DNS法淀粉含量测定388.pdf
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1、淀粉含量测定 侯曼玲,食品分析,化学工业出版社,北京,2004 1 实验原理 样品经除去脂肪和可溶性糖类后,其中的淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,并折算成淀粉。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,其中乳糖、麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计,在 540nm 波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原
2、糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以 0.9。2.材料与方法 2.1 实验材料 谷物种子 2.2 主要仪器 本实验用到的实验仪器有:具塞玻璃刻度比色管:25mL19;烧杯:100mL4;三角瓶:100mL1;容量瓶:100mL3,50mL3;刻度吸管:1mL4;2mL3;10mL1;沸水浴;冰浴;扭力天平;721 型可见分光光度计 2.3 实验试剂 乙醚,乙醇溶液(=85%),HCl 溶液(1+1),NaOH 溶液:配制的质量浓度分别为 10%和 40%,Pb(Ac)2 溶液(200g/L),Na2SO4 溶液(100g/L)甲基红指
3、示剂(2g/L)溶解 0.2g 甲基红于 60mL 乙醇中,加水稀释至 100mL 1mg/mL 葡萄糖标准液 准确称取 80烘至恒重的分析纯葡萄糖 100mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到 100mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至 100mL,混匀,4冰箱中保存备用。3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂 将 6.3g DNS 和 262mL 2M NaOH 溶液,加到 500mL 含有 185g 酒石酸钾钠的热水溶液中,再加 5g 结晶酚和 5g 亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至 1000mL,贮于棕色瓶中备用。2.4 实验步骤 制作葡萄糖标准曲线 取 7 支 25mL 具塞刻
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