血清载脂蛋白A1免疫透射比浊法测定法作业指导书.doc
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1、血清载脂蛋白血清载脂蛋白 A1A1 免疫透射比浊法测定法作业指导书免疫透射比浊法测定法作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 免疫透射比浊终点测定法。使用抗Apo A1 抗体 和样品中的 Apo A1 进行抗原 -抗体反应。反应完成后, 用透射比浊法检测吸光度的变化反映Apo A1 浓度。 2 2. . 标标本本: 2.1 病人准备: 12 小时禁食。 2.2 类型:血清、肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放: 稳定性: 1525保存可稳定 5 天; 28保存可稳定 2 周;-20保存可稳定 3 个月; 标本不可反复冻融。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存
2、运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 标本细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 申能 APOA1 测定试剂盒(货号: 25171002101 试剂 1 525ml;试剂 2 125ml) 6.1.1 试剂组成 试剂 1(R1): Tris 缓冲液 pH7.5 100mmol/L 聚乙二醇( PEG)表面活性剂,稳定剂 适量 试剂 2(R2): Tris 缓冲液 pH7.5 100mmol/L 羊抗人 ApoA1 抗体(含稳定剂) 适量 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于 28,若无污染,可稳定至失效期。试 剂不可
3、冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30 天。 6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊 度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不 能继续使用。 6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防 腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂 6.2 校准品:建议使用DiaSys 公司提供的 TruCal Apo A1 校准品对自动分析仪进行校准,校准稳定期:4 周。具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8
4、. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤:参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限, 3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 按照公司配套校准品使用要求,用3 个不同水平的校准液,并以9g/L 氯化钠溶液为空白,
5、 经校准测定,仪器自动对校准品响应量通过合适的数学 模型如 Logit/Log,拟合成校准曲线。校准仪器后,在 病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 3 3 女性: 1.201.90g/L 男性: 1.101.70g/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1, ,2 2 : :载脂蛋白 A1(Apo A1)是高密度脂 蛋白(HDL)的主要结构蛋白,它可以去除细胞中的胆固 醇,因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究 表明以
6、Apo A1 表示的 HDL 水平与冠心病 (CHD)的流行 率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病 危险时,除检测脂蛋白 (a)与载脂蛋白 B 之外,同时 检测载脂蛋白 A1 能对脂类失调提供更多的信息,也可 替代高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)检测。一些研究表明, 当 Apo B 浓度上升 (女性 Apo B1.50g/L,男性 Apo B1.55g/L),而 Apo A1 浓度下降 (女性 Apo A11.20g/L,男性 Apo A11.10g/L),对于预测 CHD 危险非常有用。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围: 0.012.5g/L 14.2
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