【精编】鱼雌酮E1酶联免疫分析.pdf
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1、文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持.1 鱼雌酮(E1)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T3.6pmol/L-120 pmol/L 使用目的:本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中雌酮(E1)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼雌酮(E1)水平。用纯化的鱼雌酮(E1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雌酮(E1),再与 HRP 标记的雌酮(E1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深
2、浅和样品中的雌酮(E1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中鱼雌酮(E1)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml1 瓶7 终止液6ml1 瓶2 酶标试剂6ml1 瓶8 标准品(240pmol/L)0.5ml1 瓶3 酶标包被板12 孔 8 条9 标准品稀释液1.5ml1 瓶4 样品稀释液6ml1 瓶10 说明书1 份5 显色剂 A 液6ml1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂 B 液6ml1/瓶12 密封袋1 个标本要求1标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反
3、复冻融2不能检测含NaN3的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120 pmol/L 5 号标准品150 l 的原倍标准品加入150 l 标准品稀释液60 pmol/L 4 号标准品150 l 的 5 号标准品加入150 l 标准品稀释液30 pmol/L 3 号标准品150 l 的 4 号标准品加入150 l 标准品稀释液15 pmol/L 2 号标准品150 l 的 3 号标准品加入150 l 标准品稀释液7.5 pmol/L 1 号标准品150 l 的 2 号标准品加入150 l
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