实验五血清尿素氮的测定(共2页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上 血清尿素氮的测定一.实验原理血清中尿素在氨基硫脲存在下,与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时,可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物),其颜色深浅与尿素含量成正比,与同样处理的尿素标准液比色。即可求得血清中尿素的含量。 由于反应在强酸中进行,所产生的羟胺是干挠物质,所以必须用氧化剂将其氧化除去。 在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定加入氨基硫脲可增加其稳定性,还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。二.实验操作取试管3支,注明空白管、标准管、测定管,按下表操作 管 试 号 剂测定管标准管空白管 血清(ml)0.02 尿素氮标准应用液(ml)0.02 蒸馏水(ml)0.
2、02 二乙酰一肟试剂(ml)0.50.50.5 尿素氮试剂(ml) 5.05.05.0混匀后置沸水浴中煮沸12分钟,取出在冷水中冷却5分钟,分光光度计波长540nm比色,以空白管调零,测定各管吸光度值。 三.计算 正常值参考范围3571428mmolL四.临床意义 血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、 胆红素及氨等。其中尿素含量约占l312。尿素是蛋白质代谢的产物通过肾脏排出,故测血清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验,并且其增高程度与病变的严重程度呈平行关系。五.试剂 1.尿素氮试剂:蒸馏水lOOml,浓硫酸44ml,85磷酸66ml,冷却至室温后,加氨基硫脲50mg,硫酸镉(3CdSO8H2O)2g,溶解后稀释至1000ml。 2.20gL二乙酰一肟试剂:称取二乙酰一肟20g,加入蒸馏水约900ml,溶解后稀释至1000ml.尿素氮标准贮存液(357mmolL):称取尿素1.072g溶解于蒸馏水中定容至1000ml。.尿素氮标准应用液(17.85mmolL);取贮存液5ml,加蒸馏水至100ml。专心-专注-专业
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