(通用版)高考生物一轮复习 第十单元 生物技术实践 第36讲 微生物的培养与应用课件-人教版高三全册生物课件.ppt
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1、第第3636讲微生物的培养与应用讲微生物的培养与应用考情分析备考导航考情分析备考导航考考纲纲解解读读全国卷五年考全国卷五年考题统计题统计最新考最新考纲纲核心内容核心内容微生物的分离和微生物的分离和培养培养1.1.无菌技无菌技术术2.2.平板划平板划线线法和稀法和稀释释涂布平板涂布平板法接种微生物法接种微生物20152015全国全国卷卷T39;T39;20142014全国全国卷卷T39;T39;20132013全国全国卷卷T39;T39;20112011全国卷全国卷T39T39培养基培养基对对微生物微生物的的选择选择作用作用1.1.利用利用选择选择培养基培养基筛选筛选微生物微生物的方法的方法2.
2、2.常用微生物的常用微生物的计计数方法数方法:显显微微镜镜直接直接计计数和稀数和稀释释涂布平板涂布平板法法20152015全国全国卷卷T39(2);T39(2);20142014全国全国卷卷T39;T39;20112011全国卷全国卷T39(1)(3)T39(1)(3)考点一微生物的实验室培养考点一微生物的实验室培养知识梳理知识梳理 自主学习自主学习 夯实基础夯实基础1.1.培养基培养基(1)(1)概念概念:人们按照微生物对人们按照微生物对 的不同需求的不同需求,配制出供其生配制出供其生长繁殖的长繁殖的 。营养物质营养物质营养基质营养基质(2)(2)成分成分:(3)(3)分类分类:按照物理性质
3、可以分为按照物理性质可以分为 和固体培养基。和固体培养基。液体培养基液体培养基2.2.无菌技术无菌技术(1)(1)含义含义:培养微生物的操作中培养微生物的操作中,所有所有 的方法的方法。(2)(2)关键关键:防止外来杂菌的污染。防止外来杂菌的污染。(3)(3)无菌技术的方法、类型和对象无菌技术的方法、类型和对象 连一连连一连 防止杂菌污染防止杂菌污染3.3.大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养(1)(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基过程制备牛肉膏蛋白胨固体培养基过程:计算计算 溶化溶化灭菌灭菌倒倒平板。平板。(2)(2)纯化大肠杆菌的原理纯化大肠杆菌的原理:在培养基上将细菌稀释或分散成在培养基上
4、将细菌稀释或分散成 ,形成单个菌落形成单个菌落,此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。(3)(3)微生物的常用接种方法微生物的常用接种方法:和稀释涂布平板法和稀释涂布平板法,接种过接种过程仍然是程仍然是 操作。操作。称量称量单个细胞单个细胞平板划线法平板划线法无菌无菌重点透析重点透析 剖析考点剖析考点 拓展深化拓展深化1.1.微生物的纯化培养微生物的纯化培养方法方法平板划平板划线线法法稀稀释释涂布平板法涂布平板法注意注意事事项项(1)(1)接种接种环环的灼的灼烧烧第一次划第一次划线线前前:杀杀死接种死接种环环上的上的微生物微生物,避免避免污污染培养物染
5、培养物每次划每次划线线前前:杀杀死残留菌种死残留菌种,保保证证每次划每次划线线菌种来自上次划菌种来自上次划线线末端末端划划线结线结束后束后:杀杀死残留菌种死残留菌种,避免避免污污染染环环境和感染操作者境和感染操作者(2)(2)灼灼烧烧接种接种环环之后之后,要冷却后再要冷却后再进进行操作行操作,以免温度太高以免温度太高杀杀死菌种死菌种(3)(3)划划线时线时最后一区域不要与第一最后一区域不要与第一区域相区域相连连(4)(4)划划线线用力要大小适当用力要大小适当,防止用力防止用力过过大将培养基划破大将培养基划破(1)(1)稀稀释释操作操作时时:每支每支试试管及其中的管及其中的9 9 mLmL水、移
6、液管等均需水、移液管等均需灭灭菌菌;操作操作时时,试试管口和移液管管口和移液管应应在离火焰在离火焰 1 12 cm 2 cm 处处(2)(2)涂布平板涂布平板时时涂布器用体涂布器用体积积分数分数为为70%70%酒精消酒精消毒毒,取出取出时时,让让多余酒精在多余酒精在烧烧杯中滴杯中滴尽尽,然后将沾有少量酒精的涂布器然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃在酒精灯火焰上引燃不要将不要将过热过热的涂布器放在盛放酒的涂布器放在盛放酒精的精的烧烧杯中杯中,以免引燃其中的酒精以免引燃其中的酒精酒精灯与培养皿距离要合适酒精灯与培养皿距离要合适,移移液管管液管管头头不要接触任何物体不要接触任何物体2.2.
7、消毒和灭菌的辨析消毒和灭菌的辨析条件条件结结果果常用方法常用方法应应用范用范围围消毒消毒较为较为温和温和的物理或的物理或化学方法化学方法仅杀仅杀死物体死物体表面或内部表面或内部的部分的部分对对人人体有害的微体有害的微生物生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体化学化学药剂药剂消毒法消毒法用酒精擦拭双手用酒精擦拭双手,用用氯氯气消毒水源气消毒水源灭灭菌菌强强烈的理烈的理化因素化因素杀杀死物体内死物体内外所有的微外所有的微生物生物,包括芽包括芽孢孢和和孢孢子子灼灼烧灭烧灭菌法菌法接种工具接种工具干干热灭热灭菌法菌法玻璃器皿、金属玻璃器皿、金属工具工具
8、高高压压蒸汽蒸汽灭灭菌法菌法培养基及容器的培养基及容器的灭灭菌菌题组例练题组例练 分类例练分类例练 提炼方法提炼方法1.(20151.(2015江西景德镇三检江西景德镇三检)无菌操作是微生物接种技术的关键无菌操作是微生物接种技术的关键;传统发酵传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题均要无菌操作。回答下列相关问题:(1)(1)消毒和灭菌是两个不同的概念消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅
9、指杀死一部分对人体有害的病原菌而对丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理。皮肤皮肤饮用水饮用水牛奶牛奶注射器注射器培养皿培养皿接种环接种环培养基培养基果汁果汁酱油酱油手术刀手术刀A.A.B.B.C.C.D.D.以上全部以上全部(2)(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整,接种前要进行接种前要进行,在整个微生物的分离和培养中在整个微生物的分离和培养中,一定一定要注意在无菌条件下进行。要注意在无菌条件下进行。(3)(3)在
10、微生物的实验室培养中在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用的入侵。下图是利用法进行大肠杆菌接种法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意操作上应注意:每次划线前要每次划线前要;冷却后从上一区划线末端开始划冷却后从上一区划线末端开始划;首尾区首尾区。(4)(4)培养大肠杆菌时培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是养基应采用的检测方法是 ,观察培
11、养基上是否观察培养基上是否有菌落产生。有菌落产生。(5)(5)有位同学在家制作泡菜时有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素霉素,结果发酵失败结果发酵失败,原因可能是原因可能是 。解析解析:(1)(1)对于活体或高温导致其营养成分破坏的物质对于活体或高温导致其营养成分破坏的物质,采用消毒处理采用消毒处理,除此之外可采用灭菌处理。除此之外可采用灭菌处理。应采用消毒应采用消毒,应采用应采用灭菌灭菌,故选故选A A。(2)(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH,pH,培养基接培养基
12、接种前要进行高压蒸汽灭菌种前要进行高压蒸汽灭菌,再进行倒平板。再进行倒平板。(3)(3)微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染,本题是采用平板划线本题是采用平板划线法接种法接种,需要注意的是连续划线时需要注意的是连续划线时,每次划线前要灼烧接种环每次划线前要灼烧接种环,同时划线同时划线结束首尾不能相连。结束首尾不能相连。(5)(5)制作泡菜时制作泡菜时,向泡菜坛中加入青霉素向泡菜坛中加入青霉素,由于青霉素具有杀菌作用由于青霉素具有杀菌作用(包包括乳酸菌括乳酸菌),),因此发酵失败。因此发酵失败。答案答案:(1)A(1)A(2)pH(2)pH高压蒸汽灭菌高压
13、蒸汽灭菌(3)(3)平板划线平板划线灼烧接种环灼烧接种环不连接不连接(不重叠不重叠)(4)(4)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当时间将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当时间(5)(5)青霉素杀死了乳酸菌青霉素杀死了乳酸菌2.(20152.(2015四川眉山模拟四川眉山模拟)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效具有较强的抑菌功效,某生物兴趣小组的同学设计了如下实验某生物兴趣小组的同学设计了如下实验(符合无符合无菌操作要求菌操作要求)。用无菌水漱口用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏向漱口液中加入适量的该中药牙膏;配制牛
14、肉膏蛋白胨固体培养基配制牛肉膏蛋白胨固体培养基;将上述样品接种到培养基上将上述样品接种到培养基上,在适宜条件下进行培养在适宜条件下进行培养;一段时间后一段时间后,对培养结果进行观察并进行菌落计数对培养结果进行观察并进行菌落计数请分析上述实验过程并回答下列问题。请分析上述实验过程并回答下列问题。(1)(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、计算、称量、溶化、灭菌、灭菌、;培养基在分装前往往要采用培养基在分装前往往要采用法灭菌。法灭菌。(2)(2)本实验样品接种时最好采用本实验样品接种时最好采用法。培养一段时间后法。培养一段时间后,培养
15、培养基表面长出菌落基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的每一个标准菌落来源于样品中的。(3)(3)本实验设计中的一个明显错误是本实验设计中的一个明显错误是,请加以改正请加以改正 。(4)(4)证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是证明所用培养基已经彻底灭菌的方法是 。解析解析:本题考查微生物的培养和实验设计相关知识本题考查微生物的培养和实验设计相关知识。(1)(1)配制培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板配制培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,培养基通培养基通常会用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。常会用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)(2)因为要对菌落进行计数所以应采用稀释涂布平板法
16、因为要对菌落进行计数所以应采用稀释涂布平板法,一个标准菌落一个标准菌落应是来自一个活菌繁殖而来的。应是来自一个活菌繁殖而来的。(3)(3)该实验中未设置对照实验该实验中未设置对照实验,这是不符合实验要求的这是不符合实验要求的,实验结果的说服实验结果的说服力也不强。因此应将漱口液均分成两份力也不强。因此应将漱口液均分成两份,一份加牙膏一份加牙膏,一份不加牙膏一份不加牙膏,且且在相同的条件下接种培养在相同的条件下接种培养,观察实验结果并比较得出结论。观察实验结果并比较得出结论。(4)(4)要验证培养基是否灭菌彻底应设置一个空白对照要验证培养基是否灭菌彻底应设置一个空白对照,即将未接种的培即将未接种
17、的培养基放在适宜的条件下培养养基放在适宜的条件下培养,若无菌落出现若无菌落出现,则证明培养基灭菌彻底。则证明培养基灭菌彻底。答案答案:(1)(1)倒平板高压蒸汽灭菌倒平板高压蒸汽灭菌(2)(2)稀释涂布平板一个活菌稀释涂布平板一个活菌(或一个细胞或一个细胞)(3)(3)未设置对照实验应将漱口液均分成两份未设置对照实验应将漱口液均分成两份,一份加牙膏一份加牙膏,一份不加一份不加牙膏牙膏,且在相同的条件下接种培养且在相同的条件下接种培养(4)(4)将未接种的培养基放在适宜的条件下培养一段时间将未接种的培养基放在适宜的条件下培养一段时间,若无菌落出现若无菌落出现,则证明培养基灭菌彻底则证明培养基灭菌
18、彻底考点二微生物的分离与计数考点二微生物的分离与计数知识梳理知识梳理 自主学习自主学习 夯实基础夯实基础1.1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数稀释涂布平板法稀释涂布平板法 样品稀释样品稀释 酚红酚红 2.2.分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离重点透析重点透析 剖析考点剖析考点 拓展深化拓展深化1.1.筛选微生物的两个实例比较筛选微生物的两个实例比较比比较较项项目目土壤中分解尿土壤中分解尿素的素的细细菌的分离菌的分离分解分解纤维纤维素的微生物的分素的微生物的分离离方法方法利用以尿素利用以尿素为为唯一氮源的唯一氮源的选择选择培养基培养基进进行行选择选
19、择培养培养利用利用纤维纤维素素为为唯一碳源的唯一碳源的选择选择培养基培养基进进行行选择选择培养培养原原理理只有分解尿素的只有分解尿素的细细菌能菌能够够合成合成脲脲酶酶,才能在以尿素才能在以尿素为为唯一氮源的培养基上生唯一氮源的培养基上生长长因因为为培养基中含有丰富的培养基中含有丰富的纤维纤维素素,因此能因此能够够分解分解纤纤维维素的微生物具有更多的素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖生存机会而大量繁殖鉴鉴定定在培养基中加入酚在培养基中加入酚红红指示指示剂剂,指示指示剂变红说剂变红说明尿素明尿素被分解被分解,从而从而说说明菌落中明菌落中的菌体的菌体为为分解尿素的分解尿素的细细菌菌刚刚果果红红染
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