有害物质的测定.ppt
《有害物质的测定.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《有害物质的测定.ppt(50页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、第八章第八章 食品中有害物质的检测食品中有害物质的检测 一、概述一、概述在在自然界所有的物质自然界所有的物质中中,当某物质或含有该物质的物质被当某物质或含有该物质的物质被按其原来的用途正常使用时按其原来的用途正常使用时,若因该物质而导致人体生理若因该物质而导致人体生理机能、自然环境或生态平衡遭受破坏时机能、自然环境或生态平衡遭受破坏时,则称该物质为则称该物质为有有害物质害物质。分类:分类:生物性有害物质生物性有害物质,如黄曲霉等;如黄曲霉等;化学性有害物质化学性有害物质,如如DDT、氯丙醇、河豚毒素、重金属、氯丙醇、河豚毒素、重金属、放射性元素等;放射性元素等;物理性有害物质物理性有害物质,如
2、金属屑、石子、动物排泄物等如金属屑、石子、动物排泄物等农产品中有害物质的来源农产品中有害物质的来源 不当地使用农药、兽药不当地使用农药、兽药,包括施药过量、施药期不当或使用被包括施药过量、施药期不当或使用被禁药物;禁药物;来自加工、贮藏或运输中的污染来自加工、贮藏或运输中的污染,如操作不卫生、杀菌不合要如操作不卫生、杀菌不合要求或贮藏方法不当等;求或贮藏方法不当等;来自特定食品加工工艺来自特定食品加工工艺,如肉类薰烤、蔬菜腌制等;如肉类薰烤、蔬菜腌制等;来自包装材料中的有害物质,某些有害物质可能移溶到被包装来自包装材料中的有害物质,某些有害物质可能移溶到被包装的食品中;的食品中;来自环境污染物
3、,如二恶英、多氯联苯等;来自环境污染物,如二恶英、多氯联苯等;来自食品原料中固有的天然有毒物质。来自食品原料中固有的天然有毒物质。二、二、常用的检测方法常用的检测方法 薄层色谱法薄层色谱法 (Thin layer chromatography)气相色谱法气相色谱法 (Gas chromatography,GC)高效液相色谱法(高效液相色谱法(HPLC)质谱法(质谱法(Mass Spectroscopy,MS)色谱色谱-质谱联用技术质谱联用技术酶联免疫吸附剂测定(酶联免疫吸附剂测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)第一节第一节 农产品中农药残留及其
4、检测农产品中农药残留及其检测农药农药是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草及其它有害生物草及其它有害生物,以及有目的地调节植物、昆虫生长的药以及有目的地调节植物、昆虫生长的药物的通称。物的通称。分类:分类:按用途可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂按用途可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂按化学成分可分为有机磷类、氨基甲酸酯类、有机氯类按化学成分可分为有机磷类、氨基甲酸酯类、有机氯类按药剂的作用方式按药剂的作用方式,可分为触杀剂、胃毒剂、熏蒸剂、内吸可分为触杀剂、胃毒剂、熏蒸剂、内吸剂剂按其毒性可分为高毒、中毒、低毒三类;按其毒性可分为高毒、中毒
5、、低毒三类;按农药在植物体内残留时间的长短可分为高残留、中残留和按农药在植物体内残留时间的长短可分为高残留、中残留和低残留三类。低残留三类。农药残留农药残留是指由于喷施农药后存留在环境和农产品、是指由于喷施农药后存留在环境和农产品、食品、饲料、药材中的农药及其降解代谢产物食品、饲料、药材中的农药及其降解代谢产物,还还包括环境背景中存有的污染物或持久性农药的残留包括环境背景中存有的污染物或持久性农药的残留物再次在商品中形成的残留。物再次在商品中形成的残留。农药残留量农药残留量是指农药本体物及其代谢物的残留量的是指农药本体物及其代谢物的残留量的总和总和,表示单位为表示单位为 mg/kg。当农药过量
6、或长期施。当农药过量或长期施用用,导致食物中农药残存数量超过最大残留限量导致食物中农药残存数量超过最大残留限量(MRL)时)时,将对人和动物产生不良影响将对人和动物产生不良影响,或通过或通过食物链对生态系统中其他生物造成毒害。食物链对生态系统中其他生物造成毒害。第一节第一节 农产品中农药残留及其检测农产品中农药残留及其检测土壤、水土壤、水、空气、空气家禽、畜家禽、畜植物、饲料植物、饲料水生动、植物水生动、植物肉、蛋、乳肉、蛋、乳人人农药进入人体的途径农药进入人体的途径非食物链途径第一节第一节 农产品中农药残留及其检测农产品中农药残留及其检测第一节第一节 农产品中农药残留及其检测农产品中农药残留
7、及其检测第一节第一节 农产品中农药残留及其检测农产品中农药残留及其检测一、有机氯农药残留及其检测一、有机氯农药残留及其检测有机氯农药(有机氯农药(Organochlorine pesticides,OCPs)是)是具有杀虫活性的氯代烃的总称。具有杀虫活性的氯代烃的总称。通常通常,OCPs 分为三种主要的类型分为三种主要的类型,即即 DDT 及其类似物、及其类似物、六六六和环戊二烯衍生物六六六和环戊二烯衍生物。这三类不同的氯代烃均为神经毒。这三类不同的氯代烃均为神经毒性物质性物质,脂溶性很强脂溶性很强,不溶或微溶于水不溶或微溶于水,在生物体内的蓄积在生物体内的蓄积具有高度选择性具有高度选择性,多
8、贮存于机体脂肪组织或脂肪多的部位多贮存于机体脂肪组织或脂肪多的部位,在碱性环境中易分解失效。在碱性环境中易分解失效。常见的有机氯农药有常见的有机氯农药有滴滴涕(滴滴涕(DDT)、六六六)、六六六、林丹、林丹、氯氯丹、硫丹、毒杀芬、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂等。丹、硫丹、毒杀芬、七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂等。具有较高的杀虫活性具有较高的杀虫活性,杀虫谱广杀虫谱广,对温血动物的毒性较低对温血动物的毒性较低,持续性较长持续性较长,加之加之生产方法简单生产方法简单,价格低廉价格低廉。因此。因此,这类杀虫这类杀虫剂在世界上相继投入大规模的生产和使用剂在世界上相继投入大规模的生产和使用,其中其中,
9、“六六六六六六”、DDT 等曾经成为红极一时的杀虫剂品种。等曾经成为红极一时的杀虫剂品种。20 世纪世纪 70 年代开始年代开始,许多工业化国家相继限用或禁用某些许多工业化国家相继限用或禁用某些 OCPs,其中主要是其中主要是 DDT、六六六、狄氏剂。、六六六、狄氏剂。原因:性质稳定原因:性质稳定,在自然界不易分解在自然界不易分解,属高残留品种属高残留品种,因此因此在世界许多地方的空气、水域和土壤中仍能够检测出微量在世界许多地方的空气、水域和土壤中仍能够检测出微量 OCPs 的存在的存在,并会在相当长时间内继续并会在相当长时间内继续影响食品的安全性影响食品的安全性,危害人类健康危害人类健康。第
10、一节第一节 农产品中农药残留及其检测农产品中农药残留及其检测GC-ECD 法测定有机氯农药残留法测定有机氯农药残留 在有机氯农药分析领域在有机氯农药分析领域,最为广泛使用的检测技术是最为广泛使用的检测技术是气相色谱电子捕获检测器(气相色谱电子捕获检测器(GC-ECD),它具有它具有灵敏度高、分离效果好、定量准确等特点。灵敏度高、分离效果好、定量准确等特点。原理原理:样品中的有机氯农药经石油醚提取:样品中的有机氯农药经石油醚提取,硅藻土硅藻土柱层析净化后柱层析净化后,采用气相色谱采用气相色谱-电子捕获检测器检测电子捕获检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。外标
11、法定量。参参考考国国家家标准准GB/T 5009.19二、有机磷农药残留及其检测二、有机磷农药残留及其检测有机磷农药(有机磷农药(OPPs)是含有)是含有 C-P 键或键或 C-O-P、C-S-P、C-N-P 键的有机化合物。键的有机化合物。在农药方面在农药方面,它不但可以作为杀虫剂、杀菌剂它不但可以作为杀虫剂、杀菌剂,而且也可以而且也可以作为除草剂和植物生长调节剂。作为除草剂和植物生长调节剂。大部分有机磷农药大部分有机磷农药不溶于水不溶于水,而溶于有机溶剂而溶于有机溶剂,在中性和酸在中性和酸性条件下稳定性条件下稳定,不易水解不易水解,在碱性条件下易水解而失效。在碱性条件下易水解而失效。常见的
12、有代表性的或影响较大的有机磷农药有常见的有代表性的或影响较大的有机磷农药有敌敌畏敌敌畏、二溴、二溴磷、久效磷、磷、久效磷、磷胺、磷胺、甲胺磷、乐果、甲胺磷、乐果、敌百虫敌百虫等。等。有机磷杀虫剂药效高有机磷杀虫剂药效高,易于被水、酶及微生物所降解易于被水、酶及微生物所降解,很少很少残留毒性等残留毒性等,20世纪世纪 40s-70s 年代得到广泛应用。年代得到广泛应用。有机磷杀虫剂存在抗性问题有机磷杀虫剂存在抗性问题,某些品种存在某些品种存在急性毒性过高急性毒性过高和和迟发性神经毒性迟发性神经毒性问题。从问题。从70 年代以后有机磷杀虫剂的研究年代以后有机磷杀虫剂的研究和开发速度大大放慢了和开发
13、速度大大放慢了,但在杀虫剂领域但在杀虫剂领域,目前它仍被广泛目前它仍被广泛使用。使用。过量或施用时期不当过量或施用时期不当是造成有机磷农药污染食品的主要原因。是造成有机磷农药污染食品的主要原因。有机磷农药主要是抑制生物体内的有机磷农药主要是抑制生物体内的胆碱脂酶胆碱脂酶的活性的活性,导致乙导致乙酰胆碱这种传导介质代谢紊乱酰胆碱这种传导介质代谢紊乱,产生产生迟发性神经毒性迟发性神经毒性,引起引起运动失调、昏迷、呼吸中枢麻痹甚至死亡。运动失调、昏迷、呼吸中枢麻痹甚至死亡。二、有机磷农药残留及其检测二、有机磷农药残留及其检测有机磷农残分析方法包括有机磷农残分析方法包括色谱法、波谱法和酶抑制法色谱法、
14、波谱法和酶抑制法三三大类大类,而以色谱法中的而以色谱法中的 GC 及及 HPLC 法应用的最多。法应用的最多。AOAC 在在 20 世纪世纪 80 年代就对大部分有机磷农药建年代就对大部分有机磷农药建立了气相色谱分析方法。近年来立了气相色谱分析方法。近年来,AOAC 又有近半数的又有近半数的有机磷农药建立了有机磷农药建立了 HPLC 检测法。检测法。我国食品卫生国家标准我国食品卫生国家标准 GB/T 5009.20-2003采用的采用的是气相色谱法检测有机磷农药残留。是气相色谱法检测有机磷农药残留。二、有机磷农药残留及其检测二、有机磷农药残留及其检测GCGC法法法法 原理原理:含有机磷的试样在
15、富氢焰上燃烧,以:含有机磷的试样在富氢焰上燃烧,以HPO碎碎片片的形式,放射出波长的形式,放射出波长526 nm的特性光,这种光的特性光,这种光通过滤光片选择后,由光电倍增管接收,转换成电通过滤光片选择后,由光电倍增管接收,转换成电信号,经微电流放大器放大后被记录下来。试样的信号,经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。量。二、有机磷农药残留及其检测二、有机磷农药残留及其检测参参考考国国家家标准准GB/T 5009.20三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留
16、量快速检测第一法第一法 速测卡法(纸片法)速测卡法(纸片法)原理原理:胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯对胆碱酯酶有抑制作用,使酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。类农药的存在。试剂试剂 3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)卡)3.2 pH7.5缓冲
17、溶液:分别取缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠与磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾,用无水磷酸二氢钾,用500mL蒸馏水溶解。蒸馏水溶解。仪器仪器 4.1 常量天平常量天平 4.2 有条件时配备有条件时配备372恒温装置。恒温装置。第一法第一法 速测卡法(纸片法)速测卡法(纸片法)整体测定法整体测定法 选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右左右见方碎片,取见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入放入带盖瓶中,加入10mL缓冲溶液,振缓冲溶液,振摇摇50次,静置次,静置2min以上。以上。取一片速测卡,用白色药片沾取提取液,放置取一片速测卡,
18、用白色药片沾取提取液,放置10min以上以上进行预反应,有条件时在进行预反应,有条件时在37恒温装置中放置恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折,用手捏将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。使红色药片与白色药片叠合发生反应。每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。第一法第一法 速测卡法(纸片法)速测卡法(纸片法)表面测定法(粗筛法)表面测定法(粗筛法)擦去蔬菜表面泥土,滴擦去蔬菜表面泥土,滴23滴缓冲溶液在蔬菜表面,用另滴缓冲溶液在蔬
19、菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。放置放置10min以上进行预反应,有条件时在以上进行预反应,有条件时在37恒温装置恒温装置中放置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折,用手捏将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。使红色药片与白色药片叠合发生反应。每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。第一法第一法 速测卡法(纸片法)速测卡法
20、(纸片法)结果判定结果判定 阳性阳性:酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制;阴性阴性:未抑制。未抑制。与空白对照卡比较,白色药片与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色不变色或略有浅蓝色均均为为阳性阳性结果。结果。白色药片变为白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同天蓝色或与空白对照卡相同,为,为阴性阴性结结果。果。对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。体农药品种和含量。第一法第一法 速测卡法(纸片法)速测卡法(纸片法)第二法第二法 酶抑制率法(分光光度法)酶抑制率法(分光光度法)*原理原理:在
21、一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯胆碱酯酶酶正常功能有正常功能有抑制抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化乙酰胆碱水解,其水解产物与显色剂反正常情况下,酶催化乙酰胆碱水解,其水解产物与显色剂反应,产生应,产生黄色物质黄色物质,用分光光度计在,用分光光度计在412nm处测定吸光度处测定吸光度随时间的随时间的变化值变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。试剂
22、试剂 pH8.0缓冲溶液:分别取缓冲溶液:分别取11.9g无水磷酸氢二钾与无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二磷酸二氢钾,用氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。蒸馏水溶解。显色剂显色剂:分别取:分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和)和15.6mg碳酸氢钠,用碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,缓冲溶液溶解,4冰箱中保存。冰箱中保存。底物底物:取:取25.0mg硫代乙酰胆碱,加硫代乙酰胆碱,加3.0mL蒸馏水溶解,摇匀后蒸馏水溶解,摇匀后置置4冰箱中保存备用。保存期不超过两周。冰箱中保存备用。保存期不超过两周。乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱酯酶:根据酶的活性情况,用缓冲溶液溶解,:根据
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 有害物质 测定
限制150内