微生物实验室培养基质量控制.ppt
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1、微生物实验室培养基质量控制宁夏疾病预防控制中心刘 翔培养基控制的目的培养基定义、组成与分类培养基的质量控制培养基使用中常见问题养基质量控制应该形成的记录培养基质量控制的目的 为获得准确、可靠的数据,只有对培养基进行有效的监控,才能从根本上保证检测结果的可信和有效。培养基定义、组成与分类定义:按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需要的各种营养物质,由人工配置的营养基质,专供微生物培养及分离鉴别、研究和保存专用。组成:碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子和水六大类营养物质。分类:物理状态、功能和制备工艺物理状态:液体培养基、固体培养基和半固体培养基。功能:基础培养基、选择性培养基和鉴别培养基。制备工艺
2、:自行配置、干燥培养基和即用型培养基。培养基分类培养基质量控制依据ISO/TS 11133.1-2000 ISO/TS 11133.1-2000 食品和动物饲料的微生物食品和动物饲料的微生物学学 培养基制备和生产导则培养基制备和生产导则 第第1 1部分部分 实验室培养基实验室培养基制备的质量保证一般导则制备的质量保证一般导则ISO/TS 11133.2-2003ISO/TS 11133.2-2003食品和动物饲料的微生物学 培养基制备和生产指南 第2部分:培养基性能试验实用导则 SN/T1538.1-2005:实验室培养基制备质量保证通则 SN/T1538.2-2007:培养基性能测试实用指南
3、WS/T232-2002:商业性微生物培养基质量检验规程干粉培养基的质量控制干粉培养基的质量控制培养基制备过程控制 称量、溶解、分装、灭菌理化学指标的质量控制 色泽、水分含量、澄清度、PH值及凝胶强度微生物学指标的质量控制指标生长率(定量方法和定性方法)选择性(半定量方法和定性方法)特异性(定性方法)微生物学指标的质量控制方法 各类培养基指控指标:基础培养基(生长率)选择性增菌液(生长率、选择性)选择性分离培养基(定性方法)生化鉴定培养基计数类培养基(生长率、选择性和特异性)适用于基础培养基:此类培养基含有适合大多数微生物生长需要的营养物质。例:脑心浸液肉汤培养基(BHI)质控菌株营养苛求菌乙
4、型溶血性链球菌短小芽孢杆菌测定方法制备108菌悬液,10倍梯度稀释至10-8。选取适宜的3-4个连续稀释度接种于9mL待检测培养基中,每个稀释度3管,35-37 培养3d。接种管2/3生长的最高稀释度即为该培养基的灵敏度灵敏度测定法(可以用定性方法代替)混合增菌法(定量)适用于选择性增菌培养基:此类培养基含有目标菌生长需要的特殊营养物质,及抑制非目标菌生长的抑制剂。例:亚硒酸盐胱氨酸增菌剂(SC肉汤)质控菌株鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌测定方法将沙门氏菌和大肠埃希氏菌的新鲜肉汤培养物按照1:99进行混合,接种于SC肉汤中,36培养18-24h将培养物适当稀释,去稀释液0.1mL涂布MAC平板结
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