实验室常用仪器设备的使用和维护.ppt
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1、实验室常用仪器设备的使用和维护卫生部肠道病原微生物重点实验室江苏省疾病预防控制中心 210009唐 震 2010-07-28Tel:025-83759376 Email:工欲善其事必先利其器常用仪器设备常用仪器设备扩增扩增区区试剂准备区试剂准备区ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.高速冷冻离心机漩涡振荡混旋器全自动样本处理系统PCR仪Luminex系统加样器标本制备区标本制备区扩增区扩增区加样器洁净工作台产物检测区产物检测区电泳仪凝胶成像系统毛细管电泳加样器基因
2、扩增实验室应基因扩增实验室应备有备有4套连续可调套连续可调加样器,分别用于加样器,分别用于试剂准备、样本处试剂准备、样本处理、扩增和产物检理、扩增和产物检测四个试验区。测四个试验区。加样器加样器加样器的类型加样器的类型P型移液器的型号和取液范围型移液器的型号和取液范围加样器的使用加样器的使用P型移液器的应用范围型移液器的应用范围加样器的校准加样器的校准加样器的类型单道连续可调式移液器单道连续可调式移液器多通道连续可调式移液器多通道连续可调式移液器单道连续移液器单道连续移液器单道移液管配合使用的移液器单道移液管配合使用的移液器P型移液器的型号和取液范围型号型号型号型号 所用量程范围(所用量程范围
3、(所用量程范围(所用量程范围(L L)GILSON GILSON eppendorfeppendorfP2 0.1 P2 0.1 2 2P10 0.5 P10 0.5 10 0.5 10 0.5 10 10 P20 2 P20 2 20 2 20 2 2020P100 20 P100 20 100 10 100 10 100100P200 30 P200 30 200 20 200 20 200200P1000 200 P1000 200 1000 100 1000 100 10001000加样器的使用加样器的使用1、前进式、前进式2、后退式、后退式吸液的位置把把按按钮钮压压至至第第一一停停点
4、点垂垂直直握握持持移移液液器器,使使吸吸嘴嘴浸入液样中,浸入液体深度视型号而定:浸入液样中,浸入液体深度视型号而定:P2和和P10 1mmP20和和P100 2-3mmP200和和P1000 2-4mmP5000 3-6mmP10ML 5-7mm设定容量值P型移液器的应用范围P2,P10:超微量计量及移液,应用于超微量计量及移液,应用于DNA定序及酶分析等。定序及酶分析等。P20,P100,P200和和P1000:应用于一般应用于一般水溶液、酸、碱的计量和移液。水溶液、酸、碱的计量和移液。P5000和和P10ML:大体积移液和计量。大体积移液和计量。加样器的校准校准方式校准方式 计量局计量局
5、厂家厂家 自较自较时间时间 视使用频率定(视使用频率定(6个月个月-1年)年)加样器-注意事项根据所需取液量选择相应的移液器及吸头,基因扩增实根据所需取液量选择相应的移液器及吸头,基因扩增实验要求使用验要求使用带滤芯带滤芯的吸头,防止交叉污染。的吸头,防止交叉污染。吸取液体时应缓慢匀速吸取,避免液体溅到移吸取液体时应缓慢匀速吸取,避免液体溅到移液器头上;打出液体后拇指不应松开按钮,将液器头上;打出液体后拇指不应松开按钮,将吸液嘴压掉后再将拇指松开,吸液嘴压掉后再将拇指松开,避免液体回吸避免液体回吸。在调整取液量的旋钮时,在调整取液量的旋钮时,不要用力过猛不要用力过猛,并应,并应注意计数器显示的
6、数值不要超过其可调范围。注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。连续可调式移液器不可在无吸头时使用,吸头连续可调式移液器不可在无吸头时使用,吸头有液体时不可平放或倒置。有液体时不可平放或倒置。加样器-注意事项注意事项操作时要慢和稳,吸嘴浸入液体深度要合适,吸液过程操作时要慢和稳,吸嘴浸入液体深度要合适,吸液过程尽量保持不变;改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸尽量保持不变;改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸嘴;发现吸嘴内有残液时必须更换;嘴;发现吸嘴内有残液时必须更换;新吸嘴使用前应先新吸嘴使用前应先预测预测。为防止液体进入移液器套筒内,注意以下几点:压放按为防止液体进入移液器套筒内,注意以下几
7、点:压放按钮时保持平稳;移液器不得倒转;吸嘴中有液体时不可钮时保持平稳;移液器不得倒转;吸嘴中有液体时不可将移液器平放;将移液器平放;P5000及及P10ML移液器一定要加过滤移液器一定要加过滤芯。芯。切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后,最好拆下套筒,用蒸使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后,最好拆下套筒,用蒸馏水清洗活塞及密封圈。馏水清洗活塞及密封圈。注意事项连续可调式移液器在取样加样过程中应注意移液嘴不能连续可调式移液器在取样加样过程中应注意移液嘴不能触及其他物品,以免被污染;移液嘴盒(架子)、废液触及其他物品,以免被污染;移液嘴盒(架子)、废
8、液瓶、所取试剂及加样的样品管应瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理摆放合理,以方便操作,以方便操作过程、避免污染为原则。过程、避免污染为原则。连续可调式移液器在使用完毕后应置于以液器架上,远连续可调式移液器在使用完毕后应置于以液器架上,远离潮湿及腐蚀性物质。离潮湿及腐蚀性物质。在取液之前,所取液体应在室温(在取液之前,所取液体应在室温(15-25 C)平衡;液平衡;液体温度与室温有异时,将吸嘴预洗多次再用;移液温度体温度与室温有异时,将吸嘴预洗多次再用;移液温度不得超过不得超过70。加样器-维护加样器应根据使用频率进行维护,但至少应每加样器应根据使用频率进行维护,但至少应每3个月进行一次,个月
9、进行一次,具体方法如下:具体方法如下:1一般维护可用中性洗涤剂(如洗餐具用的洗涤灵)清洁,或一般维护可用中性洗涤剂(如洗餐具用的洗涤灵)清洁,或者用者用60%的异丙醇,然后用蒸馏水反复洗涤,去除洗涤剂或异的异丙醇,然后用蒸馏水反复洗涤,去除洗涤剂或异丙醇,晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。丙醇,晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。2如果有液体进入加样器内的严重污染,可以将加样器拆开后如果有液体进入加样器内的严重污染,可以将加样器拆开后进行清洁,具体拆开步骤参照加样器说明书(不同的加样器的拆进行清洁,具体拆开步骤参照加样器说明书(不同的加样器的拆开方式有所不同)。开方式有所不同)。3高
10、压消毒,有的加样器的吸管部分可高压消毒(高压消毒,有的加样器的吸管部分可高压消毒(121及及1巴巴压力下消毒压力下消毒20分钟),如分钟),如Eppendor的的Research单道可调加样单道可调加样器。但消毒时不可超温超时,也不能挤压放置,以免造成变型。器。但消毒时不可超温超时,也不能挤压放置,以免造成变型。4各区(试剂准备、样本提取、扩增和产物检测)的加样器应各区(试剂准备、样本提取、扩增和产物检测)的加样器应有各自的标识,清洁和消毒时,应分别处理。有各自的标识,清洁和消毒时,应分别处理。请加强与供应商联系!常用仪器设备常用仪器设备扩增扩增区区试剂准备区试剂准备区ThemeGallery
11、 is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.高速冷冻离心机漩涡振荡混旋器全自动样本处理系统PCR仪Luminex系统加样器标本制备区标本制备区扩增区扩增区加样器洁净工作台产物检测区产物检测区电泳仪凝胶成像系统毛细管电泳(一)高速(冷冻)离心机(一)高速(冷冻)离心机电机电机转速转速最低转速最低转速最高转速最高转速转头转头消毒方式消毒方式标准配件系统标准配件系统噪音噪音标本制备区标本制备区高速(冷冻)离心机高速(冷冻)离心机-使用方法使用方法离心机应放置在离心机应放置在水平坚固水平坚固的地板或平
12、台上,并力求使的地板或平台上,并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先平衡打开电源开关,按要求装上所需的转头,将预先平衡好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时好的样品放置于转头样品架上(离心筒须与样品同时平衡),关闭机盖。平衡),关闭机盖。按功能选择键,设置各项要求:温度、速度、时间、按功能选择键,设置各项要求:温度、速度、时间、加速度及减速度,带电脑控制的机器还需按储存键,加速度及减速度,带电脑控制的机器还需按储存键,以便记忆输入的各项信息。以便记忆输入的各项信息。待离心机待离心机完全停止转动完
13、全停止转动时打开机盖,取出离心样品,时打开机盖,取出离心样品,用柔软干净的布用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁擦净转头和机腔内壁,待离心机腔内,待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。温度与室温平衡后方可盖上机盖。机体应始终处于水平位置,外接电源系统的电机体应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线。压要匹配,并要求有良好的接地线。开机前应检查转头按装是否牢固,机腔有无异开机前应检查转头按装是否牢固,机腔有无异物掉入。物掉入。离心机运行时,离心机周围离心机运行时,离心机周围30cm范围内不能范围内不能有人和危险物品。有人和危险物品。挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的
14、离挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成事故。事故。高速(冷冻)离心机高速(冷冻)离心机-使用方法使用方法易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。离心。在没有相应的防护措施时,不能离心有毒的、放在没有相应的防护措施时,不能离心有毒的、放射性的物质或病原微生物。射性的物质或病原微生物。离心机运行时不可人为地打开盖子。离心机运行时不可人为地打开盖子。如果转头和盖子有可见的腐蚀或磨损的痕迹,则如果转头和盖子有可见的腐蚀或磨损的痕迹,则应立即停止使用。应立即停止使用。使用
15、的玻璃或塑料离心管应能承受相应的离心力使用的玻璃或塑料离心管应能承受相应的离心力并大小合适。非金属转头不可用紫外照射。并大小合适。非金属转头不可用紫外照射。高速(冷冻)离心机高速(冷冻)离心机-使用方法使用方法高速(冷冻)离心机高速(冷冻)离心机-维护和保养维护和保养转头应定期清洗和消毒。转头应定期清洗和消毒。擦拭离心机腔时动作要擦拭离心机腔时动作要轻,以免损坏机腔内温度感应器。轻,以免损坏机腔内温度感应器。使用消毒液处理时,温度不可超过使用消毒液处理时,温度不可超过25,时间不,时间不可超过规定时间。可超过规定时间。可以用高压消毒的转头,应在清洗后,可以用高压消毒的转头,应在清洗后,121消
16、消毒毒20分钟,转头务必平放,并不受挤压,以免变分钟,转头务必平放,并不受挤压,以免变形。形。每次操作完毕;应作好使用情况记录,并定期对每次操作完毕;应作好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。机器各项性能进行检修。离心过程中若发现异常现象,应立即关闭电源,离心过程中若发现异常现象,应立即关闭电源,报请有关技术人员检修。报请有关技术人员检修。(二)全自动样本处理系统(二)全自动样本处理系统全自动样本处理系统全自动样本处理系统全自动样本处理系统全自动样本处理系统全自动样本处理系统清洁和维护(清洁和维护(日常日常)1、每周都用不掉毛的布蘸上去离子水擦拭仪器的表面(包、每周都用不掉毛的布蘸上去
17、离子水擦拭仪器的表面(包括恒温箱周围区域和清洗区)。如果发生了试剂泼洒,用括恒温箱周围区域和清洗区)。如果发生了试剂泼洒,用70%的乙醇清洗。在清洁仪器前要关闭电源,拔下电源插头。的乙醇清洗。在清洁仪器前要关闭电源,拔下电源插头。2、分析仪的可移动内部部件如试剂载盘,样本载盘等要用、分析仪的可移动内部部件如试剂载盘,样本载盘等要用不掉毛的布并蘸上不掉毛的布并蘸上70%的乙醇来清洗。的乙醇来清洗。3、要定期检查仪器的周围,以确保良好的通风环境,书本,、要定期检查仪器的周围,以确保良好的通风环境,书本,纸张或其它物品有没有干扰仪器的通风。纸张或其它物品有没有干扰仪器的通风。4、如果样本或其它有生物
18、危害的物质泼洒到仪器或任何系、如果样本或其它有生物危害的物质泼洒到仪器或任何系统载盘上,首先用统载盘上,首先用10%(v/v)的漂白粉溶液()的漂白粉溶液(0.5%次氯次氯酸钠)擦拭,然后用酸钠)擦拭,然后用70%的乙醇彻底擦洗改区域或载盘。的乙醇彻底擦洗改区域或载盘。全自动样本处理系统清洁和维护(定期)清洁和维护(定期)加强与供应商的联系加强与供应商的联系,定期做维护保养工作。,定期做维护保养工作。常用仪器设备常用仪器设备扩增扩增区区试剂准备区试剂准备区ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Gu
19、ild Design Inc.高速冷冻离心机漩涡振荡混旋器全自动样本处理系统PCR仪Luminex系统加样器标本制备区标本制备区扩增区扩增区加样器洁净工作台产物检测区产物检测区电泳仪凝胶成像系统毛细管电泳扩增区(基于扩增区(基于PCR扩增的仪器)扩增的仪器)普通普通PCR仪仪实时荧光实时荧光PCR仪仪Luminex分析系统分析系统实时PCR仪的发展历史1993年第一篇文章发表1996年罗氏的LightCycler注册1997年ABIPrism7700,第一个高通量的实时荧光PCR仪1999年Bio-RadiCycler2000年更多质优价廉的仪器进入市场。PCR扩增仪的原理及发展状况扩增仪的原
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