实验九碘淀粉比色法测定血清淀粉酶.ppt
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1、关于实验九碘淀粉比色法测定血清淀粉酶现在学习的是第1页,共11页原理uu血清(或血浆)中-淀粉酶催化淀粉分子中-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有-1,6糖苷键支链的糊精。在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较,从而推算出淀粉酶的活力单位。现在学习的是第2页,共11页uu试剂uu操作步骤uu计算uu参考值现在学习的是第3页,共11页试 剂uu1、0.4mg/ml底物缓冲液:4冰箱保存6个月。uu2、0.1mol/L碘贮备液:4避光保存6个月。uu0.01mol/L碘应用液的配制:将碘贮备液:蒸馏水=19稀释,现用现配4
2、避光保存。现在学习的是第4页,共11页操作步骤混匀,混匀,660nm660nm波长,波长,1cm1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度。光径,蒸馏水调零,测各管吸光度。*注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将 (空白空白OD-OD-测定测定OD)OD)控制在控制在0.050.1500.050.150之间之间 现在学习的是第5页,共11页uu1、单位定义:100ml血清(浆)中的AMS,在37与底物作用15分钟,水解5mg淀粉为1个单位。uu2、公式:计 算现在学习的是第6页,共11页样本最佳取样浓度摸索 uu根据不同动物血
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