疑难血型鉴定与疑难配血.pptx
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1、疑难血型疑难配血主要内容第1页/共63页血型-血液中各种成分的遗传多态性标志-血型包括红细胞血型、白细胞血型、血小板血型、血清蛋白型等-稀有血型-按美国稀有血型供者库规定,在人群中的频率1者,称稀有血型;在人群中的频率1/万者,称极稀有血型-我国对稀有血型尚无明确标准,一般认为Rh阴性就属稀有血型。第2页/共63页疑难血型-疑难血型是一种血型难以检定或判定的现象-在血型分类中没有疑难血型,文献中也查不到疑难血型的定义。-一份样本的血型检定是否疑难,除了样本本身的特殊性外,还与实验室设备,技术人员水平和经验等多种因素有关。-临床输血中,一般只涉及ABO和RhD血型,不涉及其他血型系统的疑难血型。
2、第3页/共63页ABO血型:根据红细胞膜上有无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型人血清中含抗B抗体,B型人血清中含抗A抗体,O型人血清中含抗A和抗B抗体,AB型人血清中不含ABO抗体。正定型:采用抗A和抗B试剂血清以凝集实验来检定红细胞上有无对应的A抗原或B抗原。反定型:采用A型试剂红细胞和B型试剂红细胞检测血清中有无相应的抗A抗体和抗B抗体。同时从正定型和反定型两项实验来检定样本的ABO血型。第4页/共63页O型红细胞的作用可以提示抗-H(如孟买型)、某些IgM类不规则抗体,冷凝素或自身抗体。第5页/共63页ABO血型检定方法-玻片法简单、快速,基本没有实验条件
3、的限制-试管法准确可靠-微板法适用于大批量样本实验不同的方法用途不同,实验条件不同第6页/共63页玻片法:把混合物均匀涂开,使其覆盖面积大约20mm20mm。缓慢连续倾斜转动玻片或纸片1分钟5分钟,观察结果。试管法:细胞的浓度2%-5%、最佳离心力(既不能大也不能小)结果观察:上清液有无溶血现象,细胞扣有无凝集块。微板法:细胞的浓度2%-5%、离心力(既不能大也不能小)结果观察:上清液有无溶血现象,细胞扣有无凝集块。第7页/共63页用洗涤充分的红细胞-可以去除红细胞上黏附的蛋白的干扰-可以去除样本血浆中含对试剂成分反应的物质。试管方法为经典方法离心机离心力校正。第8页/共63页疑难血型的特点-
4、正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+(正常凝集3+4+)-正反定型不一致-抗-A,B与抗-A/抗-B的凝集强弱不平行或凝集呈mf。第9页/共63页干扰血型正确检定的常见因素n生理因素-年龄-ABO亚型-先天无抗体-冷凝集素第10页/共63页n实验技术原因-样本混淆-静脉输液处采样-试剂质量问题或漏加试剂-实验操作不规范第11页/共63页n临床治疗-大量输液-静脉输入高分子药物静脉输入高分子药物如甘露醇、右旋糖酐,羟乙基淀粉等,可导致红细胞呈钱串状,干扰结果判定。-近期输过异型红细胞(包括宫内输血)或异型血浆-异基因造血干细胞移植第12页/共63页n疾病原因-白血病或某些其他造血系统恶性疾患,白血
5、病血型“变异”变少不变多,疾病缓解后,血型抗原恢复。-肝脏疾病、结核病等血浆蛋白紊乱干扰ABO正定型呈钱串样。-丙球蛋白过低血症-真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤等-不规则抗体-感染革兰阴性(G)菌感染第13页/共63页第14页/共63页第15页/共63页启动疑难血型分析思路推荐方法:三步法参考输血免疫学实验技术人卫社n第一步:排除人为因素或操作失误。首先需要排除在技术上可能发生的错误,规范地做重复试验-重新采集血样-核对试剂、器材核对试剂-复检ABO血型第16页/共63页n第二步:了解临床资料,分析可能的原因-病人年龄小于1岁或大于60岁吗?-病人的丙球蛋白浓度减低吗?-病人的诊断是白血病、肠
6、道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌瘤吗?-病人做过骨髓移植手术吗?-病人是一位经产妇吗?-病人近期输过血吗?第17页/共63页n第三步:排除不可能的原因,归纳不能排除的原因,设计验证试验。n举例说明红细胞抗原减弱或丢失-ABO亚型-正定型ABO抗原减弱红细胞额外反应-亚型抗体-自身抗体-获得性B抗原(类B)混合凝集(mf)第18页/共63页红细胞抗原减弱或丢失-ABO亚型u实验结果:正定型与反定型不一致,正定型被检红细胞凝集弱u解决办法-加抗-AB、抗A1、抗-H(抗-AB、-H与抗-A或抗-B的凝集强弱不一致)第19页/共63页第20页/共63页第21页/共63页-吸收/放散试验-高效价的人源血清-
7、血型物质检测-DNA鉴定亚型统计?第22页/共63页2.正定型ABO抗原减弱u实验结果:正定型与反定型不一致,或正定型被检红细胞凝集弱,或正定型呈mf样。u提示:临床诊断白血病或其他造血系统恶性疾患(如MDS),一般反定型不受干扰,(不会增强或出现额外反应)u偶见RhD抗原减弱者。u一般病情缓解后血型抗原强度恢复第23页/共63页u解决办法-抗原-抗体增强技术(4孵育1小时替代离心看结果)-加抗-AB-吸收/放散试验-血型物质检测-DNA鉴定u与亚型的区别第24页/共63页第25页/共63页红细胞额外反应1.亚型抗体u实验结果:抗-Aw+,抗-B0,AC2+,BC4+,OC0,u正定型被检红细
8、胞凝集弱u解决办法-加抗-AB、抗A1、抗-H-吸收/放散试验-血型物质检测-DNA鉴定第26页/共63页第27页/共63页2.不规则抗体u实验结果:抗-A4+,抗-B0,AC0,BC3+,OC2+,u临床提示:有输血史或妊娠史u解决办法:u-加-H和抗-ABu-抗体筛选与鉴定第28页/共63页第29页/共63页3.自身抗体u实验结果:抗-A+,抗-B+,AC+,BC+,OC+,直抗+。u临床提示:AIHA,自身红细胞被自身抗体致敏后在含蛋白的ABO定型血清中可能发生非特异性凝集u解决办法:-37盐水洗涤红细胞至直抗阴性后检定血型。-红细胞经甘氨酸/HCl或二磷酸氯喹放散至直抗阴性后检定血型。
9、第30页/共63页2.红细胞额外反应-获得性B抗原(类B)u临床提示:细菌感染(尤其是肠道细菌感染),以前为O型或A型。u实验结果:u解决方法-用酸化()抗-B检测(无凝集)-吸收放散实验,吸收抗-B的能力弱,区别于亚型*临床追踪,感染控制后“类B”现象消失第31页/共63页第32页/共63页混合凝集(mf)混合凝集(mf):部分红细胞凝集(大凝集块)部分红细胞均匀分布(背景浑浊)-近期输异型血-造血干细胞移植第33页/共63页ABO血型不同的造血干细胞移植后,如果植入存活,受者逐渐转变为供者血型的过程中,可能呈嵌合体状态。如果供者O型,受者非O型,受者的A或B抗原逐渐减弱,抗体逐渐被检出。是
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- 疑难 血型 鉴定
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