DB37_T 4204-2020 水貂阿留申病诊断与净化技术.docx
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1、ICS65.020.30B41DB37山东省地方标准DB37/T42042020水貂阿留申病诊断与净化技术Aleutiandiseasediagnoseandcleaning-uptechnologyforminkfarm2020-11-10发布2020-12-10实施山东省市场监督管理局发布DB37/T42042020前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:山东省动物疫病预防与控制中心、中华人民共和国北京海关检科院、齐鲁动物保健品有限公司、青岛农业大学、河北科技师范学院、威海市畜牧业
2、发展中心、山东省农业科学院家禽研究所、山东省动物卫生技术中心。本标准主要起草人:王贵升、张鹤晓、马泽芳、史秋梅、张洪学、赵国清、黄兵、徐启杰、王蕾、李玉杰、刘长浩、徐鸿、李金波、马慧玲、蔺晓月、崔凯、陈静、李富金、王士荣。IDB37/T42042020水貂阿留申病诊断与净化技术1范围本标准规定了水貂阿留申病临床诊断技术、病毒抗体检测技术、荧光PCR检测、病兽淘汰技术、兽群饲养环境控制技术和无害化处理的技术要求。本标准适用于水貂阿留申病感染动物的筛选、感染控制与净化。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,
3、其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB7959粪便无害化卫生标准GB8978污水综合排放标准SN/T2847水貂阿留申病检疫技术规范DB37/T2381规模化水貂养殖场生物安全体系DB37/T2660规模化毛皮动物养殖场消毒技术3临床诊断3.1流行病学3.1.1各个年龄、性别和品种的水貂对本病毒都有易感性。潜伏期为60天90天,有的长达7个月9个月,个别可达1年以上,病程1周左右,最快2天3天可死亡。感染率高,高达80%,死亡率低。3.1.2传染源主要为病貂和隐性感染貂。病毒的群间传播主要是来自感染貂的唾液、粪便和尿,及其污染的环境、饲料、
4、饮水和用具。经消化道、呼吸道及交配传染,也可通过母貂胎盘直接传递给子代。蚊虫叮咬、注射器针头等传播途径亦应引起重视。3.1.3有明显的季节性,秋冬季节的发病率与病死率明显地比其他季节高。3.1.4本病为终生毒血症。3.1.5雪貂、狐狸、貉也可感染发病。3.2临床症状3.2.1渐进性消瘦:病貂食欲时好时坏,貂体逐渐消瘦,严重病貂体重急剧下降。3.2.2出血和贫血:口腔、齿龈、软腭、硬腭和舌根有大量出血点和出血斑,内脏器官尤其是消化道出血,排出煤焦油样粪便。贫血症状口腔黏膜、眼结膜和阴道黏膜及脚趾苍白3.2.3渴欲增强。3.2.4如侵害神经系统,表现抽搐、痉挛、共济失调、后躯麻痹等症状,2天3天死
5、亡。3.2.5本病预后不良,对症治疗可缓解症状。常复发,最后衰竭死亡。1DB37/T420420203.3病理变化3.3.1尸体营养不良,消瘦、贫血,内脏出血。3.3.2肾肿大2倍3倍,橘黄色,黄白色斑点。表面凸凹不平,有斑点状出血,间有灰白色坏死灶,呈麻雀卵样;慢性病例肾略肿,呈灰黄色,包膜难于剥离,隆起部为土黄色颗粒、无光;凹陷部分为乳白色、圆形小点,皮质切面为乳白色小点。3.3.3肝、脾、淋巴结肿胀,肝呈土黄色,或见有灰白色斑点、质脆;胸腺体积缩小。3.3.4怀孕期发病可见死胎、胎儿液化、吸收或者出现木乃伊胎儿、子宫出血。3.3.5瘫痪病例可见脑膜出血。4抗体检测4.1样品的采集与保存4
6、.1.1准备工作:将准备采血的水貂全部单笼放置,一一对应清晰编号。1.5mL离心管或者1mL2mL注射器、离心管架、剪刀或指甲剪、酒精棉、干脱脂棉、记号笔,有条件的使用采血板和毛细管。4.1.2采血方法:将水貂保定,剪刀酒精棉消毒,中趾趾间毛细管采血或直接剪掉中趾趾尖挤出0.3mL0.5mL血,滴入离心管或注射器,脱脂棉压迫止血,注明编号。4.1.3样品保存及运输:28,不超过24h。4.2样品处理将装有血液的离心管静置,待血清析出,经4000r/min离心3min5min,取血清置于1.5mL离心管中。4.3对流免疫检测按照SN/T2847的要求进行检测。5荧光PCR检测5.1仪器设备5.1
7、.1荧光PCR检测仪及配套反应管(板)。5.1.2小型台式低温高速离心机(离心速度13000r/min以上)。5.1.3混匀器。5.1.4冰箱(28和-20两种)。5.1.5微量移液器(0.5L10L;2L20L;20L200L;100L1000L)及配套吸头。5.1.61.5mL离心管(无核酸酶)。5.1.7DNA核酸提取试剂5.2试剂或材料5.2.1阴性质控。5.2.2阳性质控。5.2.3蛋白酶K。2DB37/T420420205.2.4SDS。5.2.5或商品化实时荧光定量PCR试剂盒。5.3样品的采集与保存5.3.1拭子样品有咽喉拭子样品和肛拭子样品:a)咽喉拭子采样,采样时要将拭子深
8、入喉头及上腭来回刮3次5次,取咽喉分泌液。然后将拭子插入到装有1.0mLPBS无菌离心管管中,编号备用;b)肛拭子采样,采样时要将拭子深入肛门来回刮3次5次,取排泄物。然后将拭子插入到装有1.0mLPBS无菌管中,编号备用。5.3.2内脏或肌肉样品用无菌的剪刀和镊子剪取待检样品1.0g于研钵中充分研磨,再加5.0mLPBS混匀,然后将组织悬液转入无菌管中,编号备用。5.3.3血清或血浆用无菌注射器直接吸取至无菌管中,编号备用。5.3.4存放采集或处理的样本在28条件下保存,不超过24h。5.4实验步骤5.4.1样本病毒核酸DNA提取普通提取方法,或者采用经验证的病毒DNA提取试剂盒,按照试剂盒
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