血涂片制备与染色PPT幻灯片课件.ppt
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1、血涂片制备与染色1【目的】掌握血涂片的制备和染色方法。【原理】将一小滴血液均匀涂在玻片上,呈单层紧密分布,制成薄血片。用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色;细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色;中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染成淡紫红色。2实验用品器材:一次性采血针、消毒液、消毒棉签、洁净载玻片、推片试剂:Wrights(瑞氏)染液3【操作】1采血 2制作涂片 3干燥涂片 4标记涂片 5染色 6观察结果4
2、部位:WHO推荐中指或无名指尖内侧为宜,耳垂采血受温度影响大;半岁以下拇指或足部,特殊人员视情况而定。采血步骤及注意事项:应严格实行一人一针制;穿刺的深度的适当,切忌用力挤压,以免混入组织液,影响检验结果。用消毒干棉球擦去第一滴血,以后流出的血液可以使用。皮肤采血法(毛细血管采血法)5 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。6血涂片制备推片载玻片血液一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 37方法与步骤1:采血,挤出第二滴血置于载
3、玻片的右侧82.再取另一张边缘光滑的双凹片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状。9103045两玻片的角度以30-45为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成血液薄膜。113.成片,干燥一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明李四12 血涂片质量评价均匀、厚薄、头体尾、边缘、两侧注意:血滴大,速度快、角度大-血膜厚一张良好血涂片的标准是:厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、边缘整齐、两侧及两头留有空隙,血膜长度约4厘米。13不良血涂片144.标记涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四 123155.血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色液5-8滴后将液和液充分
4、混匀静置10分钟直接流水冲洗至无浮色(切勿先倒掉染液)涂片经水洗干燥后用油镜分类计数100个白细胞李四1 2 3涂片干燥后加瑞氏染色液5-8滴覆盖整个血膜1分钟16瑞氏染色原理 细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白,嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。17 图 瑞氏染色原理示
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