最新实验2植物细胞切片的制作PPT课件.ppt
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1、实验实验2 2植物细胞切片的制作植物细胞切片的制作二、二、实验实验用品和材料用品和材料1、显微镜、尖嘴镊子、刀片、载玻片、显微镜、尖嘴镊子、刀片、载玻片、盖玻片、吸水纸、解剖针、纱布、碘盖玻片、吸水纸、解剖针、纱布、碘液液。2、蚕豆(芹菜)茎和叶蚕豆(芹菜)茎和叶3、洋葱或玉米根尖纵切永久制片洋葱或玉米根尖纵切永久制片4、南瓜或向日葵茎横、纵切永久制片南瓜或向日葵茎横、纵切永久制片.5、洋葱鳞叶、马铃薯块茎。洋葱鳞叶、马铃薯块茎。石石蜡蜡切切片片机机(二)永久装片的制作(二)永久装片的制作1、材料预处理材料预处理 将材料装在将材料装在25ml规格的小指管,规格的小指管,加入甘油加入甘油酒精软化
2、剂(甘油酒精软化剂(甘油1份,份,70%酒精酒精1份)份)8ml封盖后在电热恒封盖后在电热恒温水浴锅温水浴锅5018h,第二天升温至,第二天升温至608h进行软化。进行软化。2、蜡块制取蜡块制取1)逐级脱水)逐级脱水 将上述经软化的材料转入将上述经软化的材料转入250ml已洗净的输液瓶中加入已洗净的输液瓶中加入40ml,70%酒酒精脱水精脱水24h。分别加入各级酒精。分别加入各级酒精40ml,70%酒精脱水酒精脱水24h,85%酒精脱水酒精脱水12h,95%酒酒精脱水精脱水2h,无水酒精脱水,无水酒精脱水1h。同时回收各。同时回收各级酒精。级酒精。2)染色)染色 番红酒精染液染色(番红酒精染液
3、染色(1g番红溶于番红溶于100ml 50%酒精中,纱布过滤)染色酒精中,纱布过滤)染色24h。3)透明)透明 转入转入1/2二甲苯二甲苯1/2无水酒精混合无水酒精混合液液20ml透明透明1h,纯二甲苯,纯二甲苯20 ml透明透明1h,再用纯再用纯二甲苯二甲苯20ml透明透明40min,并回收各液。,并回收各液。4)浸蜡)浸蜡 将透明过的材料转入将透明过的材料转入50ml小烧杯小烧杯,在恒温箱内加入预先在温度保持在在恒温箱内加入预先在温度保持在5658恒恒温箱溶化并过滤的石蜡温箱溶化并过滤的石蜡15ml,使材料完全被纯,使材料完全被纯二甲苯与石蜡浸没,并使温度保持在二甲苯与石蜡浸没,并使温度保
4、持在3638,过夜浸蜡过夜浸蜡24h,待二甲苯完全挥发,回收,待二甲苯完全挥发,回收石蜡石蜡,再加入溶化并过滤的纯石蜡再加入溶化并过滤的纯石蜡40ml,温度,温度保持在保持在36381h,升温至,升温至56,使石蜡保持,使石蜡保持溶化状态。溶化状态。5)包埋:)包埋:将浸蜡完全的材料倒入预先制将浸蜡完全的材料倒入预先制成的光滑的硬纸(成的光滑的硬纸(10.01.01.0)制成的)制成的纸盒中制取蜡块,在恒温箱门的低坎处摆纸盒中制取蜡块,在恒温箱门的低坎处摆好纸盒,并写上名称,使其一面紧贴恒温好纸盒,并写上名称,使其一面紧贴恒温箱的受热金属板,纸盒底面紧贴恒温箱底箱的受热金属板,纸盒底面紧贴恒温
5、箱底面金属板,倒入溶化石蜡面金属板,倒入溶化石蜡0.20.3厚的薄厚的薄层,层,2min后待薄层稍有凝固时将材料依次后待薄层稍有凝固时将材料依次排列于其上,再倒入溶化石蜡,并用烧热排列于其上,再倒入溶化石蜡,并用烧热的解剖针刺破其中的气泡,提着纸盒两端的解剖针刺破其中的气泡,提着纸盒两端预留的盒耳将纸盒浸入盛有冷水的盆中冷预留的盒耳将纸盒浸入盛有冷水的盆中冷却制成石蜡块。却制成石蜡块。6)石蜡块的修整:)石蜡块的修整:剥去纸盒,用锐利的剥去纸盒,用锐利的单面刀片把石蜡块切分为单面刀片把石蜡块切分为2长的小蜡块,并将长的小蜡块,并将各小蜡块的各面修整平,再将其修成长楔形。各小蜡块的各面修整平,再
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