512.结果与与分析51122.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441对香蕉蕉土壤几丁丁质酶活性性的影响5512.1.11土壤几丁丁质酶标准准曲线的制制作512.1.22不同处理理香蕉土壤壤几丁质酶酶活性的变变化512.2 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441对香蕉蕉土壤脲酶酶活性的影影响522.2.11土壤脲酶酶标准曲线线的制作5522.2.22不同处理理香蕉土壤壤脲酶活性性的变化522.3 淡淡紫拟青霉霉FJATT
17、-90441对香蕉蕉土壤过氧氧化氢酶活活性的影响响533讨论533第六章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411生物肥药药生产工艺艺的研究555引言552.材料和和方法5552.1试验验材料5552.2试验验方法5552.2.11不同保存存条件下淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441生物肥肥药中活菌菌数的存活活动态5552.2.11.1不同同温度下淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441生物肥肥药中活菌菌数的存活活动态5552.2.11.2不同同含水量的的淡紫拟青青霉FJAAT-90041生物物肥药中活活菌数的存存活动态5552.2.11.3 结结果计算5562.2.22淡紫拟青青霉FJAAT-90041
18、的固固体发酵5562.2.2.1组组培瓶和玻玻璃瓶淡紫紫拟青霉FFJAT-90411固体发酵酵562.2.22.2 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441不同固固体发酵载载体的筛选选562结果与分分析572.1不同同保存条件件下淡紫拟拟青霉FJJAT-99041生生物肥药中中活菌数的的存活动态态572.1.11不同温度度下淡紫拟拟青霉FJJAT-99041生生物肥药中中活菌数的的存活动态态572.2.11不同含水水量的淡紫紫拟青霉FFJAT-90411生物肥药药中活菌数数的存活动动态57图6-2不不同含水量量的淡紫拟拟青霉FJJAT-99041生生物肥药中中活菌数的的存活动态态582.44 淡紫
19、拟拟青霉FJJAT-99041的的固体发酵酵582.4.11组培瓶和和玻璃瓶淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441固体发发酵582.4.22 淡紫拟拟青霉FJJAT-99041不不同载体的的固体发酵酵筛选5583讨论599第七章淡紫紫拟青霉FFJAT-90411制剂技术术研究600引言601材料与方方法601.1试验验材料6001.2试验验方法6001.2.11不同包埋埋方法的筛筛选601.2.11.1 淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441的培养养601.2.11.2试验验药品的配配置601.2.11.3包埋埋方法6001.2.11.4机械械性能测试试611.2.11.5活菌菌数测定6611.2
20、.22海藻酸钠钠包埋法不不同包埋载载体的筛选选611.2.22.1淡紫紫拟青霉FFJAT-90411的发酵6111.2.22.2不同同处理6111.2.22.3增殖殖611.2.22.4机械械性能测试试611.2.22.5活菌菌数测定6621.2.33不同固化化温度对包包埋效果的的影响6621.2.44不同保存存条件对海海藻酸钠包包埋淡紫拟拟青霉FJJAT-99041的的活菌数的的影响6221.2.55不同包埋埋条件的优优化621.2.55.1不同同包埋时间间的优化6621.2.55.2不同同接种量的的优化6221.2.55.3不同同海藻酸钠钠浓度的优优化621.2.55.4不同同CaCll2
21、浓度的优优化621.2.66海藻酸纳纳包埋淡紫紫拟青霉FFJAT-90411活菌数稳稳定性的测测定632.结果与与分析6332.1不同同包埋方法法的筛选6632.2海藻藻酸钠包埋埋法不同包包埋载体的的筛选6442.3不同同固化温度度对包埋效效果的影响响652.4不同同保存条件件对海藻酸酸钠包埋淡淡紫拟青霉霉FJATT-90441的活菌菌数的影响响652.5不同同包埋条件件的优化6662.5.11不同包埋埋时间的优优化662.5.22不同接种种量的优化化672.5.33不同海藻藻酸钠浓度度的优化6682.5.44不同Caccl2浓度的优优化702.6海藻藻酸纳包埋埋淡紫拟青青霉FJAAT-900
22、41活菌菌数稳定性性的测定7713讨论711第八章结论论和展望7731结论7732. 展望望74参考文献775个人简历880致谢82第一章绪论论11 香蕉枯枯萎病的发发生与危害害12.香蕉枯枯萎病的生生物防治研研究进展22.1国外外研究进展展22.2国内内研究进展展23.淡紫拟拟青霉研究究进展33.1淡紫紫拟青霉的的分类地位位及生物学学特征33.2淡紫紫拟青霉的的生物防治治研究33.3淡紫紫拟青霉的的定殖研究究44淡紫拟青青霉生物肥肥药概况45 淡紫拟拟青霉菌剂剂研制-固定化细细胞技术56 本研究究的目的和和拟解决的的问题6第二章 FFJAT-90411对香蕉枯枯萎病病原原菌的抑菌菌稳定性7引
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