实验直接抗人球蛋白实验.ppt
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1、关于实验直接抗人球蛋白实验现在学习的是第1页,共16页第一部分第一部分 直接抗人球蛋白试验原理直接抗人球蛋白试验原理现在学习的是第2页,共16页直接抗人球蛋白试验原理直接抗人球蛋白试验原理 :直接抗人球蛋白试验是检测红细胞在体内是否被直接抗人球蛋白试验是检测红细胞在体内是否被不完全抗体致敏的实验。若红细胞在体内已被不完全不完全抗体致敏的实验。若红细胞在体内已被不完全抗体所致敏,加入的抗人球蛋白则可与红细胞表面不抗体所致敏,加入的抗人球蛋白则可与红细胞表面不完全抗体结合使红细胞相互连接起来出现凝集现象。完全抗体结合使红细胞相互连接起来出现凝集现象。直接抗人球蛋白试验阳性直接抗人球蛋白试验阳性 现
2、在学习的是第3页,共16页 致敏红细胞致敏红细胞 抗人球蛋白抗人球蛋白直接抗人球蛋白试验直接抗人球蛋白试验现在学习的是第4页,共16页抗球蛋白试剂通常有三种:抗球蛋白试剂通常有三种:v多特异性抗球蛋白试剂,简称多抗,多抗包括了抗多特异性抗球蛋白试剂,简称多抗,多抗包括了抗-IgG-IgG和抗和抗-C3-C3两两种成分,在直抗试验中常常作为初筛试剂使用。种成分,在直抗试验中常常作为初筛试剂使用。v单特异性抗单特异性抗-IgG-IgG试剂,简称抗试剂,简称抗-IgG-IgGv单特异性抗单特异性抗-C3-C3试剂,简称抗试剂,简称抗-C3-C3v在直抗试验中一旦出现阳性结果,通常需要抗在直抗试验中一
3、旦出现阳性结果,通常需要抗-IgG-IgG和抗和抗-C3-C3进一步分进一步分析。析。现在学习的是第5页,共16页 直接抗人球蛋白试验临床意义直接抗人球蛋白试验临床意义 检测体内红细胞是否被不完全抗体或补体致敏检测体内红细胞是否被不完全抗体或补体致敏,可用于:可用于:1 1)新生儿溶血病胎(婴)儿致敏红细胞检测)新生儿溶血病胎(婴)儿致敏红细胞检测 2 2)自身免疫溶血性贫血的诊断)自身免疫溶血性贫血的诊断 3 3)溶血性输血反应的研究)溶血性输血反应的研究 现在学习的是第6页,共16页 第二部分第二部分 直接抗人球蛋白试验操作直接抗人球蛋白试验操作现在学习的是第7页,共16页直接抗人球蛋白试
4、验难点:直接抗人球蛋白试验难点:难以获取致敏红细胞标本?难以获取致敏红细胞标本?解决方案:解决方案:试剂红细胞试剂红细胞+IgG+IgG抗抗D D血清(人工致敏血清(人工致敏RBC)RBC)现在学习的是第8页,共16页受检标本受检标本红细胞悬液配制:红细胞悬液配制:1.1.抗凝全血抗凝全血 2ml2ml(与抗凝剂混匀)(与抗凝剂混匀)1000g 1000g 离心离心3min3min 分离上层血浆分离上层血浆 2.2.压积红细胞的制备:压积红细胞的制备:NSNS洗涤三次,注意离心速度及时间洗涤三次,注意离心速度及时间 (1000g1000g离心离心1min1min)(注意操作轻柔,防溶血!)(注
5、意操作轻柔,防溶血!)3.3.取压积红细胞配成取压积红细胞配成5 5的红细胞悬液(的红细胞悬液(1d1d压积红细胞压积红细胞19d NS19d NS)现在学习的是第9页,共16页 人工制备人工制备IgGIgG型致敏红细胞(阳性对照):型致敏红细胞(阳性对照):1 1、采集、采集3 3人份人份O O型型RhDRhD阳性抗凝全血,阳性抗凝全血,1000g1000g离心离心3min3min,分离血浆;,分离血浆;红细胞经生理盐水(红细胞经生理盐水(NSNS)3 3次洗涤后,取次洗涤后,取3 3人份的压积红细胞各人份的压积红细胞各5 5滴滴混匀,备用;混匀,备用;2 2、用一次性吸管取压积红细胞、用一
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