《生物化学实验Ⅱ》实验教学大纲.doc
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1、生物化学实验实验教学大纲生物化学实验 实验教学大纲 (Biochemical E_periments) 课程编号:1922021 课程名称:生物化学实验 实验学分:1 实验学时:32 适用专业:生物技术、生物科学、生物科学(师范)、生物工程 实验名称与学时安排 序号 实验名称 学时 分配 序号 实验名称 学时 分配 1 SDS-聚丙烯胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量 8 4 糖酵解中间产物磷酸丙糖的鉴定 3 2 酵母 RNA 的提取、鉴定和定量测定 8 5 还原糖和总糖的测定 5 3 液化型淀粉酶活性测定 3 6 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 5 实验一、SDS-聚丙烯胺凝胶电泳测定蛋
2、白质的相对分子量 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)安装垂直板型电泳装置并制备凝胶 (2)蛋白质样品的预处理 (3)电泳以及电泳后的固定、染色与脱色 (4)M r 的计算 实验目的与要求:掌握 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法的原理,巩固垂直板电泳的基本操作,并学会用该方法测定蛋白质的相对分子量 注意要点:(1)封胶一定要牢固,否则会导致漏胶;(2)分离胶及浓缩胶用水封时整个电泳槽要保持水平,否则会影响胶面的平整;(3)电泳时功率不宜太大,否则会因发热使玻璃板裂开;(4)染色及脱色过程放到摇床上进行可使染色及脱色更充分,但要注意摇床摇摆的幅度要适宜,不能是染色液及脱色液摇出,更不能伤及凝胶本身
3、;(5)电泳完毕后电极缓冲液要分别回收再使用;(6)聚丙烯酰胺凝胶在没有聚合之前具有一定的神经毒性,并且能通过皮肤吸收,因此在操作过程中应避免与皮肤的直接接触,如不慎溅到应以流水反复冲洗。实验二、酵母 RNA 的提取和鉴定和定量测定 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)酵母 RNA 的提取 (2)RNA 的鉴定 (3)消化炉的使用 (4)定磷法测定 RNA 的含量 实验目的与要求:掌握提取 RNA 的方法和 RNA 组成成分的鉴定方法,学习和掌握离心机的使用方法,掌握 RNA 含量的定磷法测定,学习和掌握消化炉的使用方法 注意要点:(1)从酵母中提取 RNA 时注意避免温度在 20-70间停
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