实验一普通光学显微镜的结构与使用方法精选PPT.ppt
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1、关于实验一普通光学显微镜的结构与使用方法第1页,讲稿共39张,创作于星期日一、实验目的和要求了解显微镜的构造和各部分的作用,掌握显微镜的使用技术和保养措施学会简易临时玻片的制作方法和生物绘图方法第2页,讲稿共39张,创作于星期日二、实验内容在显微镜下练习观察动、植物玻片标本。在显微镜下练习观察动、植物玻片标本。制作洋葱鳞叶内表皮细胞临时装片,进行显制作洋葱鳞叶内表皮细胞临时装片,进行显微镜操作练习。微镜操作练习。在显微镜下观察池塘水样中的微小生物在显微镜下观察池塘水样中的微小生物。第3页,讲稿共39张,创作于星期日三、相关知识与实验原理三、相关知识与实验原理要知道的几个重要的分辨率要知道的几个
2、重要的分辨率人眼:人眼:0.2mm/250mm光学显微镜:光学显微镜:0.2um电子显微镜:电子显微镜:0.2nm第4页,讲稿共39张,创作于星期日 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学光学显微镜显微镜和和电子显微镜电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。光)为光源,后者则以电子束为光源。1.1.光学显微镜光学显微镜 普通生物显微镜由普通生物显微镜由3 3部分构成:部分构成:照明系统:包括光源和聚光器。照明系统:包括光源和聚光器。光学放大系统:由物
3、镜和目镜组成,光学放大系统:由物镜和目镜组成,是显微镜的主体。是显微镜的主体。机械装置:用于固定材料和观察方便,机械装置:用于固定材料和观察方便,包括镜台包括镜台(载物台载物台)、调节器和、调节器和、物镜转换器物镜转换器(旋转器旋转器)等。等。尼康尼康E-600显微镜显微镜 显微镜概述显微镜概述第5页,讲稿共39张,创作于星期日普通光学显微镜的构造普通光学显微镜的构造目镜目镜粗准焦螺旋粗准焦螺旋 镜筒镜筒细准焦螺旋细准焦螺旋转换器转换器物镜物镜镜臂镜臂聚光器聚光器反光镜反光镜镜座镜座第6页,讲稿共39张,创作于星期日2.荧光显微镜 尼康E800荧光DIC显微镜 荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝
4、红色、核蓝色)第7页,讲稿共39张,创作于星期日3.3.激光共聚焦激光共聚焦扫描显微镜扫描显微镜 LCSM照片蓝色为细胞核,绿色为微管 第8页,讲稿共39张,创作于星期日4.暗视野显微镜暗视野显微镜 dark field microscope聚光镜中央有挡光片,视野背景是聚光镜中央有挡光片,视野背景是黑的,只允许被标本反射和衍射的黑的,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,物体边缘是亮的。光线进入物镜,物体边缘是亮的。可观察可观察 4200nm的微粒子,分辨的微粒子,分辨率比普通显微镜高率比普通显微镜高50倍。倍。第9页,讲稿共39张,创作于星期日把把透透过过标标本本的的可可见见光光的的光光程
5、程差差变变成成振振幅幅差差,从从而而提提高高了了各各种种结结构构间间的的对对比比度度,使使各各种种结结构构变变得得清清晰晰可可见见。在在构构造造上上,相相差差显显微微镜镜有有不不同同于于普普通通光学显微镜两个特殊之处。光学显微镜两个特殊之处。1.1.环形光阑(环形光阑(annular diaphragmannular diaphragm):位于光源与聚光器之间。):位于光源与聚光器之间。2.2.相相位位板板(annular annular phaseplatephaseplate):物物镜镜中中加加了了涂涂有有氟氟化化镁镁的的相相位位板板,可可将将直射光或衍射光的相位推迟直射光或衍射光的相位推
6、迟1/41/4。5.5.相差显微镜相差显微镜第10页,讲稿共39张,创作于星期日第11页,讲稿共39张,创作于星期日Four types of light microscope Bright-field microscope:the image obtained by the simple transmission of light through a cell in culture Dark-field microscope:the cell appears as a bright object against a dark background Phase-contrast microsc
7、ope:visualizing living cells Differential-interference-contrast microscope:visualizing living cells第12页,讲稿共39张,创作于星期日 普通光学显微镜的基本结构普通光学显微镜的构造可分为两部分:一为机械装置,二为光学系统。机械装置由镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋推动器、粗动螺旋和微动螺旋微动螺旋等组成。光学系统由目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈虹彩光圈等组成第13页,讲稿共39张,创作于星期日组成光学放
8、大系统照明系统机械和支架系统物镜光源折光镜聚光镜滤光片目镜显微镜的结构显微镜的结构第14页,讲稿共39张,创作于星期日普通光学显微镜基本构造第15页,讲稿共39张,创作于星期日光学显微镜基本结构:光学显微镜基本结构:1.照明灯照明灯(Lamp)2.聚光器聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹载物台和切片夹(Mechanical stage and specimen retainer)4.推进器推进器(Mechanical stage adjustment knob)5.物镜物镜(Objectives)6.粗细螺旋粗细螺旋(Course and fine focus knob)7.目镜目
9、镜(Oculars)8.照相机等接口照相机等接口(Connection to camera,etc.)第16页,讲稿共39张,创作于星期日1 1.物镜物镜物镜物镜 物镜(objective)是光学显微镜成像系统中决定其分辨率或叫分辨本领的最关键部件。物镜标识物镜标识第17页,讲稿共39张,创作于星期日2 2 2 2.目镜目镜 目镜的作用是把物镜放大的实象再放大一级,并把物象映目镜的作用是把物镜放大的实象再放大一级,并把物象映入观察者的眼中,实质上目镜就是一个放大镜。显微镜的分入观察者的眼中,实质上目镜就是一个放大镜。显微镜的分辨率能力是由物镜的数值孔径所决定的,而目镜只是起放大辨率能力是由物镜
10、的数值孔径所决定的,而目镜只是起放大作用。对于物镜不能分辨出的结构,目镜放的再大,也仍然作用。对于物镜不能分辨出的结构,目镜放的再大,也仍然不能分辨出。不能分辨出。3 3 3 3.聚光镜聚光镜 聚光镜装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚聚光镜装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚光镜,在使用数值孔径光镜,在使用数值孔径0.400.40以上的物镜时,则必须具有以上的物镜时,则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光的性质,而且将光线聚焦于被检物体上,光源射来的光的性质,而且将光线聚焦于被检物体上,以得到最好的照明效果。
11、以得到最好的照明效果。第18页,讲稿共39张,创作于星期日 显微镜的光学原理显微镜的光学原理成像原理成像原理 光路:光源光路:光源虹彩光圈虹彩光圈聚光镜聚光镜通光孔通光孔标本(一定要透明)标本(一定要透明)物镜物镜镜筒镜筒目镜目镜眼。眼。第19页,讲稿共39张,创作于星期日第20页,讲稿共39张,创作于星期日第21页,讲稿共39张,创作于星期日显微镜的放大倍数显微镜的放大倍数第22页,讲稿共39张,创作于星期日四、实验器材显微镜、擦镜纸、镊子、小剪、载玻片、显微镜、擦镜纸、镊子、小剪、载玻片、盖盖玻片、解剖针、表面皿、吸水纸、碘液、清水、玻片、解剖针、表面皿、吸水纸、碘液、清水、香柏油、二甲苯
12、。香柏油、二甲苯。洋葱鳞茎,棉花老根横切玻片标本,洋葱鳞茎,棉花老根横切玻片标本,池塘水样池塘水样第23页,讲稿共39张,创作于星期日五、实验方法和步骤(一)显微镜的使用1.1.取镜和安放取镜和安放 置显微镜于平稳的实验台上,镜座距实验置显微镜于平稳的实验台上,镜座距实验台边沿约为台边沿约为34cm。镜检者姿势要端正。镜检者姿势要端正。(取、放显微镜时应一手握住镜臂,一手托住底座,使显微镜保持取、放显微镜时应一手握住镜臂,一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提;且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜直立、平稳。切忌用单手拎提;且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察,以减少
13、眼睛疲劳,也便于边观察边绘图或纪均应双眼同时睁开观察,以减少眼睛疲劳,也便于边观察边绘图或纪录。)录。)第24页,讲稿共39张,创作于星期日 2.2.观察前的准备工作观察前的准备工作 (1)(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要双 眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。(2)(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。(3)(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整 和正常,并对载物台、目镜
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