血清甘油三酯酶试剂法测定法作业指导书.doc
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1、血血清清甘甘油油三三酯酯 酶酶试试剂剂法法 测测定定法法 作业指导书作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 脂蛋白酯酶( LPL) 、甘油激酶( GK) 、甘油 -3-磷 酸氧化酶( GPO) 、过氧化物酶 (POD)、Trinder 反应 偶联比色终点法。 反应式如下: LPL 甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸 GK 甘油 + ATP 甘油-3-磷酸 + ADP GPO 甘油-3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2 POD 2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O 2 2. . 标标本本: 2.1 病人准备: 12 小时禁食。 2.2
2、 类型:血清,肝素或EDTA 抗凝血浆。 3 3. . 标标本本存存放放: 血清稳定性: 2025保存可稳定 2 天;48保存可稳定 1 周;-20保存至少可稳定 1 年。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 申能甘油三脂试剂盒(货号:112 5717170 1 试剂 870ml) 6.1.1 试剂组成 Goods 缓冲液 pH 7.2 50mmol/L 4-氯酚 4mmol/L ATP 2mmol/L 镁离子 15mmol/L 4-氨基安替比林 0.5mmol/L 甘
3、油激酶( GK) 400U/L 过氧化物酶( POD) 2000U/L 脂蛋白酯酶( LPL) 2000U/L 甘油-3-磷酸氧化酶( GPO) 500U/L 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若 无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊 度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不 能继续使用。 6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95 g/L)为防 腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂 6.2 校准品:使用 DiaSys 公司提供的 TruCal
4、U 校准 品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤:参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限,
5、3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品甘油三脂校准 值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报 告可靠的检测结果。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 (单位: mmol/L) 合适范围: 2.3mmol/L 高度危险临界值: 2.34.5mmol/L 高度危险范围: 4.5mmol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义: 甘油三酯是甘油与3 个脂肪酸形
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