【生物】动物细胞工程单元复习课件 2023—2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx
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1、第1节动物细胞工程一、必备知识知识点1动物细胞培养1.概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。2.基本条件(1)营养条件:糖类、氨基酸、无机盐、维生素等,此外,在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。(2)无菌、无毒的环境对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。在无菌环境下进行操作。定期更换培养液,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点1动物细胞培养1.概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。2.基本条件(3
2、)适宜的温度、pH和渗透压。(4)适宜的气体环境:95%空气+5%CO2。O2:细胞代谢所必需的。CO2:维持培养液的pH。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点1动物细胞培养3.培养过程(1)细胞贴壁:细胞贴附在培养瓶瓶壁上生长增殖的现象。(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常停止分裂增殖的现象。(3)胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理第一次使用的目的:使组织细胞分散开。贴壁细胞传代培养时使用的目的:使细胞从瓶壁上脱离下来,分散成单个细胞,便于分瓶后继续培养。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点1动物细胞培养3.培养过程(4)处理使细胞分散开的目的使细胞与营养充分接触,保证细胞所需
3、要的营养供应。保证细胞内有害代谢物的及时排出。特别提醒使用胰蛋白酶时,要控制好作用时间,因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质,长时间作用还会分解细胞膜蛋白等,对细胞造成损伤。进行动物细胞培养时不能用胃蛋白酶分散细胞,主要是因为胃蛋白酶在动物细胞培养环境中失去活性。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点2干细胞培养及其应用1.干细胞的主要种类、存在部位及特点主要种类存在部位特点胚胎干细胞(ES细胞)早期胚胎具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能,即具有发育全能性成体干细胞造血干细胞神经干细胞精原干细胞成体组织或器官内一般认为,成体干细胞具有组织特
4、异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力第1节动物细胞工程一、必备知识知识点2干细胞培养及其应用3.诱导多能干细胞(iPS细胞)(2)应用:治疗小鼠的镰状细胞贫血;现在用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。(3)优点:诱导过程无须破坏胚胎,且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可避免免疫排斥反应。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体1.动物细胞融合技术(1)概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。(2)原理:细胞膜的流动性。(3)方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
5、特别提醒灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合特有的方法,不能用于诱导植物原生质体融合。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体1.动物细胞融合技术(4)灭活病毒诱导细胞融合过程动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。经融合处理后的细胞不可以直接用于培养,还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促进了细胞间的融合,不能保证所有的细胞都发生融合,融合后形成的细胞也有多种。(5)结果:形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的杂交细胞。(6)意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。第1节动
6、物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体2.单克隆抗体及其应用(1)原理一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,但B淋巴细胞不能在体外大量增殖。骨髓瘤细胞能在体外大量增殖,但不能分泌抗体。B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖,又能产生单一抗体。第1节动物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体2.单克隆抗体及其应用(2)制备过程第1节动物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体2.单克隆抗体及其应用(2)制备过程筛选1筛选2筛选原因筛选目的筛选方法诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞筛选
7、出杂交瘤细胞用特定的选择培养基(HAT培养基)进行筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,因此经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞用96孔板培养和筛选:在每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞的情况下进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞第1节动物细胞工程一、必备知识知识点3动物细胞融合技术与单克隆抗体2.单克隆抗体及其应用(3)单克隆抗体的优点能准确识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合。可大量制备。(4)单克隆抗体的应用运载药物,
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