(通用版)2022版高考生物二轮复习第1部分专题11生物技术实践考点2微生物的分离与培养教案.pdf
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1、通用版通用版 20222022 版高考生物二轮版高考生物二轮复习第复习第 1 1 局部专题局部专题 1111 生物技术生物技术实践考点实践考点2 2微生物的别离与培养微生物的别离与培养教案教案微生物的别离与培养微生物的别离与培养1 1掌握微生物培养中的无菌操作技术掌握微生物培养中的无菌操作技术(1)3(1)3 种常用的消毒方法:煮沸消毒法、巴氏种常用的消毒方法:煮沸消毒法、巴氏消毒法及化学药剂消毒法。消毒法及化学药剂消毒法。(2)3(2)3 种常用的灭菌方法:灼烧灭菌接种种常用的灭菌方法:灼烧灭菌接种环、接种针等金属器具;干热灭菌主要针对环、接种针等金属器具;干热灭菌主要针对玻璃器皿等;高压蒸
2、汽灭菌主要针对培养基玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌主要针对培养基等。等。2 2理清微生物培养的理清微生物培养的 4 4 种根本操作种根本操作(1)(1)培养基的制备:培养基的制备:计算称量溶化灭菌计算称量溶化灭菌倒平板。倒平板。(2)(2)倒平板操作:待培养基冷却至倒平板操作:待培养基冷却至50_50_左右左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。时,在酒精灯火焰附近倒平板。(3)(3)平板划线操作:平板划线操作:通过接种环在琼脂固体培通过接种环在琼脂固体培养基外表连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀养基外表连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表。释分散到培养基的外表。注意划线的方法如下图。注意
3、划线的方法如下图。-2-2-(4)(4)稀释涂布平板法:稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列的先将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表,进行培养。在稀释度足琼脂固体培养基的外表,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,单个细胞,从而能在培养基外表形成单个的菌落。从而能在培养基外表形成单个的菌落。3 3掌握微生物别离与计数的两个实例掌握微生物别离与计数的两个实例(1)(1)土壤中分解尿素的细菌的别离与计数土壤中分解尿素的细菌的别离与计数筛选菌
4、株:利用选择培养基筛选菌株。筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株。过程:土壤取样样品稀释微生物的培过程:土壤取样样品稀释微生物的培养与观察细菌的计数。养与观察细菌的计数。测定微生物数量的常用方法:活菌计数法测定微生物数量的常用方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。和显微镜直接计数法。鉴定方法:用含酚红指示剂的以尿素为唯鉴定方法:用含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌指示剂变红,那么说一氮源的培养基培养细菌指示剂变红,那么说明该菌能分解尿素。明该菌能分解尿素。(2)(2)分解纤维素的微生物的别离分解纤维素的微生物的别离-3-3-原理原理流程:土壤取样选择培养基梯度稀释流程:土壤取样选择培养基
5、梯度稀释涂布平板挑选菌落。涂布平板挑选菌落。a a别离能分解纤维素的微生物时,别离能分解纤维素的微生物时,有时需要有时需要进行选择培养,选择培养的目的是增大选择对象进行选择培养,选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度,以确保用刚果红染色法鉴别时在样液中的浓度,以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。确实能得到所需菌种。b b培养基:培养基:以纤维素为唯一碳源的选择培养以纤维素为唯一碳源的选择培养基。基。c c筛选方法:刚果红染色法,即通过是否产筛选方法:刚果红染色法,即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。生透明圈来筛选纤维素分解菌。1 1(2022全国卷)在生产、(2022全国卷)
6、在生产、生活和科研实生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来防止杂菌的污染。践中,经常通过消毒和灭菌来防止杂菌的污染。答复以下问题:答复以下问题:-4-4-(1)(1)在实验室中,在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具玻璃和金属材质的实验器具_(_(填“可以或“不可以填“可以或“不可以)放入干热灭放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。菌箱中进行干热灭菌。(2)(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是点是_。(3)(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消密闭空间内的空气可采用紫外线照射消
7、毒,其原因是紫外线能毒,其原因是紫外线能_。在照。在照射前,适量喷洒射前,适量喷洒_,可强化消毒效果。,可强化消毒效果。(4)(4)水水 厂厂 供供 给给 的的 自自 来来 水水 通通 常常 是是 经经 过过_(_(填“氯气“乙醇或“高锰酸钾填“氯气“乙醇或“高锰酸钾)消毒的。消毒的。(5)(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,假设压假设压力到达设定要求,而锅内并没有到达相应温度,力到达设定要求,而锅内并没有到达相应温度,最可能的原因是最可能的原因是_。解析:解析:(1)(1)在实验室中,能耐高温的、需要保在实验室中,能耐高温的、需要保持枯燥的物品,如玻璃器皿和金属
8、材质的实验器持枯燥的物品,如玻璃器皿和金属材质的实验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)(2)-5-5-巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比,其优点表现为在到达消毒目的的同时,营养比,其优点表现为在到达消毒目的的同时,营养物质损失较少。物质损失较少。(3)(3)紫外线照射能消毒的原因是其紫外线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的能够破坏微生物细胞中的 DNADNA 分子。在利用紫外分子。在利用紫外线照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒线照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,液,可强化消
9、毒效果。可强化消毒效果。(4)(4)自来水通常采用氯气进自来水通常采用氯气进行消毒。行消毒。(5)(5)采用高压蒸汽灭菌时,采用高压蒸汽灭菌时,假设压力到达假设压力到达设定要求,而温度未到达相应要求,最可能的原设定要求,而温度未到达相应要求,最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。答案:答案:(1)(1)可以可以(2)(2)在到达消毒目的的同时,在到达消毒目的的同时,营养物质损失较少营养物质损失较少(3)(3)破坏破坏 DNADNA 结构结构消毒液消毒液(4)(4)氯气氯气(5)(5)未将锅内冷空气排尽未将锅内冷空气排尽2 2(2022全国卷)一种
10、有机物(2022全国卷)一种有机物 X(X(仅含有仅含有C C、H H 两种元素两种元素)不易降解,会造成环境污染。某不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解 X X 的细的细菌菌(目标菌目标菌)。号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中参加号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中参加X(5 g/L)X(5 g/L)。-6-6-号培养基:号培养基:氯化钠氯化钠(5(5 g/L)g/L),硝酸铵硝酸铵(3(3 g/L)g/L),其他无机盐其他无机盐(适量适量),X(15 g/L)X(15 g/L)。号培养基:号培养基:氯化钠氯化钠(5(5 g/L)g/
11、L),硝酸铵硝酸铵(3(3 g/L)g/L),其他无机盐其他无机盐(适量适量),X(45 g/L)X(45 g/L)。答复以下问题。答复以下问题。(1)(1)在号培养基中,在号培养基中,为微生物提供氮源的是为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是的有机物是_。(2)(2)假设将土壤悬浮液接种在号液体培养假设将土壤悬浮液接种在号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解基中,培养一段时间后,不能降解 X X 的细菌比例的细菌比例会会_,其原因是,其原因是_。(3)号培养基参加琼脂后可以制成固体培(3)号培养基参加琼脂后可以制成固体培养基,假设要以该
12、固体培养基培养目标菌并对菌养基,假设要以该固体培养基培养目标菌并对菌落落 进进 行行 计计 数数,接接 种种 时时,应应 采采 用用 的的 方方 法法 是是_。(4)(4)假设从号培养基中得到了能高效降解假设从号培养基中得到了能高效降解 X X的细菌,且该菌能将的细菌,且该菌能将 X X 代谢为丙酮酸,那么在有代谢为丙酮酸,那么在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供 _-7-7-和和_。解析:解析:(1)(1)牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏、牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源,而号、号培养蛋白胨为微生物提供了氮源,而号、号培养基中除基中除 X
13、 X 外的其他物质均不含碳,所以能为微生外的其他物质均不含碳,所以能为微生物提供碳源的有机物是物提供碳源的有机物是 X X。(2)(2)因为号培养基中因为号培养基中碳源只有碳源只有 X X,相当于是选择培养基,相当于是选择培养基,只有能降解只有能降解 X X的细菌才能增殖,而不能降解的细菌才能增殖,而不能降解 X X 的细菌因缺乏碳的细菌因缺乏碳源不能增殖。源不能增殖。(3)(3)要对菌落进行计数,要对菌落进行计数,应采用稀释应采用稀释涂布平板法进行接种。涂布平板法进行接种。(4)(4)在有氧条件下,在有氧条件下,丙酮酸丙酮酸参与细菌的有氧呼吸,可以为该菌的生长提供能参与细菌的有氧呼吸,可以为
14、该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。量和合成其他物质的原料。答案:答案:(1)(1)牛肉膏、牛肉膏、蛋白胨蛋白胨X X(2)(2)下降下降不不能降解能降解 X X 的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X X 的细菌能够增殖的细菌能够增殖(3)(3)稀释涂布平板法稀释涂布平板法(4)(4)能能量量合成其他物质的原料合成其他物质的原料3 3(2022全国卷)答复以下与细菌培养相(2022全国卷)答复以下与细菌培养相关的问题。关的问题。(1)(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳在细菌培养时,培养基中能同时提供碳-8-8-源、源、氮源的成分是氮源的成分是_(_(
15、填“蛋白胨“葡萄填“蛋白胨“葡萄糖或“NaNO糖或“NaNO3 3)。通常,制备培养基时要根据。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的所培养细菌的不同来调节培养基的 pHpH,其原因是,其原因是_。硝化细菌在。硝化细菌在没有碳源的培养基上没有碳源的培养基上 _(_(填“能够或填“能够或“不能“不能)生长,原因是生长,原因是_。(2)(2)用用平平板板培培养养细细菌菌时时一一般般需需要要将将平平板板_(_(填“倒置或“正置填“倒置或“正置)。(3)(3)单个细菌在平板上会形成菌落,单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初通常可根据菌落
16、的形状、大小、颜色等特征来初步步 区区 分分 不不 同同 种种 的的 微微 生生 物物,原原 因因 是是_。(4)(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。的微生物。解析:解析:(1)(1)细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养基,牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素,基,牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素,蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素,而葡萄糖不蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素,而葡萄糖不-9-9-能提供氮源,能提供氮源,NaNONaNO3 3不能为微生
17、物提供碳源。不同不能为微生物提供碳源。不同细菌生长繁殖所需要的最适细菌生长繁殖所需要的最适 pHpH 是不同的,是不同的,应该根应该根据培养细菌的不同来调节培养基的据培养细菌的不同来调节培养基的 pHpH。硝化细菌。硝化细菌是化能自养型细菌,是化能自养型细菌,可以空气中的可以空气中的 COCO2 2为碳源,为碳源,因因此在没有碳源的培养基上能够生长。此在没有碳源的培养基上能够生长。(2)(2)在平板培在平板培养基上培养细菌时,一般需将平板倒置,这样可养基上培养细菌时,一般需将平板倒置,这样可以防止皿盖上的水珠落入培养基。以防止皿盖上的水珠落入培养基。(3)(3)不同种类的不同种类的细菌所形成的
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