12操作步骤.ppt
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1、基因工程简介基 因操作的基本步骤示意图三、基因操作的基本步骤三、基因操作的基本步骤提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达从从供体细胞的供体细胞的DNA中直接中直接分离基因方法:鸟枪法分离基因方法:鸟枪法(1)鸟枪法的过程:)鸟枪法的过程:(一)提取目的基因的途径(一)提取目的基因的途径逆转录法逆转录法根据已知氨基酸根据已知氨基酸序列合成序列合成DNA人工合成基因(真核细胞)人工合成基因(真核细胞)目的基因的目的基因的mRNA单链单链DNA逆转录逆转录双链双链DNA(目的基因)目的基因)合成合成供体细胞中供体细胞中DNA许多许多DNA片段片段限制酶限制酶结合结
2、合运载体运载体导入导入受体细胞受体细胞目的基因目的基因分离分离DNA复制复制(2)逆转录法的过程:)逆转录法的过程:氨基酸序列氨基酸序列推测推测mRNA核苷酸序列核苷酸序列推测推测基因的核苷酸序列基因的核苷酸序列化学合成化学合成目的基因目的基因.提取目的基因的方法提取目的基因的方法直接分离基因直接分离基因鸟枪法鸟枪法(散弹射击法)(散弹射击法)优优点点:操操作作简简便便缺缺点点:工工作作量量大大 具具有有一一定定的的盲盲目目性性mRNADNA逆转录逆转录蛋白质mRNADNA推测推测人工合成法三、基因操作的基本步骤三、基因操作的基本步骤优点:优点:缺点:缺点:专一性强,还可以合成自然界中专一性强
3、,还可以合成自然界中不存在的基因,因此有着广泛的不存在的基因,因此有着广泛的应用前景。应用前景。操作过程麻烦,技术条件要求较高操作过程麻烦,技术条件要求较高G A A T T CG A A T T CC T T A A GC T T A A GC T T A AC T T A AGGA A T T CA A T T CGG观观察察与与思思考考3、目的基因与运载体结合A C GA C GT TG C AG C AT T抗菌素抗性基因抗菌素抗性基因A C GA C GT TG C AG C AT T目的基因目的基因A C GA C GT TG C AG C AT T标记基因标记基因观观察察与与思思
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