血清总胆固醇酶试剂法测定法作业指导书.doc
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1、血血清清总总胆胆固固醇醇酶酶试试剂剂法法 测测定定法法 作业指导书作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 胆固醇酯酶 (CHE)、胆固醇氧化酶 (CHO)、过氧化 物酶(POD)、Trinder 反应偶联比色终点法。反应式如 下: CHE 胆固醇酯 + H2O 胆固醇脂肪酸 CHO 胆固醇 O2 4-胆甾烯酮 H2O2 POD 2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 苯酚 醌亚胺 (显色) + 4H2O 2 2. . 标标本本: 2.1 病人准备: 12 小时禁食。 2.2 类型:血清,肝素或EDTA 抗凝血浆。 3 3. . 标标本本存存放放: 血清稳定性: 2025保存可稳定 1 周;4
2、8保存可稳定 1 周;-20保存可稳定 3 个 月。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 申能总胆固醇试剂盒(货号:112 1307170 1 试剂 870ml) 6.1.1 试剂组成 Goods 缓冲液 pH6.7 50mmol/L 酚 5mmol/L 4-氨基安替比林 0.3mmol/L 胆固醇酯酶 (CHE) 200U/L 胆固醇氧化酶 (CHO) 50U/L 过氧化物酶 (POD) 3000U/L 6.1.2 试剂准备 试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮
3、存:试剂保存于28,若 无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊 度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不 能继续使用。 6.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防 腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂 6.2 校准品:使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操
4、操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤:参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限, 3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品总胆固醇校准 值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报
5、告可靠检测结果。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 (mmol/L) 合适范围: 5.2mmol/L 高度危险临界值: 5.26.2mmol/L 高度危险范围: 6.2mmol/L 1 13 3. . 临临床床意意义义: 胆固醇由体细胞合成和来自对食物的 吸收 1 1 ,是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。 血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物,由它转运 胆固醇。脂蛋白有四种形式:高密度脂蛋白(HDL) , 低密度脂蛋白( LDL) ,极低密度脂蛋白( VLDL)和乳 糜微粒。 LDL 参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL 负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动 脉粥
6、样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与 冠心病 (CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。 即使总胆固醇在正常范围内,LDL-C 浓度的升高也预 示了高度危险。 HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它 与冠心病的发生呈负相关。事实上,低HDL-C 值是独 立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作 用,如果要对危险作较好的评估,必须另外进行 HDL-C 和 LDL-C 检测。 近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/ 或使用各种药物治疗 (特别他汀类药物 HMG CoA 还原 酶抑制剂 )临床试验,说明了降低总胆固醇和LD
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