实验六细胞融合实验.ppt
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1、实验六实验六(二二)鸡血细胞的体外融鸡血细胞的体外融合合 动物细胞融合是细胞工程动物细胞融合是细胞工程技术的重要手段之一,是研究技术的重要手段之一,是研究细胞遗传、基因定位、细胞免细胞遗传、基因定位、细胞免疫、病毒和肿瘤的重要手段。疫、病毒和肿瘤的重要手段。细胞生物学实验课件细胞生物学实验课件实验目的实验目的n了解聚乙二醇(了解聚乙二醇(PEG)诱导体外细胞融)诱导体外细胞融合的基本原理。合的基本原理。n通过通过PEG诱导鸡血细胞之间的融合实验,诱导鸡血细胞之间的融合实验,初步掌握细胞融合的基本方法。初步掌握细胞融合的基本方法。实验原理实验原理n细胞融合又称体细胞杂交,是指用人工细胞融合又称体
2、细胞杂交,是指用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞,随后,异核体同步进入有异核体细胞,随后,异核体同步进入有丝分裂,核膜崩溃,来自两个亲本细胞丝分裂,核膜崩溃,来自两个亲本细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞。核的杂种细胞。实验原理实验原理n依据融合过程采用的助融剂不同,细胞依据融合过程采用的助融剂不同,细胞融合可分为:融合可分为:病毒诱导的细胞融合,如仙台病毒病毒诱导的细胞融合,如仙台病毒(HVJ););化学因子诱导的细胞融合,如聚乙二醇化学因子诱导的细胞融合,如聚乙二醇(PEG););电场诱导的
3、细胞融合;电场诱导的细胞融合;激光诱导的细胞融合激光诱导的细胞融合实验原理实验原理nPEG是乙二醇的多聚化合物,可改变各是乙二醇的多聚化合物,可改变各类细胞的膜结构,使两细胞接触点处脂类细胞的膜结构,使两细胞接触点处脂类分子发生疏散和重组,诱导产生细胞类分子发生疏散和重组,诱导产生细胞融合。融合。n商品商品PEG存在一系列不同分子质量的多存在一系列不同分子质量的多聚体聚体(常用的有常用的有20012000),一般应用,一般应用PEG40006000的溶液,能够产生高频率的溶液,能够产生高频率的细胞融合。的细胞融合。方法与步骤方法与步骤n鸡血细胞储备液的制备鸡血细胞储备液的制备取鸡血,加入肝素(
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