蛋白纯化试剂盒(精品).ppt
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1、销售培售培训北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备有限公司有限公司北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO科研仪器产品科研仪器产品生化生化/分子生物分子生物酶联斑点(酶联斑点(酶联斑点(酶联斑点(ELISPOT)ELISPOT)ELISPOT)ELISPOT)分析仪分析仪分析仪分析仪 电泳仪电泳仪电泳仪电泳仪蛋白质核酸纯化试剂盒蛋白质核酸纯化试剂盒蛋白质核酸纯化试剂盒蛋白质核酸纯化试剂盒生物分子相互作用系统生物分子相互作用系统生物分子相互作用系统生物分子相互作用系统基因扩增(基因扩增(基因扩增(基因扩增(PCR)PCR)PCR
2、)PCR)仪仪仪仪生物工程设备生物工程设备生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜组织细胞均质设备组织细胞均质设备组织细胞均质设备组织细胞均质设备实验室常用设备实验室常用设备超纯水系统超纯水系统超纯水系统超纯水系统北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO蛋白核酸纯化试剂盒蛋白核酸纯化试剂盒北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO一、一、NORGEN-NORGEN-公司概述公司概述l l加拿大的加拿大的NorgenNorgen BiotekBiotek 公司
3、是一家致力于研究蛋白核酸公司是一家致力于研究蛋白核酸纯化、浓缩新产品的公司。纯化、浓缩新产品的公司。l l该公司建立了一种基于该公司建立了一种基于NORGENNORGEN专利树脂专利树脂用于核酸和蛋白的用于核酸和蛋白的的分离技术平台,在的分离技术平台,在20032003年受到国际研究委员会(年受到国际研究委员会(NRCNRC)的)的认可。认可。北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO1.离子交换反应离子交换反应 离子交换层析是以离子交换剂离子交换剂为固定相固定相,以特定的含离子溶液含离子溶液为流动流动相相,利用离子交换剂与流
4、动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。2.阳离子交换反应:阴离子交换反应:R-SO3HR-SO3 H反应简式为:反应简式为:R-NR3OHR-NR3+OH反应简式为:反应简式为:R-SO3NaR-SO3 NaR-NR3ClR-NR3+Cl-离子交换反应北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGOv离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的具有离子交换功能的固态高分子材料。具有离子交换功能的固态高分子材料。v离子交换作用是可逆的离子交换作用是可逆的离子交换树脂北京平
5、利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO1.1.树脂预处理树脂预处理树脂预处理树脂预处理2 2.上柱交换上柱交换上柱交换上柱交换3 3.洗脱洗脱洗脱洗脱4 4.树脂的再生树脂的再生树脂的再生树脂的再生离子交换树脂的工作过程离子交换树脂的工作过程:根据样品类型分别用酸和碱处理,最后调根据样品类型分别用酸和碱处理,最后调pH值至所需范围。值至所需范围。蛋白质核酸表面的带电基团和树脂上带相反电荷的离子交换基团相互结蛋白质核酸表面的带电基团和树脂上带相反电荷的离子交换基团相互结合合用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。用亲和力更
6、强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。先用清水洗涤,然后用再生剂再生,最后用清水洗至所需先用清水洗涤,然后用再生剂再生,最后用清水洗至所需pH值。值。北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO 离子交离子交换层换层析技析技术术已广泛于各已广泛于各学学科科领领域。域。在生物化在生物化学学及及临临床生化床生化检验检验中主要用于分中主要用于分离离氨氨基酸、多基酸、多肽肽及蛋白及蛋白质质,也可用于分离,也可用于分离核酸、核核酸、核苷苷酸及其酸及其它带电它带电荷的生物分子。荷的生物分子。离子交换层析的应用离子交换层析的应用北京平利洋北京
7、平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO二、产品型号二、产品型号l蛋白质样品制备蛋白质样品制备 lRNA样品制备样品制备北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO蛋白质纯化基本操作流程蛋白质纯化基本操作流程v样品准备样品准备v纯化柱的活化纯化柱的活化v蛋白质结合蛋白质结合v纯化柱的清洗纯化柱的清洗v洗脱蛋白质洗脱蛋白质北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO蛋白纯化试剂盒的优势蛋白纯化试剂盒的优势v理论
8、理论PI07酸性蛋白;酸性蛋白;714碱性蛋白碱性蛋白v试剂盒试剂盒08酸性蛋白酸性蛋白(pH调至调至4.5);814碱性蛋白碱性蛋白(pH调至调至7.0)+12346789105pH-蛋白质净电荷等电点选择碱性蛋白纯化流程选择酸性蛋白纯化流程北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO注意事项注意事项v注意蛋白质样品起始注意蛋白质样品起始pH条件并进行调整,条件并进行调整,选择相应的酸性选择相应的酸性/碱性蛋白纯化流程碱性蛋白纯化流程v确定上样的体积,选择相应体积的试剂确定上样的体积,选择相应体积的试剂 北京平利洋北京平利洋北
9、京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO蛋白质浓缩、缓冲液交换蛋白质浓缩、缓冲液交换和脱盐试剂盒性能和脱盐试剂盒性能v功能作用:功能作用:norgen 树脂对于盐是低亲和力,对于蛋白是高结树脂对于盐是低亲和力,对于蛋白是高结合力,盐去除、浓缩和缓冲液交换同时进行。合力,盐去除、浓缩和缓冲液交换同时进行。v高效性:高效性:20分钟处理分钟处理12个样品个样品v高回收高回收:回收效率高达:回收效率高达99%v无分子量的限制:从多肽到抗体都可处理无分子量的限制:从多肽到抗体都可处理v适用的下游应用:质谱、适用的下游应用:质谱、SDS-PAGE、等点聚焦
10、、等点聚焦、X射线晶射线晶型、核磁共振型、核磁共振北京平利洋北京平利洋北京平利洋医疗设备医疗设备医疗设备有限公司有限公司有限公司LOGOLOGOLOGOLOGO表面活性剂去除试剂盒表面活性剂去除试剂盒v表面活性剂:能显著降低溶剂表面活性剂:能显著降低溶剂(一般为水一般为水)的的表面张力表面张力和液和液液液界面张力界面张力的一类物质的一类物质.由于它们能起乳化、分散、增溶、由于它们能起乳化、分散、增溶、润湿、发泡、消泡、杀菌等作用。润湿、发泡、消泡、杀菌等作用。v功能作用:功能作用:同时去除酸性和碱性蛋白样品中的表面活性剂同时去除酸性和碱性蛋白样品中的表面活性剂(SDS、TritonX-100、
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