抗球蛋白实验ppt课件.ppt
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1、抗球蛋白实验主要内容 前 言 实验原理 实验方法 临床应用 注意事项前 言 1908年,Carlo Moreschi首先描述该试验。 1945年,Coombs、Mourant和Race建立了抗球蛋白试验方法,故该试验又称为Coombs试验。前 言 抗球蛋白试验中球蛋白指IgG、 C3片段、 C4片段、IgM、IgA等,但主要指IgG和C3片段。 IgG型抗体与红细胞表面相应抗原结合后致敏,但不产生可见的凝集反应,属不完全抗体。 IgG具有很好的免疫原性,用其免疫动物 (或通过杂交瘤技术)可获得相应抗体,即抗IgG(亦称抗抗体)。抗球蛋白试验原理待检红细胞(表面可能包被有IgG或C3片段等球蛋白
2、)待检血清(可能含有IgG等球蛋白)已知抗原的红细胞待检红细胞(表面未知 的抗原)已知抗体 的血清产生可见凝集反应为阳性,否则为阴性。抗球蛋白血清(广谱和或单价)桥联作用桥联作用致敏致敏分 类 直接抗球蛋白试验:检测红细胞表面是否结合IgG、C3片段等免疫球蛋白。 间接抗球蛋白试验:检测血清中是否含有IgG等免疫球蛋白。直接抗球蛋白试验 检测红细胞上抗体(不完全抗体):试 剂 抗人球蛋白血清,分两类:广谱为抗IgG抗C3抗体,单价分别为抗IgG抗体、抗C3抗体。 不完全抗D血清(IgG型)。 AB型血清。 5%RhD阳性红细胞悬液(3个人O型红细胞洗涤后制备)。操作步骤 1、取受检查红细胞,以
3、生理盐水洗涤3次,末次洗涤后,将上层盐水倒尽,再以滤纸将管口附着的盐水吸去,再配成5%红细胞盐水悬液(尽量除去血清,防止其含有的抗体产生干扰) 。 2、取上述5%受检者红细胞盐水悬液1滴,移入试管(10mm60mm)内,加抗球蛋白血清1滴,混匀。操作步骤 3、阳性对照:用不完全抗D血清致敏的5%RhD阳性红细胞悬液1滴加抗球蛋白血清1滴,混匀。 4、阴性对照:正常人5%RhD阳性红细胞悬液1滴加抗球蛋白血清1滴,混匀。 5、受检者以及阳性、 阴性对照管同时以 1000rpm离心1min,轻轻摇动,观察结果。间接抗球蛋白试验 检测血清中抗红细胞抗体(不完全抗体):操作步骤反应物反应物受检管受检管
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